ОФІЦІЙНІ ВІДОМОСТІ
Винахід
- Назва
- РЕКОМБІНАНТНА МОЛЕКУЛА ДНК ДЛЯ ПОЛІПШЕННЯ ВРОЖАЙНОСТІ ПШЕНИЦІ В УМОВАХ СТРЕСУ ПОСУХИ
- Номер реєстрації
- 130804
- Номер заявки
- a202202675
- Стан запису
- Винаходи · код 2
- Дата подання
- 26 липня 2022
- Дата реєстрації
- 21 травня 2026
- Дата публікації
- Не оприлюднено
- Класифікація
- A01G22/20, C07K14/415, C12N15/82
КОРОТКИЙ ОПИС
Реферат
Винахід стосується рекомбінантної молекули ДНК, яка поліпшує врожайність сільськогосподарських культур пшениці в умовах стресу посухи.
Показати формулу
1. Рекомбінантна молекула ДНК для поліпшення врожайності сільськогосподарських культур пшениці в умовах стресу посухи, де рекомбінантна молекула ДНК містить послідовності, представлені SEQ ID NO: 7, 8, 9, 10, 1 та 2. 2. Рекомбінантна молекула ДНК за п. 1, яка виявлена в рослині пшениці, клітині рослини, насінині, рослині-нащадкові, частині рослини або товарному продукті, що походять із трансгенної рослини пшениці.
ПОВНИЙ ОПИС
Опис винаходу або моделі
Показати повний текст
Галузь техніки, до якої належить винахід Винахід стосується галузі отримання, розведення і сільськогосподарського використання рослин. Більш конкретно, він стосується трансгенного об'єкта пшениці IND-ВВ412-7, нуклеотидних послідовностей, рослин, частин рослин, насіння, клітин, сільськогосподарських продуктів, і способів детекції та отримання, пов'язаних з трансгенним об'єктом пшениці IND-лл412-7. Рівень техніки для винаходу Поліпшення урожайності культур і їхніх характеристик стало необхідним для задоволення попиту на продовольство. Завдяки біотехнологічним розробкам в поєднанні з сільськогосподарським використанням, розроблені нові сільськогосподарські культури зі здатністю адаптації до різноманітних умов зовнішнього середовища і/або екологічних умов. Під час росту рослини піддаються впливу багатьох абіотичних стресів: засухи, засолення, високих і низьких температур, надмірної радіації, низької доступності поживних речовин, ущільнення ґрунту, що запобігає розвитку коріння, і т. д. (Duque et al., 2013; Sayed, 2003). Всі з них можуть впливати в деякій точці на ріст і розвиток рослини, так само як на урожайність. Розумно передбачати, що будь-який з цих факторів зовнішнього середовища може зустрітися в ході життєвих циклів сільськогосподарської культури в полі. У цьому випадку запускаються комплексні механізми відповіді, які згодом можуть відображатися на вимірюваннях, що проводяться, оскільки їх отримують внаслідок накопичення таких ефектів стресу. Один із найбільш загальновживаних способів пом'якшення негативних ефектів на сільськогосподарські культури базується на трансгенних об'єктах, тобто, вставці генів, які становлять інтерес, у геном сільськогосподарської культури-мішені. Однак, отримання і відбір комерційно придатного трансгенного об'єкта вимагає широких дослідження, аналізу і характеризації великої кількості індивідуальних об'єктів трансформації. Це робить можливим відбір об'єкта, що містить бажану ознаку, можливим розробку фенотипічних і сільськогосподарських характеристик, необхідних для такого об'єкта, щоб бути придатним для комерційних цілей, без негативного ефекту на інші ознаки сільськогосподарської культури. Цей спосіб вимагає отримання трансгенних об'єктів, які можна молекулярно і фенотипічно характеризувати, для ідентифікації і відбору об'єкта, який експресує гетерологічний ген, який становить інтерес, з урахуванням бажаного фенотипу, що підлягає отриманню. Відбір об'єкта передбачає стадії лабораторної розробки, так само як тести, що проводяться в контрольованих умовах або в полі і/або в теплицях. Є необхідним аналізувати відповідь на об'єкт протягом декількох років, у багатьох локалізаціях і в багатьох умовах зовнішнього середовища, щоб відібрати об'єкт, що відповідає необхідним фенотипічним і генетичним характеристикам, так само як необхідним комерційним ознакам. Цей винахід стосується цього типу комерційно придатного об'єкта, що забезпечує нові переважні ознаки у пшениці. Існує широка множина генів, які можна використовувати для отримання комерційно придатного об'єкта. Ген, експресія якого представляє особливий інтерес, являє собою ген, який кодує фактор транскрипції HAHB4. HAHB4 (який означає гомеобокс-4 Helianthus annuus (Helianthus Annuus Homeobox-4)) являє собою фактор транскрипції соняшника, що належить до сімейства HD-Zip. Експресія гена HaHB4 регулюється на рівні транскрипції за допомогою зовнішніх факторів зовнішнього середовища, таких як доступність води і засолення ґрунту, так само як фітогормонів, пов'язаних з цими факторами, абсцизової кислоти і етилену. У патенті AR81216B2 описаний ген HaHB4, що індукується нестачею води і абсцизовою кислотою, і кодуючий фактор транскрипції соняшника типу HD-Zip. У цьому патенті також описані виділення і характеризація гена, і його введення в модельну рослину Arabidopsis thaliana. Однак, в ньому не опубліковані ні трансгенні рослини, які становлять комерційний інтерес, які несуть об'єкт за цим винаходом, ні їхні переважні властивості, відносно супутніх абіотичних стресів, які зустрічаються в сільськогосподарських умовах. У патенті AR81216B2 відсутня також згадка, що стосується конкретного відбору об'єкта, який експресує ген HaHB4, щоб зберігати основну ознаку, що становить інтерес, тобто, засухостійкість, без впливу на інші сільськогосподарські ознаки. Крім того, в патентній заявці AR090110A1 описаний модифікований ген HaHB4, зокрема HaHB4.2, що індукується нестачею води і абсцизовою кислотою, і кодуючий модифікований фактор транскрипції соняшника типу HD-Zip, зокрема, mod1HaHB4. У цій публікації описане отримання і характеризація конструкцій, які експресують модифікований HaHB4.2, і їх введення в модельну рослину Arabidopsis thaliana. У загальних рисах, в цій публікації описане також отримання і відбір трансгенних об'єктів сої, пшениці і кукурудзи, які містять ген HaHB4.2. Детальний опис винаходу Цей винахід стосується рослин пшениці, стійких до абіотичного стресу, що містять об'єкт IND- 412-7. Ці рослини представляють переваги для їхнього росту в несприятливих умовах зовнішнього середовища, таким чином, забезпечуючи більш високу урожайність. Більш конкретно, цей винахід стосується об'єкта пшениці, названого IND-,,412-7, що має репрезентативне насіння, зареєстроване в Американській колекції типових культур (ATCC) під номером доступу PTA-126141, разом з його потомством. Цей винахід також стосується рослин пшениці, які містять об'єкт IND-ии412-7, представлений за допомогою послідовностей SEQ ID No.: 1 і SEQ ID No.: 2. Трансгенна вставка, присутня в об'єкті за винаходом і в зареєстрованому насінні, містить ген селективного маркера bar і ген HaHB4, що забезпечує толерантність до абіотичного стресу. Ген bar, що походить із Streptomyces hygroscopicus, кодує білок PAT (фосфінотрицинацетилтрансферазу). Ген HaHB4 походить із рослини соняшника, виду Helianthus annuus, і кодує білок типу HD-Zip I, що має білковий домен типу гомеодомену, асоційований з лейциновою блискавкою, яка забезпечує толерантність до абіотичного стресу, в основному до засухи. Регуляцією генів, які становлять інтерес, можна керувати за допомогою різних промоторних послідовностей з різними рівнями експресії, чутливістю і тканиноспецифічністю. Експерту в цій галузі відомо, що будь-який промотор або термінатор нуклеїнової кислоти, що спрямовує або регулює експресію гена, який становить інтерес, можна використовувати без впливу на суть винаходу. Зокрема, об'єкт, розроблений за цим винаходом, містить промотор гена убіквітину 1 (prUBI-1) кукурудзи і термінатор Tnos для гена bar, що надає стійкість до гербіциду глюфосинату амонію. Крім того, об'єкт знову містить промотор гена убіквітину 1 кукурудзи (prUBI-1) і термінатор Tnos для регуляції експресії кодуючої ділянки HaHB4 (фігура 1 і фігура 2). Інші аспекти винаходу стосуються потомства рослин пшениці, насіння і/або відновлюваних частин рослин, де насіння і потомство містять об'єкт пшениці IND-//412-7, так само як харчових продуктів для споживання людиною або тваринами, що походить із них. Винахід також стосується частин рослин, що містять об'єкт IND-яя412-7, включаючи, без обмеження, пилок, насінні зачатки, квіти, пагони, коріння, листя, клітини вегетативних ядер і інші клітини рослин, що містять об'єкт IND-рр412-7. Винахід також стосується рослин пшениці, які містять об'єкт пшениці IND-44412-7, що характеризуються толерантністю до множини абіотичних стресів, таких як засуха, засолення, низькі і високі температури, надмірна радіація, низька доступність поживних речовин, ущільнення ґрунту і т. д., і різні комбінації цих факторів. Цей винахід частково стосується культивування рослин, толерантних до абіотичних стресів. Крім того, він стосується нового об'єкта трансформації рослини пшениці, який містить полінуклеотиди, як описано в цьому описі, які вставлені в специфічні ділянки в геномі пшениці, що забезпечують специфічні генетичні і фенотипічні ознаки. У деяких варіантах здійснення, цей об'єкт/полінуклеотид може бути "пакетованим" з іншими ознаками, включаючи, наприклад, агрономічні ознаки і толерантність до гербіцидів і/або комах. Однак, цей винахід стосується рослин, що містять індивідуальний об'єкт, як описано в цьому описі. Додаткові ознаки можна пакетувати в геномі рослини або в тому ж самому локусі, що і об'єкт IND-мм412-7, наприклад, за допомогою схрещування рослин, ретрансформації трансгенної рослини, що містить об'єкт IND-44412-7, або додавання нових ознак за допомогою інтеграції, націлюваної гомологічною рекомбінацією. У одному варіанті здійснення, цей винахід включає дві хромосомні ділянки пшениці, локалізовані на хромосомі 2. В деяких варіантах здійснення, ділянки, що піддаються націлюванню, містять гетерологічні нуклеїнові кислоти. Хромосомні ділянки пшениці локалізовані між фланкувальними послідовностями, визначеними на фігурі 3 (SEQ ID No: 7, 8, 9 і 10). У одному варіанті здійснення, цей винахід стосується способу отримання трансгенних рослин пшениці, який включає вставку гетерологічної нуклеїнової кислоти в одному або декількох специфічних положеннях в межах хромосоми 2. Зокрема, спосіб включає трансформацію клітини або культури клітин з використанням послідовностей ДНК, описаних в SEQ ID No.: 1 і SEQ ID No.: 2, і регенерацію клітини стабільним способом для отримання нової цільної рослини. Трансформацію цієї клітини рослини можна провести за допомогою різноманітних способів, незалежно від того, чи вони фізичні, вірусні чи хімічні, включаючи, серед інших, біобалістику, електропорацію, бактеріальну трансформацію або комбінацію цих способів. Всі з них добре відомі експерту в цій галузі. Зокрема, за цим винаходом використовують генну гармату для проштовхування молекул плазмідної ДНК з послідовностями, які становлять інтерес (фігура 2), більш точно – бомбардування з використанням плазмід pIND4-HB4 і pIND4-BAR (фігура 1 і фігура 2; SEQ ID No: 3 і SEQ ID No: 4). Крім того, цей винахід стосується тестів для детекції присутності цього об'єкта в зразку пшениці. Тести можуть бути основані на послідовності ДНК рекомбінантних конструкцій, вставлених у геном пшениці, і на геномних послідовностях, які фланкують ділянку вставки. Цей винахід стосується наборів і умов, які можна використовувати для проведення тестів. Таким чином, цей винахід частково стосується клонування і аналізу послідовностей ДНК, що належать до всіх вставок або до їх частини, і фланкувальних ділянок (в трансгенних лініях пшениці). Ці послідовності є унікальними. Можна отримувати специфічні для об'єкта праймери на основі цих вставок і на основі фланкувальних (і об'єднаних) послідовностей. Способом ПЛР доведено, що ці об'єкти можна ідентифікувати за допомогою аналізу ампліконів, отриманих за допомогою цих груп специфічних для об'єкта праймерів. Таким чином, ці й інші споріднені способи можна використовувати для ідентифікації ліній пшениці, що містять об'єкт за цим винаходом, однозначним чином. Цей винахід також стосується тестів аналізу ПЛР. Ці тести включають, серед іншого, кількісну ПЛР з детекцією в реальному часі (qПЦР) або ПЛР з детекцією в кінцевій точці, для детекції об'єкта IND-,,412-7, ампліконів і їхніх фрагментів. Винахід також стосується молекул ДНК, що містять достатню частину безперервної нуклеотидної послідовності з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, щоб вона діяла як ДНК-зонд, що гібридизується в суворих умовах з молекулами ДНК, що містять нуклеотидну послідовність, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, і що не гібридизується в суворих умовах з молекулою ДНК, що не містить нуклеотидну послідовність, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6. У деяких випадках, використовувані зонди можна мітити з використанням молекул, які подають сигнал, що піддається детекції. Прикладом таких молекул є флуорохроми. Тобто, олігонуклеотиди, які представляють флуорохроми на обох кінцях і мають послідовність, комплементарну частині фрагмента ДНК, що підлягає ампліфікації. Серед інших, барвники FAM, TET, HEX, JOE, CAL Fluor®, Quasar® і Pulsar®. Цей винахід також стосується пари молекул ДНК, яка складається з першої молекули ДНК і другої молекули ДНК, відмінної від першої, в якій кожна з першої і другої молекул ДНК містять достатню частину безперервних нуклеотидів з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, щоб вона діяла як ДНК-зонди при використанні в реакції ампліфікації з ДНК, що походить із об'єкта IND-хх412-7, для отримання діагностичного амплікону ДНК для трансгенного об'єкта пшениці IND-44412-7 в зразку. Винахід також стосується способу детекції присутності ДНК, отриманої з об'єкта IND-ВВ412-7, в зразку. Спосіб включає порівняння зразка з молекулами ДНК, що використовуються як зонди і праймери, піддавання їх впливу однакових суворих умов гібридизації, і потім детекцію гібридизації ДНК-зонда з ДНК в ампліфікованому зразку з використанням специфічних праймерів. Ця гібридизація вказує на присутність ДНК, що походить із трансгенного об'єкта пшениці IND-єє412-7, в цьому зразку. Винахід, крім того, стосується способу детекції присутності молекули ДНК, отриманої з трансгенного об'єкта пшениці IND-ВВ412-7, в зразку, що включає отримання ДНК, яка походить із цього зразка, за допомогою пари олігонуклеотидів, що використовуються як праймери, для отримання реакції ампліфікації, достатньої для отримання амплікону ДНК, що містить послідовність, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, для детекції присутності амплікону ДНК в реакції, де присутність амплікону ДНК вказує на присутність молекули ДНК, що походить із IND-QQ412-7, в зразку. Крім того, винахід стосується набору для детекції ДНК, який містить щонайменше одну молекулу ДНК з достатньою кількістю безперервних нуклеотидів з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, щоб вона діяла як праймер або специфічний ДНК-зонд для детекції присутності ДНК, що походить із трансгенного об'єкта пшениці IND-лл412-7, де детекція ДНК доводить присутність цього об'єкта в зразку. Винахід також стосується рослини пшениці, насіння, клітини або частини цієї рослини, що містять молекулу нуклеїнової кислоти, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6. Винахід, крім того, стосується рослини пшениці, насіння, клітини або частини рослини, толерантних до абіотичних стресів. Крім того, винахід стосується рослини пшениці, насіння, клітини або частини рослини, геном яких утворює амплікон, що містить молекулу ДНК, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, при тестуванні з використанням способу ампліфікації ДНК. Винахід, крім того, стосується рослини або насіння пшениці, де рослина або насіння пшениці отримана з трансгенного об'єкта пшениці IND-ВВ412-7, або є гібридною або гетерозиготною, що має щонайменше одного батька, що походить із трансгенного об'єкта пшениці IND-гг412-7. Винахід, крім того, стосується неживого рослинного матеріалу, що містить рекомбінантну молекулу ДНК, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6. Крім того, винахід стосується товарного продукту, отриманого з трансгенного об'єкта пшениці IND-КК412-7, що містить молекулу нуклеїнової кислоти, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, де детекція нуклеотидної послідовності в зразку, що походить із товарного продукту, визначає, що товарний продукт походить із трансгенного об'єкта пшениці IND-іі412.7. Винахід, крім того, стосується товарного продукту, вибраного з групи, що складається з цільного або переробленого насіння, борошна великого помелу, борошна, пластівців, біоетанолу, біогазу або інших біологічних матеріалів, серед інших. Винахід також стосується способу отримання товарного продукту за допомогою отримання рослини пшениці або її частини, які містять трансгенний об'єкт пшениці IND-нн412-7, і отримання товарного продукту пшениці з рослини пшениці або її частини. Винахід стосується способу отримання рослини пшениці, толерантної до абіотичних стресів, за допомогою схрещування рослини з трансгенним об'єктом пшениці IND-іі412-7, що містить молекулу нуклеїнової кислоти, вибрану з групи, що складається з SEQ ID No.: 5 і SEQ ID No.: 6, з другою рослиною пшениці, для отримання насіння, збирання насіння, яке утворюється внаслідок схрещування, вирощування насіння для отримання множини рослин-нащадків, і відбору рослини-нащадка, толерантної до абіотичних стресів. Короткий опис креслень Фіг. 1: Схеми плазмід pIND4-HB4 і pIND-Bar, що використовуються при отриманні IND-ФФ412-7. На схемах показані CDS HaHB4 (зліва) і bar (справа) з їхніми регуляторними елементами і плазмідними кістяками. prUbi-1: промоторна ділянка гена Ubi-1 маїсу. Екзон prUbi-1: перший екзон гена Ubi-1 маїсу. Інтрон prUbi-1: перший інтрон гена Ubi-1 маїсу. HaHB4: CDS HaHB4. Bar: CDS bar. Tnos: послідовність термінатора гена nos. Точка початку реплікації pBR322: точка початку реплікації ColE1. bla: ген bla. Фіг. 2: Плазмідні послідовності і послідовності, які становлять інтерес. Фіг. 3: Отримані послідовності точок стику (JP), що підтримуються зчитуваннями за допомогою illumina і PacBio, і за допомогою продуктів ампліфікації ПЛР, секвенованих за Сенгером. З JP, показані повні отримані послідовності для пшениці, в той час як тільки перші 100 п. о. для плазміди. Числа представляють абсолютне положення послідовностей вставки. Фіг. 4: Урожайність трансгенних ліній (об'єктів) і батьківського контролю (дикого типу) в шести польових дослідженнях, проведених з 2009 до 2011 рр. Тонкі планки являють собою стандартну помилку середнього (SEM). Фіг. 5: Саузерн-блоти ДНК рослини IND-ии412-7, розщепленої з використанням HindIII, BamHI і AseI. Блоти гібридизували з міченими DIG зондами для детекції HaHB4. Смуги ДНК в продуктах розщеплення IND-..412-7, які гібридизуються із зондами, відмічені білими стрілками. HB4 трансгенної рослини сої (IND-II414-5), що використовується як позитивна і така, що гібридизується, смуга, відмічений червоною стрілкою. Розміри сходів смуг мічених DIG маркерів VII і III вказані зліва і справа, відповідно, блотів у т. п. о. Фіг. 6: Саузерн-блоти ДНК рослини IND-ии412-7, розщепленої з використанням HindIII, BamHI і AseI. Блоти гібридизували з міченими DIG зондами для детекції bar. Смуги ДНК в продуктах розщеплення IND-..412-7, які гібридизуються із зондами, відмічені білими стрілками. HB4 трансгенної рослини сої (IND-II414-5), що використовується як позитивна і така, що гібридизується, смуга, відмічений червоною стрілкою. Розміри сходів смуг мічених DIG маркерів VII і III вказані зліва і справа, відповідно, блотів у т. п. о. Фіг. 7: Оцінка цілісності і розподілу за розміром зразка ДНК, отриманого за допомогою сортування хромосоми 2D. Середній розмір фрагментів 5951 п. о. Фіг. 8: Розподіл за довжиною зчитувань PacBio. Гістограма, яка представляє абсолютну частоту (кількість зчитувань) в інтервалах довжини зчитування 1000 п. о. Фіг. 9: Оцінки в балах якості зчитувань PacBio. Верхній графік являє собою оцінки в балах якості розпізнавань основи як функцію від положення зчитування у відсотках, і нижній графік - як функцію від положення зчитування в п. о. Фіг. 10: Схеми послідовності ДНК довгої вставки IND-ее412-7, що містить повні (с) і неповні (i) кодуючі ділянки HaHB4 (червоний) і bar (світло-синій). Ця вставка поділена на чотири фрагменти для їх кращого розуміння. a) Неповна (i) кодуюча ділянка HaHB4 локалізована між двома неповними фрагментами інтрона Ubi-1. Крім цього, присутні дві кодуючі ділянки bar, повна (с) і неповна (i). Bar (i) знаходиться між двома ділянками Tnos. Bar (с) локалізований між своїми регуляторними елементами в правильних положеннях. b) Кодуюча ділянка HaHB4 (с) локалізована нижче проксимальної ділянки інтрона і 5'-промоторної ділянки ubi-1 і вище його Tnos. Bar (i) локалізований між двома ділянками інтрона ubi-1. c) Bar (с) локалізований між інвертованою промоторною ділянкою Ubi-1 і ділянкою Tnos. Bar (i) локалізований між частковою промоторною ділянкою ubi-1 і геном bla. d) Дві кодуючі ділянки bar (с) локалізовані між своїми повними регуляторними елементами. Фіг. 11: Схеми послідовностей ДНК короткої вставки IND-ФФ412-7, що містить повну (с) кодуючу ділянка HaHB4 і bar. Ця вставка поділена на три фрагменти для їх кращого розуміння. b) Bar (с) локалізований між ділянкою інвертованої і короткої послідовності prGBL-1 і ділянкою Tnos. c) Повна (с) кодуюча ділянка HaHB4 локалізована між неповним фрагментом інтрона Ubi-1 і Tnos. Фіг. 12: Перекривання між JP, аналізоване за допомогою blast проти Т. aestivum (на http://plants.ensembl.org/). Короткий опис послідовностей SEQ ID No. 1: Довга вставка без фланкувальних ділянок SEQ ID No. 2: Коротка вставка без фланкувальних ділянок SEQ ID No. 3: pIND4+HB4 SEQ ID No. 4: pIND4+BAR SEQ ID No. 5: Довга вставка з фланкувальними ділянками SEQ ID No. 6: Коротка вставка з фланкувальними ділянками SEQ ID No. 7: 5´-фланкувальна ділянка (довга вставка) SEQ ID No. 8: 3´-фланкувальна ділянка (довга вставка) SEQ ID No. 9: 5´-фланкувальна ділянка (коротка вставка) SEQ ID No. 10: 3´-фланкувальна ділянка (коротка вставка) SEQ ID No. 11: HB4, прямий праймер SEQ ID No. 12: HB4, зворотний праймер SEQ ID No. 13: Bar, прямий праймер SEQ ID No. 14: Bar, зворотний праймер Детальний опис Наступні визначення і способи представлені для кращого визначення винаходу і для надання фахівцеві в цій галузі, навченому цим способам, керівництва для його практичного здійснення. Якщо не вказано інше, терміни, що використовуються в цьому описі, потрібно розуміти з таким же значенням, яке надає їм загальноприйнятим чином фахівець у цій галузі, навчений відповідному способу. Приклади Приклад 1: Конструювання плазмід pIND4-HB4 і pIND4-Bar Вектори, які використовуються для отримання пшениці IND-ии412-7, основані на серіях плазмід, в яких використовують промотор убіквітину кукурудзи для керування експресією генів в рослинах (Christensen and Quail, 1996). Доведено, що цей промотор є дуже ефективним у однодольних (Christensen et al., 1992). В цих плазмідах використовують основу вектора pUC8 для проведення клонування, і вони отримані внаслідок клонування фрагмента Pst1 гена убіквітину кукурудзи Ubi-1 з 1992 п.о. Цей фрагмент являє собою функціональний промотор і складається з: 899 п. о. послідовності гена Ubi-1, послідовності 83 п. о. 5'-нетрансльованої ділянки з першого екзона і послідовності 1010 п. о. з першого інтрона, закінчуючись реконструкцією ділянки Pst1. Вихідний інтрон, присутній в 5'-нетрансльованій ділянці гена Ubi-1, збережений у всіх цих векторах, оскільки попередні дослідження виявили, що інтрони стимулюють експресію трансгенів у злакових рослинах (Vasil et al., 1993). Дві плазміди, основані на цих серіях, pIND4-HB4 і pIND4-Bar, використані в генетичній модифікації, присутній в IND-ее412-7. pIND4-HB4 (SEQ ID NO:3) Ця плазміда має ділянку поліклонування, з якої ділянка BamHI використана для клонування кодуючої ділянки гена HaHB4. Ця ділянка рестрикції локалізована після послідовностей промотору гена Ubi-1 кукурудзи, першого екзона і першого інтрона гена. Ця конструкція prUbi-1/Ubi1-Екзон/Ubi-1Інтрон/HaHB4 розроблена для отримання конститутивної експресії HAHB4. Після ділянки поліклонування і після CDS HaHB4, цей вектор має послідовність термінатора гена нопалінсинтази А. tumefaciens, яка включає сигнал поліаденілування. pIND4-Bar (SEQ ID NO: 4) Ця плазміда також сконструйована за допомогою зв'язування регуляторних ділянок Ubi-1 з кодуючою ділянкою гена bar S. hygroscopicus в ділянці BamHI. Ця конструкція, prUbi-1/Ubi1-Екзон/Ubi-1Інтрон/bar, дозволяє відбір трансгенних рослин, які експресують PAT і толерантні до гербіцидів на основі глюфосинату амонію, який стає неактивним, завдяки цьому ферменту (Thompson et al., 1987). Після кодуючої ділянки bar, цей вектор також містить термінатор гена нопалінсинтази А. tumefaciens, який включає сигнал поліаденілування. Приклад 2: Трансформація рослин пшениці і відбір об'єкта IND-ПП412-7 Спосіб спільної трансформації, який використовується для отримання об'єкта IND-СС412-7, був оснований на способах, розроблених Barcelo and Lazzeri (1995), Pastori et al. (2001) і Rasco-Gaunt et al. (2001). Ці способи також використовують в декількох дослідницьких центрах. По-перше, зерна пшениці збирали і стерилізували. Зерна збирали з колосся і стерилізували. Потім, зародки виділяли, і їхні рубчики видаляли для уникнення передчасного проростання. Щитки вміщували у придатне середовище, в середині чашки Петрі, з непошкодженою ділянкою експлантата, спрямованою вгору, для підпадання під вплив мікрочастинок. Для бомбардування частинки золота, покриті ДНК обох плазмід, які становлять інтерес, pIND4-HB4 і pIND4-Bar, проштовхували всередину клітин експлантатів з використанням генної гармати PDS-1000/He (система для доставки частинок Biolistic® PDS-1000/He, BIO-RAD). Після бомбардування оброблені експлантати вміщували в свіже культуральне середовище в гормональних умовах, необхідних для отримання ембріогенних калюсів. Процес відбору починали через три тижні, після того, як зародки вже розвинулися. Селективним засобом, що використовується в цьому випадку, був глюфосинат амонію. Сіянці, що пережили цикли відбору завдяки експресії PAT і розвинули добру кореневу систему, переносили і вміщували в камеру для вирощування. У цій точці відбирали зразки для доказу присутності bar і HaHb4 з використанням ПЛР. Після розвитку рослин їх переносили в більш великі горщики, де їх вирощували до збирання. Відбір об'єкта Трансгенні рослини отримували, слідуючи біолістичному способу з використанням британського сорту Cadenza. Перше розмноження (насіння T1) проводили в камері для вирощування між серпнем і груднем 2007 р. Приблизно з 20 індивідуальних рослин, що походять з кожного трансгенного об'єкта, відбирали зразки для тесту сегрегації шляхом визначення за допомогою ПЛР (таблиця 1). Таблиця 1Тест сегрегації. Лінії зі значеннями р > 0,15 переводили до наступного поколінняЛініяPCRn2 (3:1)Значення pПозитивнихНегативнихTa.IV.ii.a.12141633,330,00Ta.IV.ii.a.298174,410,04Ta.IV.ii.a.3146200,270,61Ta.IV.ii.a.4127191,420,23Ta.IV.ii.a.5810188,960,00Ta.IV.ii.a.6172192,120,15Ta.IV.ii.a.73151832,670,00Ta.IV.ii.a.87111812,520,00Ta.IV.ii.a.95152026,670,00Ta.IV.ii.a.105152028,120,00Ta.IV.ii.a.11155200,001,00Ta.IV.ii.a.12144180,070,79 Лінії, які походять із самоопилень відібраних об'єктів (сегрегація 3:1 в T1), висівали в серпні 2008 р. під захисною сіткою від граду. Ріст і розвиток цих ліній характеризували протягом сезону вегетації (таблиця 2). Таблиця 2ФенологіяЛініяДоба після висівання12202734424957637077849198105111119126131Значення за шкалою ЗадоксаДикий тип1,1 1,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Дикий тип1,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.1.21,1 1,31,42,12,22,32,52,62,63,13,74,75,97,38,38,78,99,2Ta.IV.ii.a.1.51,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.1.121,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.11,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,74,55,97,38,38,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.21,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.61,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.71,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.101,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.111,11,31,42,22,32,42,52,62,63,23,74,55,55,97,37,78,58,9Ta.IV.ii.a.3.131,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.141,11,31,42,22,32,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.171,11,31,42,22,32,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.3.181,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.11,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.21,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.31,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.51,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.71,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.141,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.151,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.161,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.171,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.4.181,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.11,11,31,42,12,32,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.21,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.31,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.41,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.51,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.61,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.71,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.81,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.91,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.111,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.121,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.131,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.141,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.151,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.6.171,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.21,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.31,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.51,11,31,42,22,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.61,11,31,42,22,22,42,52,62,63,13,74,35,97,38,38,58,78,9Ta.IV.ii.a.11.71,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2 Таблиця 2Фенологія (продовження)ЛініяДоба після висівання12202734424957637077849198105111119126131Значення за шкалою ЗадоксаTa.IV.ii.a.11.81,1 1,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.91,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.101,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.131,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.151,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.11.171,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.11,11,31,42,12,22,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.31,11,31,42,12,22,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.41,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.51,11,31,42,12,22,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.61,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.71,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.81,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.91,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.111,11,31,42,12,22,42,52,62,63,23,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.131,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2Ta.IV.ii.a.12.141,11,31,42,12,22,42,52,62,63,13,75,55,97,38,58,78,99,2 Протягом стадії вегетації відбирали зразки рослин для аналізу ПЛР для ідентифікації гомозиготних ліній. З використанням трьох відібраних гомозиготних ліній 6 польових досліджень проводили протягом 2009 і 2011 рр. в Монте-Буей (Кордова, 2009), Гутенберг (Кордова, 2010), Камет (Буенос-Айрес, 2011), Кораль-де-Бустос (Кордова, 2011), Деро (Буенос-Айрес, 2011) і Вілья Сабойя (Буенос-Айрес, 2011). Дослідження включали три гомозиготні лінії (об'єкти) і дикий тип (батьківський контроль). Дані урожайності аналізували з використанням ANOVA з повністю рандомізованою блоковою схемою при довірчому рівні 95 % з використанням Infostat (Di Rienzo et al., 2010). У цьому аналізі дані збирали в пул серед ділянок, і джерела мінливості включали генотипи, умови навколишнього середовища і взаємодію генотипу й умов навколишнього середовища. Середні порівнювали апостеріорно з використанням критерію найменшої значущості Фішера (α=0,05). Дисперсійний аналіз показав статистично значущі відмінності для ефекту генотипу (р=0,0003, фігура 4). Крім того, детектовано статистично значуща взаємодія генотипу і умов навколишнього середовища (р <0,0001). Цю взаємодію пояснюють перехрещенням урожайності ліній Ta.IV.ii.a.4 і контролю в одній ділянці (фігура 4). У комбінованому аналізі всі трансгенні лінії представляли більш високу урожайність, ніж батьківський контроль. Серед ліній, Ta.IV.ii.a.12 представляла найвищу середню урожайність у всіх ділянках. Ця трансгенна лінія вибрана для подальшої характеризації і перейменована кодом: IND-лл412-7. Приклад 3: Характеризація послідовностей ДНК в об'єкті пшениці IND- дд 412-7 Через комплексний характер геному пшениці розроблена стратегія для зменшення фонової геномної інформації, для з'ясування структури, послідовності вставки і її фланкувальних послідовностей в геномі пшениці. Хромосому-носій ідентифікували з використанням платформи технології DArT (Diversity Arrays Technology, Jaccoudy et al., 2001). Після ідентифікації хромосоми-носія HaHB4 її виділяли з використанням способу сортування хромосом (Doležel et al., 1989; JanVra'na et al., 2000; Suchánková et al., 2006; Šimková et al., 2008). Спосіб секвенування для ідентифікації ділянки вставки IND-tt412-7 у виділеній хромосомі складався з комбінованого способу NGS з використанням двох доповнюючих технологій секвенування: Illumina і Pacific Biosciencies. За допомогою Illumina отримували високопродуктивні короткі зчитування 100 п. о. з обох сторін бібліотеки фрагментів 500 п. о. для секвенування. З іншого боку, за допомогою PacBio отримували низькопродуктивні зчитування окремих молекул з бібліотеки фрагментів 15-20 т. п. о. В міру збільшення розміру вставки імовірність проходження полімерази протягом послідовності більше одного разу зменшується. З цієї причини більш великі послідовності мають більш високу частоту помилок, ніж менші. Для подолання цієї проблеми були розроблені спеціальні алгоритми, що коригують ці послідовності з використанням менших послідовностей, отриманих за допомогою Illumina. З використанням цього алгоритму послідовності PacBio RSII коригують і отримують точну і надійну зборку зразка (Koren et al., 2012). a) Аналіз Саузерн-блотингу. Кількість копій генів, які становлять інтерес, визначали в гомозиготних рослинах IND-КК412-7 за допомогою аналізу Саузерн-блотингу. Тканина листка з вирощених в теплиці або в полі гомозиготних рослин IND-пп412-7 або рослин Cadenza, використовували для виділення ДНК. Один грам тканини листка або з IND-44412-7, або з Cadenza, миттєво заморожували з використанням рідкого азоту і розмелювали в тонкий порошок з використанням попередньо охолоджених товкача і ступки. ДНК виділяли з використанням набору Qiagen DNeasy Maxi Prep, слідуючи протоколу виробника. Після елюції ДНК преципітували за допомогою додавання 1/10 об'єму 3M ацетату натрію і 2-3 об'ємів 100 % етанолу. Осад промивали 70 % етанолом і суспендували в 80 мкл 1x буферу TE. ДНК кількісно оцінювали з використанням флуориметра QuBit. Концентрація ДНК для IND-рр412-7 становила 1100 нг/мкл, і для Cadenza становила 900 нг/мкл. Геномну ДНК з об'єкта IND-ГГ412-7 розщеплювали з використанням трьох ферментів: HindIII, BamH1 і AseI. Для кожної 50 мкл реакційної суміші для розщеплення 5 мкг геномної ДНК змішували з будь-яким із ферментів HindIII, BamHI або AseI в концентраціях 10 од./мкг ДНК. Зразки розщеплювали протягом ночі (16 годин) при 37 °C. Для розщеплень контрольної плазміди використовували 100-200 пікограм плазмідної ДНК. Продукти рестрикційного розщеплення геномної ДНК IND-ПП412-7 і Cadenza наносили в 0,7 % агарозний гель разом з міченим DIG маркером молекулярної маси VII (Roche, кат. No. 1669940910). Зразки аналізували при 50 В протягом ночі. Гель інкубували в денатурувальному буфері двічі по 30 хвилин кожного разу. Денатурований гель промивали в буфері для перенесення протягом 15 хвилин до лужного перенесення (описаного нижче). Присутня одна ділянка HindIII в плазміді pIND-4, локалізована дуже близько до 5´-кінця prUBI-1. Інші ділянки HindIII не були присутні в плазмідах (фігура 1). Передбачаючи наявність одиничних, інтактних вставок, які містять послідовність, яка становить інтерес, в геномі IND-нн412-7, мінімальний розмір фрагмента при гібридизації із зондом HaHB4 може становити 2842 т. п. о., і розмір фрагмента для зонда bar може становити 2860 т. п. о. Крім того, присутня одна ділянка BamHI в плазміді pIND-4, локалізована дуже близько до ініціюючого кодону CDS HaHB4 і bar. Жодні інші ділянки BamHI не присутні в плазмідах (фігура 1). І знову, передбачаючи наявність одиничних, інтактних вставок, які містять послідовність, яка становить інтерес, в геномі IND-зз412-7, мінімальний розмір фрагмента при гібридизації із зондом HaHB4 може становити 825 п. о., і розмір фрагмента для зонда bar може становити 843 п. о. Нарешті, присутні п'ять ділянок рестрикції AseI в плазміді (фігура 1), дві всередині послідовності, яка становить інтерес, в інтроні UBI-1, і три у векторі, дві близько до кінця Tnos, і інша всередині гена bla. Повне розщеплення AseI у вставці повинно вивільняти фрагмент ДНК завдовжки 1313 т. п. о., що містить мішень зв'язування для зонда HaHB4. Зонд bar детектує фрагмент ДНК 1331 т. п. о. Це міркування передбачає одиничну інтактну вставку. Молекулярні зонди для CDS HaHB4 і bar синтезували, слідуючи способу, описаному в наборі для синтезу за допомогою ПЛР DIG-зондів від Roche (кат. No.11636090910) і з використанням олігонуклеотидів, згаданих у таблиці 3. Таблиця 3Список праймерів, які використовуються для отримання зондів, що використовуються в аналізах Саузерн-блотингуЗондРозмір (п. о.)Гібридизація (°C)Тип праймеруПослідовністьHB420045ПрямийGGGCTTCATCCTGGTCAAGTGGCЗворотнийTCTTGATGCTTTTCTGCTACATTTCTCAGCBar28255ПрямийCACGCAACGCCTACGACTGGACGGCCЗворотнийGTACCGGCAGGCTGAAGTCCAGCT Лужне перенесення ДНК з агарозного гелю проводили з використанням системи для низхідного перенесення Turboblotter-Rapid (Whatman). ДНК переносили на нейлонову мембрану 12×21 см (Nytran™ Super Charge, Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO) протягом 4 годин. Мембрану промивали в нейтралізуючому буфері (0,2 М фосфат натрію, pH 6,8). ДНК безповоротно перехресно зшивали з мембраною за допомогою ультрафіолетового пристрою Ultraviolet Cross linker (CL-1000) з використанням 2 експозицій по 1500 мДж. Мембрану інкубували в 50 мл буферу для гібридизації Roche DIG EasyHyb (кат. no. 11 603 558 001) при попередньо розрахованих температурах гібридизації (45 °C, 55 °C для зондів для гена bar і гена HaHB4, відповідно) в орбітальному струшувачі. Аліквоти по 35 мкл і 45 мкл зондів bar і HaHB4 розбавляли за допомогою додавання 65 і 55 мкл, відповідно, 1x буферу TE. Розчини зондів інкубували при 95 °C протягом 10 хв. і охолоджували до 4 °C протягом 2 хв. Їх додавали до 8,75 мл буферу для гібридизації DIG і виливали на дно бутля для гібридизації. Мембрани інкубували при описаних температурах гібридизації протягом 16 годин у печі для гібридизації (VWR scientific products) з використанням орбітального струшувача. Після гібридизації, мембрани промивали з використанням буфера для промивання, відповідно до інструкцій, представлених з набором для люмінесцентної детекції DIG від Roche. Після 1 години блокування з використанням 1x блокуючого реагенту мембрани інкубували протягом 30 хв. у розчині, що містить 50 мл 1x блокуючий реагент і 5 мкл антитіла-АР проти дигоксигеніну. Мембрану промивали двічі з використанням буферу для промивання протягом 30 хвилин кожного разу і нарешті обробляли з використанням буфера для детекції протягом 5 хвилин. У цій точці мембрану вміщували в пакет для гібридизації KPL (KPL, кат. No. 60-00-51). 5 мл розчину CSPD з набору для люмінесцентної детекції DIG наносили рівномірно на мембрану. Мембрану інкубували з розчином CSPD протягом 5 хвилин при кімнатній температурі. Пакет для гібридизації з мембраною запаювали і інкубували при 37 °C протягом 15 хвилин. Пакет для гібридизації вміщували в касету з плівкою Kodak Biomax Light (кат. No. 178 8207) в темній кімнаті і експонували протягом 20 хвилин. Плівки проявляли в темряві з використанням пристрою для виявлення рентгенівської плівки Konika QX-60A. Подальші експозиції проводили через 1 годину або 2 години, за потреби. Аналіз смуг гібридизації, отриманих із використанням зонда HaHB4, дозволяв передбачати присутність трьох копій цієї CDS (фігура 5). З іншого боку, аналіз смуг гібридизації, отриманих із використанням зонда bar, дозволяв авторам цього винаходу передбачати присутність семи копій цієї CDS з використанням BamHI (фігура 6). Однак, з урахуванням HindIII і AseI, кількість є більш низькою, що вказує на можливі внутрішні реаранжирування ДНК (фігура 6). Коротко, результати Саузерн-блотингу показали комплексний патерн вставки з можливими внутрішніми реаранжируваннями ДНК, що дозволяє передбачати, що спосіб геномного секвенування є необхідним для дозволу структури вставки в об'єкті IND-лл412-7. b) Ідентифікація і виділення хромосоми, яка містить послідовності вставки в IND-bb412-7 DArT використовували для ідентифікації того, що ген HaHB4 локалізований на хромосомі 2D геному пшениці. Кожний поліморфний фрагмент ДНК (який відповідає точці на планшеті) фактично являє собою молекулярний маркер, який може служити для генотипування сегрегуючої популяції продуктів схрещування двох батьків (присутність або відсутність маркера в сегрегуючому матеріалі) і детекції асоціацій цих маркерів з характеристиками (ділянка поліморфізму), які становлять агрономічний інтерес. У разі об'єкта IND-чч412-7 цю технологію використовували для генотипування покоління F2 продукту схрещування IND-тт412-7 х Bag17, і для пошуку можливого зв'язку цих маркерів з трансгеном HaHB4. Присутність або відсутність HaHB4 визначали в кожному F2 індивідуально і, після генотипування, визначали асоціації між маркерами DArT і HaHB4. Цей трансген представляв асоціацію з одним маркером, локалізованим на хромосомі 2D (http://www.cerealab.unimore.it/). Той факт, що тільки один маркер представляв асоціацію з HaHB4, може бути присутнім, оскільки не існує доступної насиченої карти маркерів для цієї конкретної хромосоми (Jia et al., 2013; http://ccg.murdoch.edu.au/cmap/ccg-live/cgi-bin/cmap/viewer). CDS HaHB4 була, найбільш ймовірно, локалізована в довгому плечі біля центромери, асоційованому з маркером Gpw3105. З використанням цієї інформації отримали 5 мкг ДНК хромосоми 2D, яка була придатна для отримання бібліотеки Illumina. Однак, через характер процесу ампліфікації ДНК після сортування, ДНК була частково придатною для бібліотек PacBio (фігура 7). Панелі різноманітності отримували з використанням ДНК з IND-ПП412-7 і дикого генотипу Cadenza. Геномну ДНК виділяли з сіянців. Приблизно 5 нг ДНК для кожного генотипу оцінювали за допомогою розщеплення протягом 1 години при 37 °C з використанням 2 од. ферментів рестрикції (EcoRI, PstI і MspI) в кінцевому об'ємі 8 мкл. Після розщеплення додавали 2 мкл суміші для лігування, і зразок інкубували протягом 3 годин при 37 °C. Суміш для лігування складається з 0,2 мкл T4 лігази (New England Biolabs), 0,2 мкл 50 мМ ATP, 1,2 мкл води MilliQ (MQ) і 0,1 мкл придатного специфічного ферменту в концентрації 50 пмоль/мкл (MspI) і 5 пмоль/мкл (EcoRI і PstI). Після лігування суміш розбавляли до кінцевого об'єму 500 мкл з використанням води MQ, і 2 мкл використовували як матриці в реакції ПЛР. Реакцію проводили в кінцевому об'ємі 50 мкл з 2 од. полімерази Red Taq (Sigma) і праймерами. Після початкової інкубації при 95 °C протягом 3 хвилин реакція слідувала наступному протоколу: 30 циклів по 94 °C протягом 30 секунд, 60 °C протягом 45 секунд і 72 °C протягом 1 хвилини. Кінцеве подовження проводили при 72 °C протягом 8 хвилин. Отримані таким чином амплікони лігували у вектор PCR2.1TOPO (Invitrogen) і потім трансформували за допомогою теплового шоку клітини Е. coli TOP10F' (Invitrogen), слідуючи інструкціям виробника. Трансформанти відбирали на середовищах, які містять ампіцилін і X-gal. Індивідуальні білі колонії (які містять рекомбінантну плазміду) переносили за допомогою петлі в пробірку, що містить 20 мкл 10 % гліцерину. З кожного зразка в гліцерині відбирали аліквоту 5 мкл і переносили в пробірку, що містить 45 мкл готової суміші для ПЛР з RedTaq (Sigma) і 15 пмоль кожного з праймерів M13, прямого, і M13, зворотного. Використовуваний профіль циклера являв собою 1 цикл при 95 °C протягом 5 хвилин; 35 циклів 94 °C протягом 30 секунд, 52 °C протягом 30 секунд і 72 °C протягом 1 хвилини. Після ампліфікації продукти ПЛР преципітували з використанням 1 об'єму ізопропанолу при кімнатній температурі і промивали з використанням 100 мкл 70 % етанолу. Етанол видаляли, і продукти сушили при кімнатній температурі. Продукти ресуспендували у воді MQ, 3x SSC або 1x SSC+0,01 % саркозил (Sigma) при кінцевій концентрації П 20 нг/мкл. Очищені фрагменти переносили в 384-ямковий планшет (Genetix), і 6 повторів організовували для перенесення на чіпи Polysine™ (Menzel Glazer) з використанням системи Affymetrix™ 417. Після 1 доби фіксації чіпи обробляли, згідно зі способом, опублікованим на http://microarrays.org/protocols.html (2001) з тією невеликою модифікацією, що використовували борогідрид натрію (Sigma) замість використання бурштинового ангідриду, і 1-метил-2-піролідон як блокуючого розчину, отриманого в буфері PBS pH 7,4 (137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 10 мМ NaHPO, KHHPO 2 мМ). Чіпи занурювали в киплячу воду на 30 секунд для денатурації ДНК і потім негайно занурювали в крижаний 100 % етанол на 10 секунд. Чіпи сушили при кімнатній температурі. Після ампліфікації ПЛР продукти очищували з використанням колонок (Qiagen) або преципітували за допомогою додавання ізопропанолу для видалення надлишку dNTP. Флуоресцентні барвники Cy3 і Cy5 (Pharmacia) включали з використанням набору для мічення ДНК Deca-random-prime DNA (Fermentas), відповідно до інструкцій виробника. Зразки, мічені з використанням барвників Cy3 і Cy5 (5 мкл), змішували з 2 мкл розчину 20 мкг/мкл ДНК зі сперми оселедця (Sigma), розчиненої в розчині для гібридизації Express (Clontech) і денатурували при 96 °C. протягом 3 хвилин. Денатуровані зонди змішували з 10-15 мкл розчину для гібридизації, переносили безпосередньо на поверхню мікромасиву, і покривали склом (24×24 мм, Mediglass). Чіпи негайно вміщували в камеру для зволоження при 65 °C на ніч для гібридизації. Після гібридизації чіпи промивали з використанням 1x SSC з 0,1 % SDS протягом 5 хв., 1x SSC протягом 2 хвилин, 0,2 х SSC протягом 2 хвилин і 0,02 х SSC протягом 20 секунд. Чіпи сканували з використанням сканера Affymetrix 418™. Інтенсивність кожного сигналу аналізували з використанням програми Scanalyse v.2.44 (Standford University) і GenePix Pro v.3 (Axon instruments). c) Аналіз послідовності стику і структури вставки в IND-cc412-7 з використанням секвенування Illumina і PacBio. Результати аналізу Саузерн-блотингу дозволяли передбачати комплексний патерн трансгенної вставки. Таким чином, бібліотеку виділеної ДНК хромосоми 2D секвенували з використанням платформи Illumina Hiseq. Автори цього винаходу отримали більш ніж 1,2 мільярдів зчитувань у конфігурації спарених кінців 2×100 п. о., що представляють більш ніж 124 ГБ даних секвенування. Перекривання секвенування повної хромосоми оцінювали між 40 і 50X, на основі ненадлишкових зчитувань, що піддаються картуванню, в однокопійних генах, локалізованих на хромосомі 2D, таких як PpoD1b (He et al, 2009). Збагачення зразка для хромосоми 2D підтверджували за допомогою картування зчитувань для відомих однокопійних генів, локалізованих поза хромосомою, таких як LOX (Feng et al., 2012). У цих випадках, перекривання оцінювали між 1 і 5X, таким чином, підтверджуючи високо збагачену ДНК для послідовностей хромосоми 2D. Картування зчитувань для плазмід, що використовуються для трансформації, дозволило авторам цього винаходу підтвердити результати Саузерн-блотингу. Дійшли висновку, що автори цього винаходу отримали 3 повні або майже повні копії CDS HaHB4, на основі 100X перекривання і 8 повних або майже повних копії CDS bar, на основі 400X перекривання. Декілька інших елементів плазмід були ідентифіковані з перекриванням аж до 1200X. За допомогою способу аналізу послідовностей стиків (JSA) (Kovalic et al., 2012) з використанням зчитувань Illumina ідентифікували аж до 4 різних фланкувальних послідовностей з ДНК пшениці і декілька химерних послідовностей стиків, які включають елементи плазмід. Коротко, дані Illumina також показали комплексний патерн об'єкта вставки, який включає внутрішні реаранжирування плазмід в IND-аа412-7. Отже, були отримані довгі зчитування секвенування PacBio, щоб сприяти процесу побудови каркасу для зборки зчитувань Illumina. Довгі зчитування PacBio можуть дозволяти зчитування через комплексні внутрішні структури і реаранжирування. Через якість зразка ДНК, отриманого після сортування хромосом, що дозволяє авторам цього винаходу отримання бібліотеки зі середнім розміром близько 5 т. п. о., використовували хімічні реакції P4-C2 PacBio. З цими хімічними реакціями отримують середні довгі зчитування 5,5 т. п. о. Використовували 20 комірок SMART для отримання 1806197 зчитувань, що об'єднують всього 3,5 ГБ даних секвенування зі середньою довжиною зчитування приблизно 2 т. п. о. і максимумом 13 т. п. о. На основі розміру хромосоми 2D 800 млн. п. о. оцінили 4,7 X перекривання повної хромосоми. Статистика PacBio показана в таблиці 4, і розподіл довжини зчитувань і показники Q показані на фігурі 8 і фігурі 9. Таблиця 4Статистика PacBioСтатистика PacBioСередній розмір бібліотеки5500 п. о.# комірок smart:20# послідовностей1806197Усього основ3513329966 п. о. (3,5 ГБ.)Середня довжина послідовності194332±160546Мінімальна довжина50 п. о.Максимальна довжина32913 На основі комбінованого аналізу даних секвенування для Illumina і PacBio, спочатку визначали фланкувальні послідовності вставки. Встановлювали набір з чотирьох параметрів як поріг відсікання для визначення істинної ідентичності фланкувальної послідовності: 1. Підтверджена даними Illumina, 2. Підтверджена даними PacBio, 3. Підтверджена перекриванням за Illumina як одинична копія, і 4. Підтверджена за допомогою ампліфікації ПЛР з ДНК IND-44412-7. Чотири різні фланкувальні послідовності пройшли через всі фільтри для відповідності вибраним критеріям, названі JPLa, JPLb, JPSa і JPSb. Схожий спосіб використовували для визначення всіх внутрішніх химерних послідовностей стику плазміда-плазміда, але з урахуванням перекривання за допомогою Illumina залучених індивідуальних елементів плазміди. Внутрішні послідовності стику, які пройшли через всі фільтри, продовжували з використанням даних Illumina і картували на довгих зчитуваннях PacBio для отримання кінцевої зборки. Якість кінцевої зборки перевіряли, повертаючись до початкових даних Саузерн-блотингу, і результати підтверджували. Коротко, описані дві різні вставки плазмід у ділянках з високим вмістом повторюваних послідовностей хромосоми 2D в геномі пшениці. Одна зі вставок має довжину 47611 п. о., а інша має довжину 20418 п. о., що в сумі становить 68029 п. о. вставок в об'єкті IND-уу412-7 (фігури 10 і 11). Вставки нараховують три копії CDS HaHb4, сім копій CDS bar, 16 копій гена bla і чотири копії CDS gus. В більш довгій вставці, фігура 10, є можливим ідентифікувати повну кодуючу ділянку HaHB4 (червоний) нижче вірогідних функціональних регуляторних елементів (панель b). З іншого боку, повну кодуючу ділянку bar (світло-синій) спостерігають на панелях a, b, с і d. На панелях (a) і (d) є можливим ідентифікувати, що регуляторні елементи bar повні і в правильному положенні. Повні копії CDS Bar потенційно кодують функціональні білки. В результаті, ідентифіковані тільки одна копія HaHB4 і одна копія bar без повних регуляторних елементів. d) Детекція, структура і кількість копій послідовностей вектора, не споріднених з генами, які становлять інтерес. З аналізу об'єктів вставки була очевидна присутність послідовностей плазмідного вектора й інших кодуючих ділянок, не споріднених з генами, які становлять інтерес, і регуляторними ділянками, введених у ході процесу трансформації пшениці. Елементи плазмідного кістяка, детектованні у вставці IND-ЕЕ412-7, являють собою ген bla, що надає стійкість до ампіциліну бактеріям, і бактеріальну точку початку реплікації з плазміди pBR322 (фігури 10 і 11). Застосовно до bla, важливо згадати, що він не має регуляторних елементів для експресії в пшениці, так само як жодна з описаних копій bla не була розташована біля еукаріотичних регуляторних елементів. Всі з послідовностей плазмідного кістяка у вставці IND-ВВ412-7 мають підтверджену точку початку реплікації у векторах pIND4-HB4 і pIND4-Bar, що використовуються для трансформації, як показано за ідентичністю нуклеотидних послідовностей з використанням blast. Однак, були детектовані послідовності, що відповідають гену gus (Jefferson et al., 1987) і промотору гена gbl1 пшениці (Jones, 2005), що керує його експресією. Ці послідовності походили з третьої плазміди, що використовується для моніторування ефективності трансформації; проте, ці елементи були включені в ході процесу інтеграції. CDS gus була виявлена в чотирьох копіях, в той час як промотор gbl1 був виявлений в п'яти копіях (фігури 10 і 11). Ця третя плазміда також могла бути похідним серій, що використовуються для вставки HaHB4 і bar в пшеницю. e) Локалізація вставки IND-ии412-7 у геномі пшениці. Вставки були локалізовані на хромосомі 2D пшениці. Ці вставки були детектовані в не анотованих послідовностях і є дуже малоймовірним, що вони були такими, що переривають кодуючі послідовності, з причин, пояснених нижче. Всі з фланкувальних послідовностей пшениці відповідали фрагментам ДНК з високою схожістю з ретротранспозонами, вказуючи на об'єкти вставки в ділянках ДНК з високим вмістом повторюваних послідовностей (Mayer et al, 2014). Для підтвердження цього проводили аналіз blast JP (точок стику) для бази даних проекту IWGSC через веб-сайт EnsemblPlants (http://plants.ensembl.org/Triticum_aestivum/Info/Index). Множину найкращих збігів з ділянками хромосом Т. aestivum спостерігали в кожному випадку. Хоча і неоднорідно в деяких випадках, повне перекривання послідовності спостерігали для кожної JP (фігура 12). Оскільки цей проект IWGSC ще знаходиться в розробці, проводили інший аналіз blast для всіх інших секвенованих геномів злакових, присутніх в базі даних EnsemblPlants (Triticum urartu, Aegilops tauschii і Hordeum vulgare), що приводить до такого ж патерну множини найкращих збігів для множини ділянок хромосом. Послідовності, які присутні в множині ділянок хромосом і є консервативними в різних організмах, виявляють тенденцію бути повторюваними послідовностями. Проводили також аналіз blast послідовностей JP для ненадлишкової бази даних NCBI. Дві з цих послідовностей (JP Короткий, JPSa і JPSb) співпадали з відомими елементами ретротранспозонів (таблиця 5). У той час як дві інші послідовності JP (JP Довгий, JPLa і JPLb) не мали значних найкращих збігів в базі даних NCBI, вони є високо консервативними і повторюваними багато разів серед множини хромосом в базі даних пшениці, що дає вагому підставу передбачати невідомі повторювані елементи ДНК. Таблиця 5Приклад найкращих збігів аналізу blast послідовностей JP для ненадлишкової бази даних NCBIЗапитуванаРозгляданаСтатистикаНазваПочатокКінецьНазваПочатокКінецьПриміткаБалЗначення E%IDL.JPSa1266FN564434122244122509Ретротранспозон gypsy3861E-9289266JPSb1499AF326781144816145314Транспозон, подібний gypsy ретротранспозон Fatima5827E-14683499JPLa201300IWGSC_CSS_5AS scaff_1551050364463невідомий повторюваний елемент5004E-15100100JPLb1169IWGSC_CSS_5DS scaff_275570726302797невідомий повторюваний елемент5072E-1581174L.: Довжина Стабільність і цілісність вставок IND-СС412-7 Сегрегація вставок протягом статевого перенесення. Гомозиготні рослини за вставкою IND-ГГ412-7 схрещували з комерційним сортом, Baguette 17, для отримання покоління F1. Після самоопилення рослин F1 отримали 349 насінин F2. Рослини, вирощені з цього насіння, використовували для аналізу сегрегації. ДНК виділяли з молодого листя. До виділення ДНК тканину листка заморожували в рідкому азоті і переробляли в тонкий порошок в ступці з товкачем або в пробірках в гомогенізаторі "96 mill" для препаратів у міні-масштабі. Наступні способи використовували для виділення ДНК рослин, залежно від кількостей ДНК, необхідних для експериментальних цілей: Спосіб із використанням CTAB: Геномну ДНК виділяли, слідуючи способу на основі броміду гексадецилтриметиламонію (CTAB) (http://irc.igd.cornell.edu/Protocols/DoyleProtocol.pdf). Коротко, 600 мкл буферу CTAB (2 % мас./об. CTAB, 100 мМ ТрісHCl, 20 мМ ЕДТА, 1,4 M NaCl і β-меркаптоетанол) і 5 мкг РНКази А додавали до приблизно 100 мг розмеленої тканини листка й інкубували при 55-60 °C протягом 15-20 хвилин з періодичним перемішуванням. 600 мкл хлороформу додавали до зразків і перемішували вручну 2-3 хвилини, потім центрифугували при 10000 об./хв. протягом 8 хвилин. Верхню водну фазу вміщували в чисту мікропробірку, і ДНК преципітували з використанням 400 мкл ізопропанолу. Зразок центрифугували при 12500 об./хв. протягом 10 хвилин для осадження преципітованої ДНК. Осади ДНК промивали з використанням 300 мкл 70 % етанолу за допомогою центрифугування зразків при 12500 об./хв. протягом 5 хвилин. Осади ДНК сушили на повітрі, потім ресуспендували в 100 мкл буферу TE (10 мМ ТрісHCl, 1 мМ ЕДТА, pH 8,0). Всю виділену ДНК зберігали в холодильнику при 4 °C або в морозильнику при -20 °C. Щоби переконатися в цілісності зразків, ПЛР з детекцією в кінцевій точці ендогенного контролю пшениці проводили зі специфічним праймером. Потім, ПЛР з детекцією в кінцевій точці проводили з використанням різних комбінацій праймерів для визначення присутності CDS HaHB4 і bar. Аналіз хі-квадрат (в2) використовували для оцінювання очікуваної сегрегації 3:1 (присутність або відсутність CDS, що представляють інтерес). У таблиці 6 узагальнені результати, отримані за допомогою аналізу ПЛР. Таблиця 6Результати аналізу сегрегації за допомогою ПЛР.УсьогоHaHB4+bar+HaHB4+bar-HaHB4-bar+HaHB4-bar-3492590090 Усього: кількість тестованих індивідуальних рослин; HaHB4+bar+: кількість індивідуальних рослин, позитивних за CDS HaHB4 і bar; bar-HaHB4+: кількість індивідуальних рослин, позитивних за CDS HaHB4; HaHB4-bar+: кількість індивідуальних рослин, позитивних за CDS bar; HaHB4-bar-: кількість індивідуальних рослин, негативних за CDS HaHB4 і bar. У таблиці 7 показаний статистичний аналіз: Таблиця 7Статистичний аналіз результатів сегрегаціїОчікувані результати (No. рослин)Спостережувані результати (No. рослин)2значення p+-+-261,7587,25259900,110,74 Значення З2 (кількість ступенів свободи=1, α=0,05) не показало статистично значущої відмінності між очікуваними і спостережуваними результатами, що вказує на менделівську сегрегацію 3:1 для кожної з аналізованих CDS (HaHB4 і bar). Результати, отримані для покоління F2, показують, що обидва трансгени стабільно успадковуються в ході статевого перенесення. У сегрегуючій популяції обидва гени мали сегрегацію 3:1, відповідно до менделівських принципів. Нарешті, навіть незважаючи на те, що обидві CDS надійшли внаслідок процесу спільної трансформації за допомогою бомбардування, два гени є зчепленими, оскільки кожне аналізоване індивідуальне F2 представляє однакові результати для обох CDS, bar і HaHB4. Попередній аналіз був виконаний з використанням олігонуклеотидів, які детектують майже повні CDS. Після підтвердження стабільності повних CDS bar і HaHB4 було вирішено перейти до характеризації інших генетичних елементів або їхніх частини, і фланкувальних послідовностей. З метою детекції присутності/відсутності копій HaHB4, bar і bla в IND-йй412-7, сконструйовані олігонуклеотиди, які гібридизуються з усіма копіями (повними і неповними). Також детектували чотири стики вставка-рослина для визначення їх сегрегації в поколінні F2. Ці дослідження проводили для 92 індивідуальних рослин з популяції F2. Результати показані в таблиці 8. Таблиця 8Статистичний аналіз результатів сегрегаціїОчікувані результати (No. рослин)Спостережувані результати (No. рослин)2значення p+-+-692365270,92750,336 Значення З2 (d.f.=1, α=0,05) в поколінні F2 не показало статистично значущої відмінності між спостережуваним і очікуваним ступенем сегрегації 3:1 для аналізованих даних. Всі аналізовані трансгенні рослини представляли узгоджені результати для трьох детектованних елементів IND-ее412-7 (HaHB4, bar і bla) і для чотирьох стиків вставка-рослина (JPSa, JPSb, JPLa і JPLb). Ці результати підтримують висновок, що конструкція IND-44412-7 знаходиться в одному локусі в геномі пшениці і успадковується відповідно до менделівських принципів успадкування. Приклад 4: Збільшення урожайності як показник толерантності до абіотичного стресу. П'ятнадцять польових досліджень проводили для множини тестованих ділянок і дат посадки для оцінювання урожайності і компонентів урожайності трансгенного об'єкта IND-нн412-7 і батьківських нетрансгенних контрольних ліній (cv Cadenza). Ділянки були локалізовані в головних областях продукції пшениці Аргентини, які лежать в діапазоні між 32° південної широти і 38° південної широти. Область покриває різноманітні умови зовнішнього середовища для аргентинської продукції сільськогосподарської культури пшениці. Дослідження включали репрезентативні локалізації з регіонів пампи для пшениці, описаних в Kugler and Godoy (1974): IIN (7 досліджень), IIS (6 досліджень) і IV (два дослідження). На кожній ділянці дату посадки коригували відповідно до звичайної практики сільськогосподарських працівників, починаючи в травні/червні в північних областях і в липні в південних областях. Дати посадки і збирання представлені в таблиці 9. Таблиця 9:Вибрані локалізації для польових досліджень і дати посадки і збиранняID ділянкиЛокалізація ділянкиПровінціяРегіон для пшениціДата посадкиДата збиранняA12-1Монте-БуейКордоваIIN31-5-201226-12-2012A12-2Монте-БуейКордоваIIN19-6-201226-12-2012A13Монте-БуейКордоваIIN14-6-201312-12-2013D12Кораль-де-БустосКордоваIIN30-5-201212-12-2012D13Кораль-де-БустосКордоваIIN17-6-201317-12-2013F12Вілья СабойяБуенос-АйресIIS7-6-201222-12-2012F13Вілья СабойяБуенос-АйресIIS26-6-201312-12-2013G12-1Кармен-де-АрекоБуенос-АйресIIS14-6-201204-01-2013G12-2Кармен-де-АрекоБуенос-АйресIIS6-7-201204-01-2013H12ДероБуенос-АйресIIS12-6-201228-12-2012H13ДероБуенос-АйресIIS27-6-201319-12-2013I12БалькарсеБуенос-АйресIV25-7-20127-1-2013I13БалькарсеБуенос-АйресIV26-7-201313-1-2014P12ЛандетаСанта-ФеIIN3-6-2012-aP13ЛандетаСанта-ФеIIN10-6-201311-12-2013a Дослідження втрачено через затоплення при дозріванні Погодні умови реєстрували під час сезону вегетації для кожної ділянки. Річна кількість осадів, зареєстрована серед ділянок, лежала в діапазоні від 424 мм до 1497 мм для досліджень H13 і G12 відповідно (таблиця 10), що показує широку мінливість погоди серед ділянок і років. У ході 2013 р. для кількості осадів, підсумовуваної за час періоду вегетації (червень-грудень), зареєстровані значення нижче 500 мм для всіх ділянок. Дослідження з посадкою в 2013 р. мали більш високу імовірність умов стресу засухи, ніж дослідження з посадкою в 2012 р. Для 2012 р. значення кількості осадів були вище 500 мм для того ж самого періоду у всіх ділянках (таблиця 10). Таблиця 10Погодні дані (кількість осадів) для кожної ділянки в ході 2012 р. і 2013 р. для польових ділянок пшениціМісяцьID ділянкиaA12A13D12D13F12F13G12H12H13I12I13P12P13Січень473610325110075,51123246699817Лютий214872821592275211111106633164106Березень2126821142,91049616618446789821155Квітень9106198310530573370464583112Травень48444933563112016617,585104435Червень016024,500706023217Липень012013,5081104505005Серпень680560480203135329517870Вересень1352,51324,5551572,570364214111516Жовтень3211622911262455828525237,52750,523633Листопад7313115518416515098871117718364294Грудень1289715624,1415419117911150103140Червень-груденьb725421790377554285868723250591452818365Рік125576214537201156447149713284259127301418690a A12=Монте-Буей, дві дати посадки, рік 2012; A13=Монте-Буей, рік 2013; D12=Кораль-де-Бустос, рік 2012; D13=Кораль-де-Бустос, рік 2013; F12=Вілья Сабойя, рік 2012; F13=Вілья Сабойя, рік 2013; G12=Кармен-де-Ареко, дві дати посадки, рік 2012; H12=Деро, рік 2012; H13=Деро, рік 2013; I12=Балькарсе, рік 2012; I13=Балькарсе, рік 2013; P12=Ландета, рік 2012; P13=Ландета, рік 2013.b Період вегетації Польові дослідження організовували в кожній ділянці, слідуючи повністю рандомізованій блоковій схемі. Чотири повтори оцінювали у всіх локалізаціях. Ділянки складалися з семи рядів, відділених проміжками 0,2 м і завдовжки п'ять метрів. Всі польові дослідження були обмежені ділянками з 7 рядів і завдовжки 5 метрів. До посадки пул насіння IND-тт412-7 і Cadenza тестували за допомогою ПЛР для підтвердження присутності і відсутності Hahb4, відповідно. Все насіння обробляли з використанням інсектициду (тіаметоксаму, 0,4 мл кг-1) і фунгіциду (дифеноконазолу, 0,2 мл кг-1 і металаксилу-M, 0,15 мл кг-1) з використанням протоколу, вказаного на відповідній етикетці продукту. Все введення хімікатів у сільськогосподарську культуру проводили відповідно до звичайної практики сільськогосподарських працівників. Гербіциди, що наносяться восени перед посадкою, складалися з гліфосату (2,0 л га-1) і метсульфурон-метилу (6,8 г га-1). Фунгіцид наносили для боротьби з грибковими захворюваннями листя в дослідженнях P12, D12, A12-1, A12-2, F12, H12, G12-1, G12-2 і I12. Фунгіцид розпилювали один раз в кожному дослідженні, коли 50 % ділянок досягали стадії росту 5,1 (Zadoks, 1974). Інсектицидний спрей для боротьби зі щитниками (видів Nezara, видів Piezodorus і видів Dichelops) наносили на стадії росту Задокса 3,1 в дослідженнях A12-1, A12-2, D12, F12, P12. На відміну від цього, в дослідженнях P13, D13, A13, F13, H13 і I13 вирощування проводили без фунгіцидного або інсектицидного спрею через низьке навантаження захворювань і шкідників. Добрива і хімічні речовини, що вводяться в кожному дослідженні, описані в таблиці 11. Таблиця 11Введення добрив і хімічних речовин для боротьби зі шкідниками в кожному дослідженніID ділянкиХімічна речовинаСтадія ростуaРівеньОдиниціПризначенняA12-1Фосфат моноамоніюbGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаcGS 2,4150кг га-1ДобривоЦиперметрин 25 ECGS 3,125г га-1ІнсектицидАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидA12-2Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоЦиперметрин 25 ECGS 3,125г га-1ІнсектицидАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидA13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,6150кг га-1ДобривоD12Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоЦиперметрин 25 ECGS 3,125г га-1ІнсектицидАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидD13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,6150кг га-1ДобривоF12Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоЦиперметрин 25 ECGS 3,125г га-1ІнсектицидАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5l га-1ФунгіцидF13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,6150кг га-1Добривоa GS: Шкала Задокса (Zadoks, 1974)b Еквівалента градація 11-52-0b Еквівалента градація 46-0-0Примітка: Доза в таблиці відповідає комерційному продукту Таблиця 11Введення добрив і хімічних речовин для боротьби зі шкідниками в кожному дослідженні. ПродовженняID ділянкиХімічна речовинаСтадія ростуaРівеньОдиниціПризначенняG12-1Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидG12-2Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидH12Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 3,1300кг га-1ДобривоАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидH13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,6150кг га-1ДобривоI12Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидI13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,6150кг га-1ДобривоP12Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 2,3150кг га-1ДобривоЦиперметрин 25 ECGS 3,125г га-1ІнсектицидАзоксистробін+ципроконазол (Amistar Xtra ® 28 SC)GS 5,10,5л га-1ФунгіцидP13Фосфат моноамоніюGS 0160кг га-1ДобривоСечовинаGS 0150кг га-1Добриво Агрономічні дані оцінювали в кожному польовому дослідженні. Агрономічні змінні складалися з раннього травостою (NPL), кількості колосся на м-2 (NE), кількості зерен на колос-1 (NGE), маси тисячі зерен (PMG), тестової маси (PH), урожайності (REND), надземної біомаси (BMA) і збирального індексу (IC). Ранній травостій оцінювали за допомогою підрахунку рослин, які з'явилися на центральній площі ділянки 0,6 м2 до гілкування. NE, BMA, масу зерен (PG), PMG і IC оцінювали при збиранні для зразка центральної ділянки 0,6 м2. PMG оцінювали для зразка 10 г зерен, зібраних на кожній ділянці. NGE розраховували згідно з: NGE=(PG/NE) х 1000/PMG Ур. [1] PH оцінювали з використанням аргентинського стандартного протоколу, що використовується для комерціалізації пшениці (шкала зерна Шоппера). Урожайність оцінювали на п'яти центральних рядах кожної ділянки для досліджень A12-1, A12-2, D12, F12 і H12. У інших дослідженнях урожайність оцінювали на повній ділянці (7 рядів). Урожайність коригували на вологість зерна (13,5 %) і виражали як кг га-1. Дані для трансгенного об'єкта і контролю Cadenza аналізували з використанням ANOVA з повністю рандомізованою блоковою схемою при довірчому рівні 95 %, з використанням Infostat (Di Rienzo et al., 2010). Порівняння між трансгенним об'єктом і Cadenza проводили в комбінованому аналізі ділянок за REND, PMG, PH, NPL, NE, NGE, BMA і IC. У цьому аналізі дані збирали в пул серед ділянок, і джерела мінливості включали генотипи (трансгенні і контрольні), умови навколишнього середовища і взаємодію генотипу й умов навколишнього середовища. У комбінованому аналізі ділянок детектовані три статистично значущі відмінності з 8 порівнянь між IND-іі412-7 і контролем (таблиця 12). Статистично значуща відмінність детектована між IND-44412-7 і загальноприйнятим контролем для REND (р=0,0103), PMG (р=0,0039) і PH (р=0,0430). Крім того, не детектовано статистично значущих взаємодій дослідження з генотипом. REND IND-RR412-7 була на 133 кг га-1 вище, ніж для контролю, що являє собою середнє збільшення урожайності 5 %. І навпаки, для PMG і PH показані більш низькі значення для IND-вв412-7, порівняно з контролем. Відтворюваних відмінностей не спостерігали для циклу або відповіді на біотичний стрес між об'єктом і батьківським контролем. Загалом, значущі відмінності у урожайності між IND-нн412-7 і контролем дозволяють передбачати, що трансгенний об'єкт утворює більше насіння на одиницю площі землі. Менший розмір насіння може виникати внаслідок більш низького співвідношення джерела-стоку в ході наливання зерна, яке також приводить до більш низької PH. Відмінності між IND-аа412-7 і контролем являли собою 5 % і 2 % для PMG і PH, відповідно. Таблиця 12Порівняння між IND-ПП412-7 і батьківським контролем Cadenza в комбінованому аналізі ділянок з урожайності і компонентів урожайностіЗміннаaОдиницяСереднє (MSE)bIND-II412-7CadenzaNPLРослин м-2225(6,7)221(6,7)NEКолосків м-2412(11,1)410(9,7)NGEЗерен колос-121,7(0,8)21,8(0,7)PMGг28,3(0,8)29,7(0,7)*PHкг гл-163,7(1,1)64,8(1,0)*УРОЖАЙНІСТЬкг га-12641(163)2508(156)*BMAкг га-110583(743)10081(750)IC-0,31(0,01)0,31(0,01)a NPL= рослин на м2; NE=колосків на м2; NG=зерен колос-1; PH=тестова маса; PMG=маса тисячі зерен; REND=урожайність; BMA= надземна біомаса; IC=збиральний індекс. n=60 для NPL; n=56 для PMG, PH і REND; n=52 для NG і NE; n=24 для BMA і IC.b SE: стандартна помилка середнього* Статистично значущі відмінності (α=0,05) між контролем Cadenza і об'єктом IND-**412-7ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ<110> Bioceres LLC <120> ТРАНСГЕННА ПОДІЯ ПШЕНИЦІ IND- 412-7<130> 22108<160> 14 <170> PatentIn версії 3.5<210> 1<211> 47126<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Довга вставка без фланкувальних ділянок<400> 1tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa 60aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact 120catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg 180atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg 240aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct ataaaaatag 300gcgtatcacg aggccctttc gtctcgcgcg tttcggtgat gacggtgaaa acctctgaca 360catgcagctc ccggagacgg tcacagcttg tctgtaagcg gatgccggga gcagacaagc 420ccgtcagggc gcgtcagcgg gtgttggcgg gtgtcggggc tggcttaact atgcggcatc 480agagcagatt gtactgagag tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag 540gagaaaatac cgcatcaggc gccattcgcc attcaggctg cgcaactgtt gggaagggcg 600atcggtgcgg gcctcttcgc tattacgcca gctggcgaaa gggggatgtg ctgcaaggcg 660attaagttgg gtaacgccag ggttttccca gtcacgacgt tgtaaaacga cggccagtgc 720caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag agataatgag 780cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac ttgtttgaag 840tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa tataatctat 900agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta gacatggtct 960aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg 1020tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca ttttattagt 1080acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta gtacatctat 1140tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt ttttttattt 1200aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca aatacccttt 1260aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat gccagcctgt 1320taaacgccgt cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa ccagcagcgt cgcgtcgggc 1380caagcgaagc agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct ggacccctct cgagagttcc 1440gctccaccgt tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa ttgcgtggcg gagcggcaga 1500cgtgagccgg cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg gcaccggcag ctacggggga 1560ttcctttccc accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg ccgtaataaa tagacacccc 1620ctccacaccc tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg cacacacaca caaccagatc 1680tcccccaaat ccacccgtcg gcgtacgccg ctcgtcctcc cccccccccc ctctctacct 1740tctctagatc ggcgttccgg tccatggtta gggcccggta gttctacttc tgttcatgtt 1800tgtgttagat ccgtgtttgt gttagatccg tgctgctagc gttcgtacac ggatgcgacc 1860tgtacgtcag acacgtaacg tccggagagt tcgtaaaccg atcatccgat tcttcaccgc 1920tgccactact actagttttc tcttgatgct tttcggctac atttctcagc acctccaatt 1980gattgagtag ggcctgattc tctttcttta gagactcgga tttagacgca agcgtctcgt 2040agttatgctt tagcgcgtta tactcttgct caatctgcct cgactttgat cgcgcgcgtt 2100tgttctggaa ccatatcgcc acttgacgag gatgaagccc gagtttatgt gccaactggt 2160gtttcatcct taactcgggt ctcgactgtg tctcaaacat gtactctagg aaacttattt 2220gtttgtcggt aaatcgtctc cgcccctcgt ttcggttctt cctggtggtt gttacttgtt 2280gaagagacat ggatccgggt gtgatcctct atagtcgacc tgcagaagta acaccaaaca 2340acagggtgag catcgacaaa agaaacagta ccaagcaaat aaatagcgta tgaaggcagg 2400gctaaaaaaa tccacatata gctgctgcat atgccatcat ccaagtatat caagatcaaa 2460ataattataa aacatacttg tttattataa tagataggta ctcaaggtta gagcatatga 2520atagatgctg catatgccat catgtatatg catcagtaaa acccacatca acatgtatac 2580ctatcctaga tcgatatttc catccatctt aaactcgtaa ctatgaagat gtatgacaca 2640cacatacagt tccaaaatta ataaatacac caggtagttt gaaacagtat tctactccga 2700tctagaacga atgaacgacc gcccaaccac accacatcat cacaaccaag cgaacaaaaa 2760gcatctctgt atatgcatca gtaaaacccg catcaacatg tatacctatc ctagatcgat 2820atttccatcc atcatcttca attcgtaact atgaatatgt atggcacaca catacagatc 2880caaaattaat aaatccacca ggtagtttga aacagaattg gaattcgtaa tcatggtcat 2940agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa 3000gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc 3060gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc 3120aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact 3180cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac 3240ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa 3300aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg 3360acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa 3420gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc 3480ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac 3540gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac 3600cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg 3660taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt 3720atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagga 3780cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct 3840cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga 3900ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat cttttctacg gggtctgacg 3960ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat gagattatca aaaaggatct 4020tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt 4080aaacttggtc tgacagtttt caaatatgta tccgctcatg agacaataac cctgataaat 4140gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat 4200tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt 4260aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg atctcaacag 4320cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa 4380agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg 4440ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct 4500tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac 4560tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca 4620caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat 4680accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact 4740attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc 4800ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt ttattgctga 4860taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg 4920taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta tggatgaacg 4980aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag cattggtaaa actgtcagac 5040caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc 5100taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc 5160cactgagcgt cagaccccgt agaaagatcg ttcaaacatt tggcaataaa gtttcttaag 5220attgaatcct gttgccggtc ttgcgatgat tatcatataa tttctgttga attacgttaa 5280gcatgtaata attaacatgt aatgcatgac gttatttatg agatgggttt ttatgattag 5340agtcccgcaa ttatacattt aatacgcgat agaaaacaaa atatagcgcg caaactagga 5400taaattatcg cgcgcggtgt catctatgtt actagatcgg atccatgagc ccagaacgac 5460gcccggccga catccgccgt gccaccgagg cggacatgcc ggcggtctgc accatcgtca 5520accactacat cgagacaagc acggtcaact tccgtaccga gccgcaggaa ccgcaggagt 5580ggacggacga cctcgtccgt ctgcgggagc gctatccctg gctcgtcgcc gaggtggacg 5640gcgaggtcgc cggcatcgcc tacgcgggcc cctggaaggc acgcaacgcc tacgactgga 5700cggccgagtc gaccgtgtac gtctcccccc gccaccagcg gacgggactg ggctccacgc 5760tctacaccca cctgctgaag tccctggagg cacagggctt caagagcgtg gtcgctgtca 5820tcgggctgcc caacgacccg agcgtgcgca tgcacgaggc gctcggatat gccccccgcg 5880gcatgctgcg ggcggccggc ttcaagcacg ggaactggca tgacgtgggt ttctggcagc 5940tggacttcag cctgccggta ccgccccgtc cggtcctgcc cgtcaccgag atcgatcgtt 6000caaacatttg gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt tgccggtctt gcgatgatta 6060tcatataatt tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat taacatgtaa tgcatgacgt 6120tatttatgag atgggttttt atgattagag tcccgcaatt atacatttaa tacgcgatag 6180aaaacaaaat atagcgcgca aactaggata aattatcgcg cgcggtgtca tctatgttac 6240tagatcggaa ttcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca 6300caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag 6360tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt 6420cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc 6480gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg 6540tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa 6600agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg 6660cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga 6720ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg 6780tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg 6840gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc 6900gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg 6960gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca 7020ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt 7080ggcctaacta cggctacact agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag 7140ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg 7200gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc 7260ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt 7320tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt 7380ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca 7440gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg 7500tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac 7560cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg 7620ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc 7680gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta 7740caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac 7800gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc 7860ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac 7920tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact 7980caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa 8040tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt 8100cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca 8160ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa 8220aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac 8280tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg 8340gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc 8400gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata 8460ggcgtatcac gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac 8520acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag 8580cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat 8640cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa 8700ggagaaaata ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc 8760gatcggtgcg ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc 8820gattaagttg ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg 8880caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag agataatgag 8940cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac ttgtttgaag 9000tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa tataatctat 9060agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta gacatggtct 9120aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg 9180tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca ttttattagt 9240acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta gtacatctat 9300tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt ttttttattt 9360aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca aatacccttt 9420aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat gccagcctgt 9480taaacgccgt cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa ccagcagcgt cgcgtcgggc 9540caagcgaagc agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct ggacccctct cgagagttcc 9600gctccaccgt tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa ttgcgtggcg gagcggcaga 9660cgtgagccgg cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg gcaccggcag ctacggggga 9720ttcctttccc accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg ccgtaataaa tagacacccc 9780ctccacaccc tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg cacacacaca caaccagatc 9840tcccccaaat ccacccgtcg gcacctccgc ttcaaggtac gccgctcgtc ctcccccccc 9900ccccctctct accttctcta gatcggcgtt ccggtccatg gttagggccc ggtagttcta 9960cttctgttca tgtttgtgtt agatccgtgt ttgtgttaga tccgtgctgc tagcgttcgt 10020acacggatgc gacctgtacg tcagacacgt tctgattgct aacttgccag tgtttctctt 10080tggggaatcc tgggatggct ctagccgttc cgcagacggg atcgatttca tgattttttt 10140tgtttcgttg catagggttt ggtttgccct tttcctttat ttcaatatat gccgtgcact 10200tgtttgtcgg gtcatctttt catgcttttt tttgtcttgg ttgtgatgat gtggtctggt 10260tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaatt ctgtttcaaa ctacctggtg gatttattaa 10320ttttggatct gtatgtgtgt gccatacata ttcatagtta cgaattgaag atgatggatg 10380gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg catatacaga 10440gatgcttttt gttcgcttgg ttgtgatgat gtggtgtggt tgggcggtcg ttcattcgtt 10500ctagatcgga gtagaatact gtttcaaact acctggtgta tttattaatt ttggaactgt 10560atgtgtgtgt catacatctt catagttacg agtttaagat ggatggaaat atcgatctag 10620gataggtata catgttgatg tgggttttac tgatgcatat acatgatggc atatgcagca 10680tctattcata tgctctaacc ttgagtacct atctattata ataaacaagt atgttttata 10740attattttga tcttgatata cttggatgat ggcatatgca gcagctatat gtggattttt 10800ttagccctgc cttcatacgc tatttatttg cttggtactg tttcttttgt cgatgctcac 10860cctgttgttt ggtgttactt ctgcagggat ccatgagccc agaacgacgc ccggccgaca 10920tccgccgtgc caccgaggcg gacatgccgg cggtctgcac catcgtcaac cactacatcg 10980agacaagcac ggtcaacttc cgtaccgagc cgcaggaacc gcaggagtgg acggacgacc 11040tcgtccgtct gcgggagcgc tatccctggc tcgtcgccga ggtggacggc gaggtcgccg 11100gcatcgccta cgcgggcccc tggaaggcac gcaacgccta cgactggacg gccgagtcga 11160ccgtgtacgt ctccccccgc caccagcgga cgggactggg ctccacgctc tacacccacc 11220tgctgaagtc cctggaggca cagggcttca agagcgtggt cgctgtcatc gggctgccca 11280acgacccgag cgtgcgcatg cacgaggcgc tcggatatgc cccccgcggc atgctgcggg 11340cggccggctt caagcacggg aactggcatg acgtgggttt ctggcagctg gacttcagcc 11400tgccggtacc gccccgtccg gtcctgcccg tcaccgagat cgatcgttca aacatttggc 11460aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc gatgattatc atataatttc 11520tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg catgacgtta tttatgagat 11580gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata cgcgatagaa aacaaaatat 11640agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc tatgttacta gatctgctac 11700aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg 11760atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc 11820tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact 11880gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc 11940aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat 12000acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc 12060ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac 12120tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa 12180aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact 12240catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg 12300atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg 12360aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct ataaaaatag 12420gcgtatcacg aggccctttc gtctcgcgcg tttcggtgat gacggtgaaa acctctgaca 12480catgcagctc ccggagacgg tcacagcttg tctgtaagcg gatgccggga gcagacaagc 12540ccgtcagggc gcgtcagcgg gtgttggcgg gtgtcggggc tggcttaact atgcggcatc 12600agagcagatt gtactgagag tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag 12660gagaaaatac cgcatcaggc gccattcgcc attcaggctg cgcaactgtt gggaagggcg 12720atcggtgcgg gcctcttcgc tattacgcca gctggcgaaa gggggatgtg ctgcaaggcg 12780attaagttgg gtaacgccag ggttttccca gtcacgacgt tgtaaaacga cggccagtgc 12840caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag agataatgag 12900cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac ttgtttgaag 12960tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa tataatctat 13020agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta gacatggtct 13080aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg 13140tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca ttttattagt 13200acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta gtacatctat 13260tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt ttttttattt 13320aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca aatacccttt 13380aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat gccagcctgt 13440taaacgccgt ttgttgaata gaatacaaac cctagaaaaa caaggcacat ctcggcgccg 13500ccaatagaag gcagaaaccc tagccgtcat ttttcttgaa gaatatagag cgacgtcgat 13560aggaagatac ttaaatgttg aatccaagca cctagaataa tgagttagat tagaagaaaa 13620ctatcaactt cgaaatcaag aagaaatgtt ttattctgtt gcataaaact ttcgcgtgga 13680gaagctctgt tcagagcccg ggtagccact gggcacgtct cctagatact ggactcatcg 13740gacgctctcc tcgagccatt aatatggtcc gtcctgtaga aaccccaacc cgtgaaatca 13800aaaaactcga cggcctgtgg gcattcagtc tggatcgcga aaactgtgga attgatcagc 13860gttggtggga aagcgcgtta caagaaagcc gggcaattgc tctcctgttc cgaccctgcc 13920gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc 13980acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctcggca tccggtcagt 14040ggcagtgaag ggcgaacagt tcctgattaa ccacaaaccg ttctacttta ctggctttgg 14100tcgtcatgaa gatgcggact tgcgtggcaa aggattcgat aacgtgctga tggtgcacga 14160ccacgcattg atggactgga ttggggccaa ctcctaccgt acctcgcatt acccttacgc 14220tgaagagatg ctcgactggg cagatgaaca tggcatcgtg gtgattgatg aaactgctgc 14280tgtcggcttt aacctctctt taggcattgg tttcgaagcg ggcaacaagc cgaaagaact 14340gtacagcgaa gaggcagtca acggggaaac tcagcaagcg cacttacagg cgattaaaga 14400gctgatagcg cgtgacaaaa accacccaag cgtggtgatg tggagtattg ccaacgaacc 14460ggatacccgt ccgcaaggtg cacgggaata tttcgcgcca ctggcggaag caacgcgtaa 14520actcgacccg acgcgtccga tcacctgcgt caatgtaatg ttctgcgacg ctcacaccga 14580taccatcagc gatctctttg atgtgctgtg cctgaaccgt tattacggat ggtatgtcca 14640aagcggcgat ttggaaacgg cagagaaggt actggaaaaa gaacttctgg cctggcagga 14700gaaactgcat cagccgatta tcatcaccga atacggcgtg gatacgttag ccgggctgca 14760ctcaatgtac accgacatgt ggagtgaaga gtatcagtgt gcatggctgg atatgtatca 14820ccgcgtcttt gatcgcgtca gcgccgtcgt cggtgaacag gtatggaatt tcgccgattt 14880tgcgacctcg caaggcatat tgcgcgttgg cggtaacaag aaagggatct tcactcgcga 14940ccgcaaaccg aagtcggcgg ctcgctcagt gtgtgtgact ctgctggtgc tggggaatgg 15000agctcggggc accgtatttg tagcgcgcgc gccgctgtac gtggcgccct ggcgcggcta 15060cgtggagggg agctgcgtgc cagaggggag gcgggccgcc acgtcgcacg gccgtgctta 15120tcgggccatc ggcgaggtgc gtgccagctt gggcgtcgcg tgtcgtggag cgctcctgct 15180cgcggcggag ctggttgagt ggattgcgat gcggtgcttg gtacagagct cgatggacaa 15240ctcgaggaga gcgtccgatg agtccagtat ctaggagacg tgcccagtgg ctacccgggc 15300tctgaacaga gcttctccac gcgaaagttt tatgcaacag aataaaacat ttcttcttga 15360tttcgaagtt gatagttttc ttctaatcta actcattatt ctaggtgctt ggattcaaca 15420tttaagtatc ttcctatcga cgtcgctcta tattcttcaa gaaaaatgac ggctagggtt 15480tctgccttct attggtcatt acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct 15540tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga 15600gattatcaaa aaggatcttc acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa 15660tctaaagtat atatgagtaa acttggtctg acagttttac caatgcttaa tcagtgaggc 15720acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta 15780gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga 15840cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg 15900cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt gccgggaagc 15960tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat 16020cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag 16080gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat 16140cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag cactgcataa 16200ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa 16260gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt caatacggga 16320taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg 16380gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc 16440acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg 16500aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact 16560cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat 16620atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt 16680gccacctgac gtctaagaaa ccattattat catgacatta acctataaaa ataggcgtat 16740cacgaggccc tttcgtctcg cgcgtttcgg tgatgacggt gaaaacctct gacacatgca 16800gctcccggag acggtcacag cttgtctgta agcggatgcc gggagcagac aagcccgtca 16860gggcgcgtca gcgggtgttg gcgggtgtcg gggctggctt aactatgcgg catcagagca 16920gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa 16980ataccgcatc aggcgccatt cgccattcag gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt 17040gcgggcctct tcgctattac gccagctggc gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag 17100ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg acgttgtaaa acgacggcca gtgccaagct 17160tgcatgcctg cagtgcagcg tgacccggtc gtgcccctct ctagagataa tgagcattgc 17220atgtctaagt tataaaaaat taccacatat tttttttgtc acacttgttt gaagtgcagt 17280ttatctatct ttatacatat atttaaactt tactctacga ataatataat ctatagtact 17340acaatgtacg ccgctcgtcc tccccccccc cccctctcta ccttctctag atcggcgttc 17400cggtccatgg ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gatccgtgtt 17460tgtgttagat ccgtgctgct agcgttcgta cacggatgcg acctgtacgt cagacacgtt 17520ctgattgcta acttgccagt gtttctcttt ggggaatcct gggatggctc tagccgttcc 17580gcagacggga tcgatttcat gatttttttt gtttcgttgc atagggtttg gtttgccctt 17640ttcctttatt tcaatatatg ccgtgcactt gtttgtcggg tcatcttttc atgctttttt 17700ttgtcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtagaattc 17760tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttggatctg tatgtgtgtg ccatacatat 17820tcatagttac gaattgaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 17880gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttg ttcgcttggt tgtgatgatg 17940tggtgtggtt gggcggtcgt tcattcgttc tagatcggag tagaatactg tttcaaacta 18000cctggtgtat ttattaattt tggaactgta tgtgtgtgtc atacatcttc atagttacga 18060gtttaagatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgt gggttttact 18120gatgcatata catgatggca tatgcagcat ctattcatat gctctaacct tgagtaccta 18180tctattataa taaacaagta tgttttataa ttattttgat cttgatatac ttggatgatg 18240gcatatgcag cagctatatg tggatttttt tagccctgcc ttcatacgct atttatttgc 18300ttggtactgt ttcttttgtc gatgctcacc ctgttgtttg gtgttacttc tgcagtcgac 18360tcgtagagga tccatcccga ttaggaaagt agagcatgag cccagaacga cgcccggccg 18420acatccgccg tgccaccgag gcggacatgc cggcggtctg caccatcgtc aaccactaca 18480tcgagacaag cacggtcaac ttccgtaccg agccgcagga accgcaggag tggacggacg 18540acctcgtccg tctgcgggag cgctatccct ggctcgtcgc cgaggtggac ggcgaggtcg 18600ccggcatcgc ctacgcgggc ccctggaagg cacgcaacgc ctacgactgg acggccgagt 18660cgaccgtgta cgtctccccc cgccaccagc ggacgggact gggctccacg ctctacaccc 18720acctgctgaa gtccctggag gcacagggct tcaagagcgt ggtcgctgtc atcgggctgc 18780ccaacgaccc gagcgtgcgc atgcacgagg cgctcggata tgccccccgc ggcatgctgc 18840gggcggccgg cttcaagcac gggaactggc atgacgtggg tttctggcag ctggacttca 18900gcctgccggt accgccccgt ccggtcctgc ccgtcaccga gatcatatga atagatgctg 18960catatgccat catgtatatg catcagtaaa acccacatca acatgtatac ctatcctaga 19020tcgatatttc catccatctt aaactcgtaa ctatgaagat gtatgacaca cacatacagt 19080tccaaaattt ataaatacac caggtagttt gaaacagtat tctactccga tctagaacga 19140atgaacgacc gcccaaccac accacatcat cacaaccaag cgaacaaaaa gcatctctgt 19200atatgcatca gtaaaacccg catcaacatg tatacctatc ctagatcgat atttccatcc 19260atcatcttca attcgtaact atgaatatgt atggcacaca catacagatc caaaattaat 19320aaatccacca ggtagtttga aacagaattc tactccgatc tagaacgacc gcccaaccag 19380accacatcat cacaaccaag acaaaaaaaa gcatgaaaag atgacccgac aaacaagtgc 19440acggcatata ttgaaataaa ggaaaagggc aaaccaaacc ctatgcaacg aaacaaaaaa 19500aatcatgaaa tcgatcccgt ctgcggaacg gctagagcca tcccaggatt ccccaaagag 19560aaacactggc aagttagcaa tcagaacgtg tctgacgtac aggtcgcatc cgtgtacgaa 19620cgctagcagc acggatctaa cacaaacacg gatctaacac aaacatgaac agaagtagaa 19680ctaccgggcc ctaaccatgg accggaacgc cgatctagag aaggtagaga gggggggggg 19740gggaggacga gcggcgtacg ccgacgggtg gatttggggg agatctggtt gtgtgtgtgt 19800gcgctccgaa caacacgagg ttggggaaag agggtgtgga gggggtgtct atttattacg 19860gcgggcgagg aagggaaagc gaaggagcgg tgggaaagga atcccccgta gctgccggtg 19920ccgtgagagg aggaggaggc cgcctgccgt gccggctcac gtctgccgct ccgccacgca 19980atttctggat gccgacagcg gagcaagtcc aacggtggag cggaactctc gagaggggtc 20040cagaggcagc gacagagatg ccgtgccgtc tgcttcgctt ggcccgacgc gacgctgctg 20100gttcgctggt tggtgtccgt tagactcgtc gacggcgttt aacaggctgg cattatctac 20160tcgaaacaag aaaaatgttt ccttagtttt tttaatttct taaagggtat ttgtttaatt 20220tttagtcact ttattttatt ctattttata tctaaattat taaataaaaa aactaaaata 20280gagttttagt tttcttaatt tagaggctaa aatagaataa aatagatgta ctaaaaaaat 20340tagtctataa aaaccattaa ccctaaaccc taaatggatg tactaataaa atggatgaag 20400tattatatag gtgaagctat ttgcaaaaaa aaaggagaac acatgcacac taaaaagata 20460aaactgtaga gtcctgttgt caaaatactc aattgtcctt tagaccatgt ctaactgttc 20520atttatatga ttctctaaaa cactgatatt attgtagtac tatagattat attattcgta 20580gagtaaagtt taaatatatg tataaagata gataaactgc acttcaaaca agtgtgacaa 20640aaaaaatatg tggtaatttt ttataactta gacatgcaat gctcattatc tctagagagg 20700ggcacgaccg ggtcacgctg cactgcaggc atgcaagctt gcactggccg tcgttttaca 20760acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat cgccttgcag cacatccccc 20820tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat cgcccttccc aacagttgcg 20880cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc cttacgcatc tgtgcggtat 20940ttcacaccgc atatggtgca ctctcagtac aatctgctct gatgccgcat agttaagcca 21000gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg gcttgtctgc tcccggcatc 21060cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg tgtcagaggt tttcaccgtc 21120atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc ctatttttat aggttaatgt 21180catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac 21240ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat ccgctcatga gacaataacc 21300ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg agtattcaac atttccgtgt 21360cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt tttgctcacc cagaaacgct 21420ggtgaaagta aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga gtgggttaca tcgaactgga 21480tctcaacagc ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa gaacgttttc caatgatgag 21540cacttttaaa gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt attgacgccg ggcaagagca 21600actcggtcgc cgcatacact attctcagaa tgacttggtt gagtactcac cagtcacaga 21660aaagcatctt acggatggca tgacagtaag agaattatgc agtgctgcca taaccatgag 21720tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga ggaccgaagg agctaaccgc 21780ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat cgttgggaac cggagctgaa 21840tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct gtagcaatgg caacaacgtt 21900gcgcaaacta ttaactggcg aactacttac tctagcttcc cggcaacaat taatagactg 21960gatggaggcg gataaagttg caggaccact tctgcgctcg gcccttccgg ctggctggtt 22020tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc ggtatcattg cagcactggg 22080gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg acggggagtc aggcaactat 22140ggatgaacga aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca ctgattaagc attggtaact 22200gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta aaacttcatt tttaatttaa 22260aaggatctag gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc aaaatccctt aacgtgagtt 22320ttcgttccac tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa ggatcttctt gagatccttt 22380ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca ccgctaccag cggtggtttg 22440tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta actggcttca gcagagcgca 22500gataccaaat actgtccttc tagtgtagcc gtagttaggc caccacttca agaactctgt 22560agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca gtggctgctg ccagtggcga 22620taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta ccggataagg cgcagcggtc 22680gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag cgaacgacct acaccgaact 22740gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt cccgaaggga gaaaggcgga 22800caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc acgagggagc ttccaggggg 22860aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac ctctgacttg agcgtcgatt 22920tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac gccagcaacg cggccttttt 22980acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc tttcctgcgt tatcccctga 23040ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat accgctcgcc gcagccgaac 23100gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag cgcccaatac gcaaaccgcc 23160tctccccgcg cgttggccga ttcatttatg cagctggcac gacaggtttc ccgactggaa 23220agcgggcagt gagcgcaacg caatttatgt gagttagctc actcattagg caccccaggc 23280tttacacttt atgcttccgg ctcgtatgtt aagcttgcat gcctgcagtg cagcgtgacc 23340cggtcgtgcc cctctctaga gataatgagc attgcatgtc taagttataa aaaattacca 23400catatttttt ttgtcacact tgtttgaagt gcagtttatc tatctttata catatattta 23460aactttactc tacgaataat ataatctata gtactacaat aatatcagtg ttttagagaa 23520tcatataaat gaacagttag acatggtcta aaggacaatt gagtattttg acaacaggac 23580tctacagttt tatcttttta gtgtgcatgt gttctccttt ttttttgcaa atagcttcac 23640ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta gggtttaggg ttaatggttt 23700ttatagacta atttttttag tacatctatt ttattctatt ttagcctcta aattaagaaa 23760actaaaactc tattttagtt tttttattta ataatttaga tataaaatag aataaaataa 23820agtgactaaa aattaaacaa atacccttta agaaattaaa aaaactaagg aaacattttt 23880cttgtttcga gtagataatg ccagcctgtt aaacgccgtc gacgagtcta acggacacca 23940accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc aagcgaagca gacggcacgg catctctgtc 24000gctgcctctg gacccctctc gagagttccg ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc 24060atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac gtgagccggc acggcaggcg gcctcctcct 24120cctctcacgg caccggcagc tacgggggat tcctttccca ccgctccttc gctttccctt 24180cctcgcccgc cgtaataaat agacacccga actgtatgtg tgtgtcatac atcttcatag 24240ttacgagttt aagatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgtgggt 24300tttactgatg catatacatg atggcatatg cagcatctat tcatatgctc taaccttgag 24360tacctatcta ttataataaa caagtatgtt ttataattat tttgatcttg atatacttgg 24420atgatggcat atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc cctgccttca tacgctattt 24480atttgcttgg tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt tgtttggtgt tacttctgca 24540gggatccatg tctcttcaac aagtaacaac caccaggaag aaccgaaacg aggggcggag 24600acgatttacc gacaaacaaa taagtttcct agagtacatg tttgagacac agtcgagacc 24660cgagttaagg atgaaacacc agttggcaca taaactcggg cttcatcctc gtcaagtggc 24720gatatggttc cagaacaaac gcgcgcgatc aaagtcgagg cagattgagc aagagtataa 24780cgcgctaaag cataactacg agacgcttgc gtctaaatcc gagtctctaa agaaagagaa 24840tcaggcccta ctcaatcaat tggaggtgct gagaaatgta gccgaaaagc atcaagagaa 24900aactagtagt agtggcagcg gtgaagaatc ggatgatcgg tttacgaact ctccggacgt 24960tatgtttggt caagaaatga atgttccgtt ttgcgacggt tttgcgtacc ttgaagaagg 25020aaacagtttg ttggagattg aagaacaact gccagacctt caaaagtggt gggagttcga 25080tcgttcaaac atttggcaat aaagtttctt aagattgaat cctgttgccg gtcttgcgat 25140gattatcata taatttctgt tgaattacgt taagcatgta ataattaaca tgtaatgcat 25200gacgttattt atgagatggg tttttatgat tagagtcccg caattataca tttaatacgc 25260gatagaaaac aaaatatagc gcgcaaacta ggataaatta tcgcgcgcgg tgtcatctat 25320gttactagat cggaattcgt aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc 25380gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta 25440atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa 25500cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg gggagaggcg gtttgcgtat 25560tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc tcggtcgttc ggctgcggcg 25620agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc acagaatcag gggataacgc 25680aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt 25740gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag 25800tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc 25860cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc 25920ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt 25980cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt 26040atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc 26100agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa 26160gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa 26220gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg 26280tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga 26340agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg 26400gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag atccttttaa attaaaaatg 26460aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg tctgacagtt gatcgttggg 26520aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa 26580tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac 26640aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc 26700cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca 26760ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga 26820gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gatagaactg tcagaccaag 26880tttactcata tatactttag attgatttaa aacttcattt ttaatttaaa aggatctagg 26940tgaagatcct ttttgataat ctcatgacca aaatccctta acgtgagttt tcgttccact 27000gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg 27060taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc ggtggtttgt ttgccggatc 27120aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag cagagcgcag ataccaaata 27180ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa gaactctgta gcaccgccta 27240catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc cagtggcgat aagtcgtgtc 27300ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc gcagcggtcg ggctgaacgg 27360ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta caccgaactg agatacctac 27420agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag aaaggcggac aggtatccgg 27480taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct tccaggggga aacgcctggt 27540atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga gcgtcgattt ttgtgatgct 27600cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc gacgctgggc cgccttttta 27660cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct ttcctgcgtt atcccctgat 27720tctgtggata accgtattac cgcctttgag tgagctgata gtgtcacgca gatcctatga 27780aatttggtcg atgattgtct tttatggatc cgttcagacc aagtcttcgt gtgtctatgt 27840tatcgtgcct ttaaattgaa tcctttcgat ttatgcttct ttttgtcagc ggtggttgat 27900cttctgatgt gctggttaca aagggtctta gcataacaat tttccaattg tctactacaa 27960caagttttgt ctaacttcga tgaagcctag gtgatgacga tttcaacttg cttcggtgct 28020tgtaactgtt attagatggt ctacggatct aaatgtaact tctattattt gttgtgtttt 28080ttgtattatt atgatggatg atgaatagat taaaagatcc cgcaaataaa accttaaatg 28140ataaatgtca cacgtcacgt gcatggcact ccggccctaa tgccttttgt agctattcta 28200gtaacgcaag gatagcaaat ttccgtgaca cgacgcaagt ttttgttaaa aataaattaa 28260agcaagaaaa ttgtcatact tgctaacgaa aattgccatc cttgcctatt catcatccat 28320cataataata caaaaaacac aacaaataat agaagttaca tttagatccg tagaccatct 28380aataacagtt acaagcaccg aagcaagttg gtgccgtctg cttcgcttgg cccgacgcga 28440cgctgctggt tcgctggttg gtgtccgtta gactcgtcga cggcgtttaa caggctggca 28500ttatctactc gaaacaagaa aaatgtttcc ttagtttttt taatttctta aagggtattt 28560gtttaatttt tagtcacttt attttattct attttatatc taaattatta aataaaaaaa 28620ctaaaataga gttttagttt tcttaattta gaggctaaaa tagaataaaa tagatgtact 28680aaaaactcaa ttgtccttta gaccatgtct aactgttcat ttatatgatt ctctaaggca 28740ctggccgtcg ttttacaacg tcgtgactgg gaaaaccctg gcgttaccca acttaatcgc 28800cttgcagcac atcccccttt cgccagctgg cgtaatagcg aagaggcccg caccgatcgc 28860ccttcccaac agttgcgcag cctgaatggc gaatggcgcc tgatgcggta ttttctcctt 28920acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata tggtgcactc tcagtacaat ctgctctgat 28980gccgcatagt taagccagcc ccgacacccg ccaacacccg ctgacgcgcc ctgacgggct 29040tgtctgctcc cggcatccgc ttacagacaa gctgtgaccg tctccgggag ctgcatgtgt 29100cagaggtttt caccgtcatc accgaaacgc gcgagacgaa agggcctcgt gatacgccta 29160tttttatagg ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga cgtcaggtgg cacttttcgg 29220ggaaatgtgc gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattacca atgcttaatc 29280agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc 29340gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata 29400ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg 29460gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca tccagtctat taattgttgc 29520cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct 29580acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa 29640cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt 29700cctccgaata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct 29760tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact 29820cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa 29880acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc 29940atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga 30000tacatatttg aagatctcgg tgacgggcag gaccggacgg ggcggtaccg gcaggctgaa 30060gtccagctgc cagaaaccca cgtcatgcca gttcccgtgc ttgaagccgg ccgcccgcag 30120catgccgcgg ggggcatatc cgagcgcctc gtgcatgcgc acgctcgggt cgttgggcag 30180cccgatgaca gcgaccacgc tcttgaagcc ctgtgcctcc agggacttca gcaggtgggt 30240gtagagcgtg gagcccagtc ccgtccgctg gtggcggggg gagacgtaca cggtcgactc 30300ggccgtccag tcgtaggcgt tgcgtgcctt ccaggggccc gcgtaggcga tgccggcgac 30360ctcgccgtat ggatgaagta ttatataggt gaagctattt gcaaaaaaaa aggagaacac 30420atgcacacta aaaagataaa actgtagagt cctgttgtca aaatactcaa ttgtccttta 30480gaccatgtct aactgttcat ttatatgatt ctctaaaaca ctgatattat tgtagtacta 30540tagattatat tattcgtaga gtaaagttta aatatatgta taaagataga taaactgcac 30600ttcaaacaag tgtgacaaaa aaaatatgtg gtaatttttt ataacttaga catgcaatgc 30660tcattatctc tagagagggg cacgaccggg tcacgctgca ctgcaggcat gcaagcttct 30720gcagaagtaa caccaaacaa cagggtgagc atcgacaaaa gaaacagtac caagcaaata 30780aatagcgtat gaaggcaggg ctaaaaaaat ccacatatag ctgctgcata tgccatcatc 30840caagtatatc aagatcaaaa taattataaa acatacttgt ttattataat agataggtac 30900tcaaggttag agcatatgaa tagatgctgc atatgccatc atgtatatgc atcagtaaaa 30960cccacatcaa catgtatacc tatcctagat cgatatttcc atccatctta aactcgtaac 31020tatgaagatg tatgacacac acatacagtt ccaaaattaa taaatacacc aggtagtttg 31080aaacagtatt ctactccgat ctagaacgaa tgaacgaccg cccaaccaca ccacatcatc 31140acaaccaagc gaacaaaaag catctctgta tatgcatcag taaaacccgc atcaacatgt 31200atacctatcc tagatcgata tttccatcca tcatcttcaa ttcgtaacta tgaatatgta 31260tggcacacac atacagatcc aaaattaata aatccaccag gtagtttgaa acagaattct 31320actccgatct agaacgaccg cccaaccaga ccacatcatc acaaccaaga caaaaaaaag 31380catgaaaaga tgacccgaca aacaagtgca cggcatatat tgaaataaag gaaaagggca 31440aaccaaaccc tatgcaacga aacaaaaaaa atcatgaaat cgatcccgtc tgcggaacgg 31500ctagagccat cccaggattc cccaaagaga aacactggca agttagcaat cagaacgtgt 31560ctgacgtaca ggtcgcatcc gtgtacgaac gctagcagca cggatctaac acaaacacgg 31620atctaacaca aacatgaaca gaagtagaac taccgggccc taaccatgga ccggaacgcc 31680gatctagaga aggtagagag gggggggggg ggaggacgag cggcgtacct tgaagcggag 31740gtgccgacgg gtggatttgg gggagatctg gttgtgtgtg tgtgcgctcc gaacaacacg 31800aggttgggga aagagggtgt ggagggggtg tctatttatt acggcgggcg aggaagggaa 31860agcgaaggag cggtgggaaa ggaatccccc gtagctgccg gtgccgtgag aggaggagga 31920ggccgcctgc cgtgccggct cacgtctgcc gctccgccac gcaatttctg gatgccgaca 31980gcggagcaag tccaacggtg gagcggaact ctcgagaggg gtccagaggc agcgacagag 32040atgccgtgcc gtctgcttcg cttggcccga cgcgacgctg ctggttcgct ggttggtgtc 32100cgttagactc gtcgacggcg tttaacaggc tggcattatc tactcgaaac aagaaaaatg 32160tttccttagt ttttttaatt tcttaaaggg tatttgttta atttttagtc actttatttt 32220attctatttt atatctaaat tattaaataa aaaaactaaa atagagtttt agttttctta 32280atttagaggc taaaatagaa taaaatagat gtactaaaaa aattagtcta taaaaaccat 32340taaccctaaa ccctaaatgg atgtactaat aaaatggatg aagtattata taggtgaagc 32400tatttgcaaa aaaaaaggag aacacatgca cactaaaaag ataaaactgt agagtcctgt 32460tgtcaaaata ctcaattgtc ctttagacca tgtctaactg ttcatttata tgattctcta 32520aaacactgat attattgtag tactatagat tatattattc gtagagtaaa gtttaaatat 32580atgtataaag atagataaac tgcacttcaa acaagtgtga caaaaaaaat atgtggtaat 32640tttttataac ttagacatgc aatgctcatt atctctagag aggggcacga ccgggtcacg 32700ctgcactgca ggcatgcaag cttgcactgg ccgtcgtttt acaacgtcgt gactgggaaa 32760accctggcgt tacccaactt aatcgccttg cagcacatcc ccctttcgcc agctggcgta 32820atagcgaaga ggcccgcacc gatcgccctt cccaacagtt gcgcagcctg aatggcgaat 32880ggcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac cgcatatggt 32940gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagccccga cacccgccaa 33000cacccgctga cgcgccctga cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac agacaagctg 33060tgaccgtctc cgggagctgc atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga 33120gacgaaaggg cctcgtgata cgcctatttt tataggttaa tgtcatgata ataatggttt 33180cttagacgtc aggtggcact tttcggggaa atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt 33240tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata accctgataa atgcttcaat 33300aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt attccctttt 33360ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg 33420ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga 33480tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc 33540tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac 33600actattctca gaatgacttg gttgagtact caccagtcac agaaaagcat cttacggatg 33660gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg ccataaccat gagtgataac actgcggcca 33720acttacttct gacaacgatc ggaggaccga aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg 33780gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg 33840acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg 33900gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga ctggatggag gcggataaag 33960ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg gtttattgct gataaatctg 34020gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct 34080cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac 34140agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta actgtcagac caagtttact 34200catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga 34260tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt 34320cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct 34380gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc 34440taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgtcc 34500ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc 34560tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg 34620ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt 34680cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg 34740agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg 34800gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt 34860atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag 34920gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt 34980gctggccttt tgctcacatg ttctttcctg cgttatcccc tgattctgtg gataaccgta 35040ttaccgcctt tgagtgagct gataccgctc gccgcagccg aacgaccgag cgcagcgagt 35100cagtgagcga ggaagcggaa gagcgcccaa tacgcaaacc gcctctcccc gcgcgttggc 35160cgattcatta atgcagctgg cacgacaggt ttcccgactg gaaagcgggc agtgagcgca 35220acgcaattaa tgtgagttag ctcactcatt aggcacccca ggctttacac tttatgcttc 35280cggctcgtat gttgtgtgga attgtgagcg gataacaatt tcacacagga aacagctatg 35340accatgatta cgaattccga tcgttcaaac atttggcaat aaagtttctt aagattgaat 35400cctgttgccg gtcttgcgat gattatcata taatttctgt tgaattacgt taagcatgta 35460ataattaaca tgtaatgcat gacgttattt atgagatggg tttttatgat tagagtcccg 35520caattataca tttaatacgc gatagaaaac aaaatatagc gcgcaaacta ggataaatta 35580tcgcgcgcgg tgtcatctat gttactagat cgatctcggt gacgggcagg accggacggg 35640gcggtaccgg caggctgaag tccagctgcc agaaacccac gtcatgccag ttcccgtgct 35700tgaagccggc cgcccgcagc atgccgcggg gggcatatcc gagcgcctcg tgcatgcgca 35760cgctcgggtc gttgggcagc ccgatgacag cgaccacgct cttgaagccc tgtgcctcca 35820gggacttcag caggtgggtg tagagcgtgg agcccagtcc cgtccgctgg tggcgggggg 35880agacgtacac ggtcgactcg gccgtccagt cgtaggcgtt gcgtgccttc caggggcccg 35940cgtaggcgat gccggcgacc tcgccgtcca cctcggcgac gagccaggga tagcgctccc 36000gcagacggac gaggtcgtcc gtccactcct gcggttcctg cggctcggta cggaagttga 36060ccgtgcttgt ctcgatgtag tggttgacga tggtgcagac cgccggcatg tccgcctcgg 36120tggcacggcg gatgtcggcc gggcgtcgtt ctgggctcat ggatccaagc ttgcatgcct 36180gcagtgcagc gtgacccggt cgtgcccctc tctagagata atgagcattg catgtctaag 36240ttataaaaaa ttaccacata ttttttttgt cacacttgtt tgaagtgcag tttatctatc 36300tttatacata tatttaaact ttactctacg aataatataa tctatagtac tacaataata 36360tcagtgtttt agagaatcat ataaatgaac agttagacat ggtctaaagg acaattgagt 36420attttgacaa caggactcta cagttttatc tttttagtgt gcatgtgttc tccttttttt 36480ttgcaaatag cttcacctat ataatacttc atccatttta ttagtacatc catttagggt 36540ttagggttaa tggtttttat agactaattt ttttagtaca tctattttat tctattttag 36600cctctaaatt aagaaaacta aaactctatt ttagtttttt tatttaataa tttagatata 36660aaatagaata aaataaagtg actaaaaatt aaacaaatac cctttaagaa attaaaaaaa 36720ctaaggaaac atttttcttg tttcgagtag ataatgccag cctgttaaac gccgtcgacg 36780agtctaacgg acaccaacca gcgaaccagc agcgtcgcgt cgggccaagc gaagcagacg 36840gcacggcatc tctgtcgctg cctctggacc cctctcgaga gttccgctcc accgttggac 36900ttgctccgct gtcggcatcc agaaattgcg tggcggagcg gcagacgtga gccggcacgg 36960caggcggcct cctcctcctc tcacggcacc ggcagctacg ggggattcct ttcccaccgc 37020tccttcgctt tcccttcctc gcccgccgta ataaatagac accccctcca caccctcttt 37080ccccaacctc gtgttgttcg gagcgcacac acacacaacc agatctcccc caaatccacc 37140cgtcggcacc tccgcttcaa ggtacgccgc tcgtcctccc cccccccccc tctctacctt 37200ctctagatcg gcgttccggt ccatggttag ggcccggtag ttctacttct gttcatgttt 37260gtgttagatc cgtgtttgtg ttagatccgt gctgctagcg ttcgtacacg gatgcgacct 37320gtacgtcaga cacgttctga ttgctaactt gccagtgttt ctctttgggg aatcctggga 37380tggctctagc cgttccgcag acgggatcga tttcatgatt ttttttgttt cgttgcatag 37440ggtttggttt gcccttttcc tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat 37500cttttcatgc ttttttttgt cttggttgtg atgatgtggt ctggttgggc ggtcgttcta 37560gatcggagta gaattctgtt tcaaactacc tggtggattt attaattttg gatctgtatg 37620tgtgtgccat acatattcat agttacgaat tgaagatgat ggatggaaat atcgatctag 37680gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat acagagatgc tttttgttcg 37740cttggttgtg atgatgtggt gtggttgggc ggtcgttcat tcgttctaga tcggagtaga 37800atactgtttc aaactacctg gtgtatttat taattttgga actgtatgtg tgtgtcatac 37860atcttcatag ttacgagttt aagatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt 37920tgatgtgggt tttactgatg catatacatg atggcatatg cagcatctat tcatatgctc 37980taaccttgag tacctatcta ttataataaa caagtatgtt ttataattat tttgatcttg 38040atatacttgg atgatggcat atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc cctgccttca 38100tacgctattt atttgcttgg tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt tgtttggtgt 38160tacttctgca gggatccatg agcccagaac gacgcccggc cgacatccgc cgtgccaccg 38220aggcggacat gccggcggtc tgcaccatcg tcaaccacta catcgagaca agcacggtca 38280acttccgtac cgagccgcag gaaccgcagg agtggacgga cgacctcgtc cgtctgcggg 38340agcgctatcc ctggctcgtc gccgaggtgg acggcgaggt cgccggcatc gcctacgcgg 38400gcccctggaa ggcacgcaac gcctacgact ggacggccga gtcgaccgtg tacgtctccc 38460cccgccacca gcggacggga ctgggctcca cgctctacac ccacctgctg aagtccctgg 38520aggcacaggg cttcaagagc gtggtcgctg tcatcgggct gcccaacgac ccgagcgtgc 38580gcatgcacga ggcgctcgga tatgcccccc gcggcatgct gcgggcggcc ggcttcaagc 38640acgggaactg gcatgacgtg ggtttctggc agctggactt cagcctgccg gtaccgcccc 38700gtccggtcct gcccgtcacc gagatctgat ccgtcgacct gcagatcgtt caaacatttg 38760gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt tgccggtctt gcgatgatta tcatataatt 38820tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat taacatgtaa tgcatgacgt tatttatgag 38880atgggttttt atgattagag tcccgcaatt atacatttaa tacgcgatag aaaacaaaat 38940atagcgcgca aactaggata aattatcgcg cgcggtgtca tctatgttac tagatcggaa 39000ttcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca caattccaca 39060caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag tgagctaact 39120cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct 39180gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc 39240ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca 39300ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg 39360agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca 39420taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa 39480cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc 39540tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc 39600gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct 39660gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg 39720tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag 39780gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta 39840cggctacact agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg 39900aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt 39960tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt 40020ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag 40080attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat 40140ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc 40200tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat 40260aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc 40320acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag 40380aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag 40440agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt 40500ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg 40560agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt 40620tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc 40680tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc 40740attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa 40800taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg 40860aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc 40920caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag 40980gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt 41040cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt 41100tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc 41160acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata ggcgtatcac 41220gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct 41280cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg 41340cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat 41400tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa ggagaaaata 41460ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg 41520ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg 41580ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg caagcttgca 41640tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag agataatgag cattgcatgt 41700ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac ttgtttgaag tgcagtttat 41760ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa tataatctat agtactacaa 41820taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta gacatggtct aaaggacaat 41880tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttctcctt 41940tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca ttttattagt acatccattt 42000agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta gtacatctat tttattctat 42060tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt ttttttattt aataatttag 42120atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca aatacccttt aagaaattaa 42180aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat gccagcctgt taaacgccgt 42240cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa ccagcagcgt cgcgtcgggc caagcgaagc 42300agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct ggacccctct cgagagttcc gctccaccgt 42360tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa ttgcgtggcg gagcggcaga cgtgagccgg 42420cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg gcaccggcag ctacggggga ttcctttccc 42480accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg ccgtaataaa tagacacccc ctccacaccc 42540tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg cacacacaca caaccagatc tcccccaaat 42600ccacccgtcg gcacctccgc ttcaaggtac gccgctcgtc ctcccccccc ccccctctct 42660accttctcta gatcggcgtt ccggtccatg gttagggccc ggtagttcta cttctgttca 42720tgtttgtgtt agatccgtgt ttgtgttaga tccgtgctgc tagcgttcgt acacggatgc 42780gacctgtacg tcagacacgt tctgattgct aacttgccag tgtttctctt tggggaatcc 42840tgggatggct ctagccgttc cgcagacggg atcgatttca tgattttttt tgtttcgttg 42900catagggttt ggtttgccct tttcctttat ttcaatatat gccgtgcact tgtttgtcgg 42960gtcatctttt catgcttttt tttgtcttgg ttgtgatgat gtggtctggt tgggcggtcg 43020ttctagatcg gagtagaatt ctgtttcaaa ctacctggtg gatttattaa ttttggatct 43080gtatgtgtgt gccatacata ttcatagtta cgaattgaag atgatggatg gaaatatcga 43140tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg catatacaga gatgcttttt 43200gttcgcttgg ttgtgatgat gtggtgtggt tgggcggtcg ttcattcgtt ctagatcgga 43260gtagaatact gtttcaaact acctggtgta tttattaatt ttggaactgt atgtgtgtgt 43320catacatctt catagttacg agtttaagat ggatggaaat atcgatctag gataggtata 43380catgttgatg tgggttttac tgatgcatat acatgatggc atatgcagca tctattcata 43440tgctctaacc ttgagtacct atctattata ataaacaagt atgttttata attattttga 43500tcttgatata cttggatgat ggcatatgca gcagctatat gtggattttt ttagccctgc 43560cttcatacgc tatttatttg cttggtactg tttcttttgt cgatgctcac cctgttgttt 43620ggtgttactt ctgcaggtcg actctagagg atccatcgat taggaagtaa ccatgagccc 43680agaacgacgc ccggccgaca tccgccgtgc caccgaggcg gacatgccgg cggtctgcac 43740catcgtcaac cactacatcg agacaagcac ggtcaacttc cgtaccgagc cgcaggaacc 43800gcaggagtgg acggacgacc tcgtccgtct gcgggagcgc tatccctggc tcgtcgccga 43860ggtggacggc gaggtcgccg gcatcgccta cgcgggcccc tggaaggcac gcaacgccta 43920cgactggacg gccgagtcga ccgtgtacgt ctccccccgc caccagcgga cgggactggg 43980ctccacgctc tacacccacc tgctgaagtc cctggaggca cagggcttca agagcgtggt 44040cgctgtcatc gggctgccca acgacccgag cgtgcgcatg cacgaggcgc tcggatatgc 44100cccccgcggc atgctgcggg cggccggctt caagcacggg aactggcatg acgtgggttt 44160ctggcagctg gacttcagcc tgccggtacc gccccgtccg gtcctgcccg tcaccgagat 44220ctgatccgtc gacctgcaga tcgttcaaac atttggcaat aaagtttctt aagattgaat 44280cctgttgccg gtcttgcgat gattatcata taatttctgt tgaattacgt taagcatgta 44340ataattaaca tgtaatgcat gacgttattt atgagatggg tttttatgat tagagtcccg 44400caattataca tttaatacgc gatagaaaac aaaatatagc gcgcaaacta ggataaatta 44460tcgcgcgcgg tgtcatctat gttactagat cggaattcgt aatcatggtc atagctgttt 44520cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag 44580tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg 44640cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg 44700gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc 44760tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc 44820acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg 44880aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat 44940cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag 45000gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga 45060tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg 45120tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt 45180cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac 45240gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc 45300ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt 45360ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc 45420ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc 45480agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg 45540aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag 45600atccttttaa attaaaaatg aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg 45660tctgacagtt accaatgctt aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt 45720tcatccatag ttgcctgact ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca 45780tctggcccca gtgctgcaat gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca 45840gcaataaacc agccagccgg aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc 45900tccatccagt ctattaattg ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt 45960ttgcgcaacg ttgttgccat tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg 46020gcttcattca gctccggttc ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc 46080aaaaaagcgg ttagctcctt cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg 46140ttatcactca tggttatggc agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga 46200tgcttttctg tgactggtga gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga 46260ccgagttgct cttgcccggc gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta 46320aaagtgctca tcattggaaa acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg 46380ttgagatcca gttcgatgta acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact 46440ttcaccagcg tttctgggtg agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata 46500agggcgacac ggaaatgttg aatactcata ctcttccttt ttcaatatta ttgaagcatt 46560tatcagggtt attgtctcat gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa 46620ataggggttc cgcgcacatt tccccgaaaa gtgccacctg acgtctaaga aaccattatt 46680atcatgacat taacctataa aaataggcgt atcacgaggc cctttcgtct cgcgcgtttc 46740ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg 46800taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt tggcgggtgt 46860cggggctggc ttaactatgc ggcatcagag cagattgtac tgagagtgca ccatatgcgg 46920tgtgaaatac cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgcca ttcgccattc 46980aggctgcgca actgttggga agggcgatcg gtgcgggcct cttcgctatt acgccagctg 47040gcgaaagggg gatgtgctgc aaggcgatta agttgggtaa cgccagggtt ttcccagtca 47100cgacgttgta aaacgacggc cagtgc 47126<210> 2<211> 19598<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Коротка вставка без фланкувальних ділянок<400> 2ttggaacacc acgatgcctg tagcaatggc aacaacgttg cgcaaactat taactggcga 60actacttact ctagcttccc ggtaacaatt aatagactgg atggaggcgg ataaagttgt 120aggaccactt ctgcgctcgg cccttccggc tggctggttt attgctgata aatctggagc 180cggactctag gcttcccggg caacaaatta attagactgg atggagggat aaagtttgca 240gaccactttc tgcgctcggc ccttccgctg ggctgttcta tgcccgctga aatcaccagt 300ctctctctac aaatctatct ctctctataa taatgtgtga gtagttccca gataagggaa 360ttagggttct tatagggttt cgctcatgtg ttgagcatat aagaaaccct tagtatgtat 420ttgtatttgg gctggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat 480atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat accgcatcag gcgccattcg 540ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc 600cagctggcga aagggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc 660cagtcacgac gttgtaaaac gacggccagt gcaagcttgc atgcctgcag tgcagcgtga 720cccggtcgtg cccctctcta gagataatga gcattgcatg tctaagttat aaaaaattac 780cacatatttt ttttgtcaca cttgtttgaa gtgcagttta tctatcttta tacatatatt 840taaactttac tctacgaata atataatcta tagtactaca ataatatcag tgttttagag 900aatcatataa atgaacagtt agacatggtc taaaggacaa ttgagtattt tgacaacagg 960actctacagt tttatctttt tagtgtgcat gtgttctcct ttttttttgc aaatagcttc 1020acctatataa tacttcatcc attttattag tacatccatt tagggtttag ggttaatggt 1080ttttatagac taattttttt agtacatcta ttttattcta ttttagcctc taaattaaga 1140aaactaaaac tctattttag tttttttatt taataattta gatataaaat agaataaaat 1200aaagtgacta aaaattaaac aaataccctt taagaaatta aaaaaactaa ggaaacattt 1260ttcttgtttc gagtagataa tgccagcctg ttaaacgccg tcgacgagtc taacggacac 1320caaccagcga accagcagcg tcgcgtcggg ccaagcgaag cagacggcac ggcatctctg 1380tcgctgcctc tggacccctc tcgagagttc cgctccaccg ttggacttgc tccgctgtcg 1440gcatccagaa attgcgtggc ggagcggcag acgtgagccg gcacggcagg cggcctcctc 1500ctcctctcac ggcaccggca gctacggggg attcctttcc caccgctcct tcgctttccc 1560ttcctcgccc gccgtaataa atagacaccc cctccacacc ctctttcccc aacctcgtgt 1620tgttcggagc gcacacacac acaaccagat ctcccccaaa tccacccgtc ggcgtacgcc 1680gctcgtcctc cccccccccc cctctctacc ttctctagat cggcgttccg gtccatggtt 1740agggcccggt agttctactt ctgttcatgt ttgtgttaga tccgtgtttg tgttagatcc 1800gtgctgctag cgttcgtaca cggatgcgac ctgtacgtca gacacgttct gattgctaac 1860ttgccagtgt ttctctttgg ggaatcctgg gatggctcta gccgttccgc agacgggatc 1920gatttcatga ttttttttgt ttcgttgcat agggtttggt ttgccctttt cctttatttc 1980aatatatgcc gtgcacttgt ttgtcgggtc atcttttcat gctttttttt gtcttcctgt 2040ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg 2100agtgggttac atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga 2160agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg 2220tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt 2280tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg 2340cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg 2400aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga 2460tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc 2520tgtagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactgtt attgccggga aaagtgtacg 2580tatcaccgtt tgtgtgaaca acgaactgaa ctggcagact atcccctgca gaagtaacac 2640caaacaacag ggtgagcatc gacaaaagaa acagtaccaa gcaaataaat agcgtatgaa 2700ggcagggcta aaaaaatcca catatagctg ctgcatatgc catcatccaa gtatatcaag 2760atcaaaataa ttataaaaca tacttgttta ttataataga taggtactca aggttagagc 2820atatgaatag atgctgcata tgccatcatg tatatgcatc agtaaaaccc acatcaacat 2880gtatacctat cctagatcga tatttccatc catcttaaac tcgtaactat gaagatgtat 2940gacacacaca tacagttcca aaattaataa atacaccagg tagtttgaaa cagtattcta 3000ctccgatcta gaacgaatga acgaccgccc aaccacacca catcatcaca accaagcgaa 3060caaaaagcat ctctgtatat gcatcagtaa aacccgcatc aacatgtata cctatcctag 3120aagtactata gattatatta ttcgtagagt aaagtttaaa tatatgtata aagatagata 3180aactgcactt caaacaagtg tgacaaaaaa aatatgtggt aattttttat aacttagaca 3240tgcaatgctc attatctcta gagaggggca cgaccgggtc acgctgcact gcaggcatgc 3300aagcttggca ctggccgtcg ttttacaacg tcgtgactgg gaaaaccctg gcgttaccca 3360acttaatcgc cttgcagcac atcccccttt cgccagctgg cgtaatagcg aagaggcccg 3420caccgatcgc ccttcccaac agttgcgcag cctgaatggc gaatggcgcc tgatgcggta 3480ttttctcctt acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata tggtgcactc tcagtacaat 3540ctgctctgat gccgcatagt taagccagcc ccgacacccg ccaacacccg ctgacgcgcc 3600ctgacgggct tgtctgctcc cggcatccgc ttacagacaa gctgtgaccg tctccgggag 3660ctgcatgtgt cagaggtttt caccgtcatc accgaaacgc gcgagacgaa agggcctcgt 3720gatacgccta tttttatagg ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga cgtcaggtgg 3780cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattacca 3840atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat ccatagttgc 3900ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg gccccagtgc 3960tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa taaaccagcc 4020agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca tccagtctat 4080taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc gcaacgttgt 4140tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt cattcagctc 4200cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa aagcggttag 4260ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc gcagtgttat cactcatggt 4320tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc gtaagatgct tttctgtgac 4380tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg cggcgaccga gttgctcttg 4440cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga actttaaaag tgctcatcat 4500tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta ccgctgttga gatccagttc 4560gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct tttactttca ccagcgtttc 4620tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag ggaataaggg cgacacggaa 4680atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga agcatttatc agggttattg 4740tctcatgagc ggatacatat ttgaaaactg tcagaccaag tttactcata tatactttag 4800attgatttaa aacttcattt ttaatttaaa aggatctagg tgaagatcct ttttgataat 4860ctcatgacca aaatccctta acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa 4920aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg taagccaata gaaggcagaa 4980accctagccg tcatttttct tgaagaatat agagcgacgt cgataggaag atacttaaat 5040gttgaatcca agcacctaga ataatgagtt agattagaag aaaactatca acttcgaaat 5100caagaagaaa tgttttattc tgttgcataa aactttcgcg tggagaagct ctgttcagag 5160cccgggtagc cactgggcac gtctcctaga tactggactc atcggacgct ctcctcgagt 5220tgtccatcga gctctgtacc aagcaccgca tcgcaatcca ctcaaccagc tccgccgcga 5280gcaggagcgc tccacgacac gcgacgccca agctggcacg cacctcgccg atggcccgat 5340aagcacggcc gtgcgacgtg gcggcccgcc tcccctctgg cacgcagctc ccctccacgt 5400agccgcgcca gggcgccacg tacagcggcg cgcgcgctac aaatacggtg ccccgagctc 5460cattccccag caccagcaga gtcacacaca ctgagcgagc taaaccatca ggaagtgatg 5520gagcatcagg gcggctatac gccatttgaa gccgatgtca cgccgtatgt tattgccggg 5580aaaagtgtac gtatcaccgt ttgtgccgga atccatcgca gcgtaatgct ctacaccacg 5640ccgaacacct gggtggacga tatcaccgtg gtgacgcatg tcgcgcaaga ctgtaaccac 5700gcgtctgttg actggcaggt ggtggccaat ggtgatgtca gcgttgaact gcgtgatgcg 5760gatcaacagg tggttgcaac tggacaaggc actagcggga ctttgcaagt ggtgaatccg 5820cacctctggc aaccgggtga aggttatctc tatgaactgt gcgtcacagc caaaagccag 5880acagagtgtg atatctaccc gcttcgcgtc ggcatccggt cagtggcagt gaagggcgaa 5940cagttcctga ttaaccacaa accgttctac tttactggct ttggtcgtca tgaagatgcg 6000gacttgcgtg gcaaaggatt cgataacgtg ctgttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc 6060tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat 6120aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc 6180acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag 6240aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag 6300agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt 6360ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg 6420agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt 6480tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc 6540tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc 6600attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa 6660taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg 6720aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc 6780caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag 6840gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt 6900cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt 6960tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc 7020acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata ggcgtatcac 7080gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct 7140cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg 7200cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat 7260tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa ggagaaaata 7320ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg 7380ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg 7440ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg caagcttgca 7500tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag agataatgag cattgcatgt 7560ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac ttgtttgaag tgcagtttat 7620ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa tataatctat agtactacaa 7680taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta gacatggtct aaaggacaat 7740tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttctcctt 7800tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca ttttattagt acatccattt 7860agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta gtacatctat tttattctat 7920tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt ttttttattt aataatttag 7980atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca aatacccttt aagaaattaa 8040aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat gccagcctgt taaacgccgt 8100cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa ccagcagcgt cgcgtcgggc caagcgaagc 8160agacggcacg gcatctctgt ctgaatagaa tacaaaccct agaaaaacaa ggcacatctc 8220ggcgccgcca atagaaggca gaaaccctag ccgtcatttt tcttgaagaa tatagagcga 8280cgtcgatagg aagatactta aatgttgaat ccaagcacct agaataatga gttagattag 8340aagaaaacta tcaacttcga aatcaagaag aaatgtttta ttctgttgca taaaactttc 8400gcgtggagaa gctctgttca gagcccgggt agccactggg cacgtctcct agatactgga 8460ctcatcggac gctctcctcg agttgtccat cgagctctgt accaagcacc gcatcgcaat 8520ccactcaacc agctccgccg cgagcaggag cgctccacga cacgcgacgc ccaagctggc 8580acgcacctcg ccgatggccc gataagcacg gccgtgcgac gtggcggccc gcctcccctc 8640tggcacgcag ctcccctcca cgtagccgcg ccagggcgcc acgtacagcg gcgcgcgcgc 8700tacaaatacg gtgccccgag ctccattccc cagcaccagc agagtcacac acactgagcg 8760agctaaacca tggtatagcc gccctgatgc tccatcactt cctgattatt gacccacact 8820ttgccgtaat gagtgaccgc atcgaaacgc agcacgatac gctggcctgc ccaacctttc 8880ggtataaaga cttcgcgctg ataccagacg ttgcccgcat aattacgaat atctgcatcg 8940gcgaactgat cgttaaaact gcctggcaca gcaattgccc ggctttcttg taacgcgctt 9000tcccaccaac gctgatcaat tccacagttt tcgcgatcca gactgaatgc ccacaggccg 9060tcgagttttt tgatttcacg ggttggggtt tctacaggac gctattaatt gttgccggga 9120agctagagta agtagttcgc cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg 9180catcgtggtg tcacgctcgt cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc 9240aaggcgagtt acatgatccc ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc 9300gatcgttgtc agaagtaagt tggccgcagt gttatcactc atggttcact gtcagaccaa 9360gtttactcat atatacttta gattgattta aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag 9420gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac 9480tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc 9540gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat 9600caagagctac caactctttt tccgaaggta actggcttca gcagagcgca gataccaaat 9660actgtccttc tagtgtagcc gtagttaggc caccacttca agaactctgt agcaccgcct 9720acatacctcg ctctgctaat cctgttacca gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt 9780cttaccgggt tggactcaag acgatagtta ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg 9840gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag cgaacgacct acaccgaact gagataccta 9900cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg 9960gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg 10020tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc 10080tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac gccagcaacg cggccttttt acggttcctg 10140gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat 10200aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc 10260agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg 10320cgttggccga ttcattaatg cagctggcac gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt 10380gagcgcaacg caattaatgt gagttagctc actcattagg caccccaggc tttacacttt 10440atgcttccgg ctcgtatgtt gtgtggaatt gtgagcggat aacaatttca cacaggaaac 10500agctatgacc atgattacga attccgatct agtaacatag atgacaccgc gcgcgataat 10560ttatcctagt ttgcgcgcta tattttgttt tctatcgcgt attaaatgta taattgcggg 10620actctaatca taaaaaccca tctcataaat aacgtcatgc attacatgtt aattattaca 10680tgcttaacgt aattcaacag aaattatatg ataatcatcg caagaccggc aacaggattc 10740aatcttaaga aactttattg ccaaatgttt gaacgatctg caggtcgacg gatcagatct 10800cggtgacggg caggaccgga cggggcggta ccggcaggct gaagtccagc tgccagaaac 10860ccacgtcatg ccagttcccg tgcttgaagc cggccgcccg cagcatgccg cggggggcat 10920atccgagcgc ctcgtgcatg cgcacgctcg ggtcgttggg cagcccgatg acagcgacca 10980cgctcttgaa gccctgtgcc tccagggact tcagcaggtg ggtgtagagc gtggagccca 11040gtcccgtccg ctggtggcgg ggggagacgt acacggtcga ctcggccgtc cagtcgtagg 11100cgttgcgtgc cttccagggg cccgcgtagg cgatgccggc gacctcgccg tccacctcgg 11160cgacgagcca gggatagcgc tcccgcagac ggacgaggtc gtccgtccac tcctgcggtt 11220cctgcggctc ggtacggaag ttgaccgtgc ttgtctcgat gtagtggttg acgatggtgc 11280agaccgccgg catgtccgcc tcggtggcac ggcggatgtc ggccgggcgt cgttctgggc 11340tcatggatcc agctccgccg cgagcaggag cgctccacga cacgcgacgc ccaagctggc 11400acgcacctcg ccgatggccc gataaggcag agcgaggtat gtaggcggtg ctacagagtt 11460cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaaggaca gtatttggta tctgcgctct 11520gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct tgatccggca aacaaaccac 11580cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt acgcgcagaa aaaaaggatc 11640tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg 11700ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc acctagatcc ttttaaatta 11760aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa acttggtctg acagttacca 11820atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat ccatagttgc 11880ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg gccccagtgc 11940tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa taaaccagcc 12000agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca tccagtctat 12060taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc gcaacgttgt 12120tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt cattcagctc 12180cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa aagcggttag 12240ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc gcagtgttat cactcatggt 12300tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc gtaagatgct tttctgtgac 12360tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg cggcgaccga gttgctcttg 12420cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga actttaaaag tgctcatcat 12480tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta ccgctgttga gatccagttc 12540gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct tttactttca ccagcgtttc 12600tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag ggaataaggg cgacacggaa 12660atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga agcatttatc agggttattg 12720tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg 12780cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc attattatca tgacattaac 12840ctataaaaat aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg cgtttcggtg atgacggtga 12900aaacctctga cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg 12960gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gctggcttaa 13020ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat atgcggtgtg aaataccgca 13080cagatgcgta aggagaaaat accgcatcag gcgccattcg ccattcaggc tgcgcaactg 13140ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc cagctggcga aagggggatg 13200tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc cagtcacgac gttgtaaaac 13260gacggccagt gcaagcttgc atgcctgcag tgcagcgtga cccggtcgtg cccctctcta 13320gagataatga gcattgcatg tctaagttat aaaaaattac cacatatttt ttttgtcaca 13380cttgtttgaa gtgcagttta tctatcttta tacatatatt taaactttac tctacgaata 13440atataatcta tagtactaca ataatatcag tgttttagag aatcatataa atgaacagtt 13500agacatggtc taaaggacaa ttgagtattt tgacaacagg actctacagt tttatctttt 13560tagtgtgcat gtgttctcct ttttttttgc aaatagcttc acctatataa tacttcatcc 13620attttattag tacatccatt tagggtttag ggttaatggt ttttatagac taattttttt 13680agtacatcta ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaactaaaac tctattttag 13740tttttttatt taataattta gatataaaat agaataaaat aaagtgacta aaaattaaac 13800aaataccctt taagaaatta aaaaaactaa ggaaacattt ttcttgtttc gagtagataa 13860tgccagcctg ttaaacgccg tcgacgagtc taacggacac caaccagcga accagcagcg 13920tcgcgtcggg ccaagcgaag cagacggcac ggcatctctg tcgctgcctc tggacccctc 13980tcgagagttc cgctccaccg ttggacttgc tccgctgtcg gcatccagaa attgcgtggc 14040ggagcggcag acgtgagccg gcacggcagg cggcctcctc ctcctctcac ggcaccggca 14100gctacggggg attcctttcc caccgctcct tcgctttccc ttcctcgccc gccgtaataa 14160atagacaccc cctccacacc ctctttcccc aacctcgtgt tgttcggagc gcacacacac 14220acaaccagat ctcccccaaa tccacccgtc ggcgtacgcc gctcgtcctc cccccccccc 14280cctctctacc ttctctagat cggcgttccg gtccatggtt agggcccggt agttctactt 14340ctgttcatgt ttgtgttaga tccgtgtttg tgttagatcc gtgctgctag cgttcgtaca 14400cggatgcgac ctgtacgtca gacacgttct gattgctaac ttgccagtgt ttctctttgg 14460ggaatcctgg gatggctcta gccgttccgc agacgggatc gatttcatga ttttttttgt 14520ttcgttgcat agggtttggt ttgccctttt cctttatttc aatatatgcc gtgcacttgt 14580ttgtcgggtc atcttttcat gctttttttt gtcttggttg tgatgatgtg gtctggttgg 14640gcggtcgttc tagatcggag tagaattccc cgatctagta acatagatga caccgcgcgc 14700gataatttat cctagtttgc gcgctatatt ttgttttcta tcgcgtatta aatgtataat 14760tgcgggactc taatcataaa aacccatctc ataaataacg tcatgcatta catgttaatt 14820attacatgct taacgtaatt caacagaaat tatatgataa tcatcgcaag accggcaaca 14880ggattcaatc ttaagaaact ttattgccaa atgtttgaac gatcggggaa attcgagctc 14940ttagaactcc caccactttt ggaactccca ccacttttga aggtctggca gttgttcttc 15000aatctccaac aaactgtttc cttcttcaag gtacgcaaaa ccgtcgcaaa acggaacatt 15060catttcttga ccaaacataa cgtccggaga gttcgtaaac cgatcatccg attcttcacc 15120gctgccacta ctactagttt tctcttgatg cttttcggct acatttctca gcacctccaa 15180ttgattgagt agggcctgat tctctttctt tagagactcg gatttagacg caagcgtctc 15240gtagttatgc tttagcgcgt tatactcttg ctcaatctgc ctcgactttg atcgcgcgcg 15300tttgttctgg aaccatatcg ccacttgacg aggatgaagc ccgagtttat gtgccaactg 15360gtgtttcatc cttaactcgg gtctcgactg tgtctcaaac atgtactcta ggaaacttat 15420ttgtttgtcg gtaaatcgtc tccgcccctc gtttcggttc ttcctggtgg ttgttacttg 15480ttgaagagac atggatccga gtcgacctgc agaagtaaca ccaaacaaca gggtgacact 15540cgacaaaaga aacagtacca agcaaataaa tagcgtatga aggcagggct aaaaaaatcc 15600acatatagct gctgcatatg ccatcatcca agtatatcaa gatcaaaata attataaaac 15660atacttgttt attataatag ataggtactc aaggttagag catatgaata gatgctgcat 15720atgccatcat gtatatgcat cagtaaaacc cacatcaaca tgtataccta tcctagatcg 15780atatttccat ccatcttaaa ctcgtaacta tgaacgctgt cttgacacac acatacagtt 15840ccaaaattaa taaatacacc aggtagtttg aaacagtatt ctactccgat ctagaacgaa 15900tgaacgaccg cccaaccaca ccacatcatc acaaccaagc gaacaaaaag catctctgta 15960tatgcatcag taaaacccgc atcaacatgt atacctatcc tagatcgata tttccatcca 16020tcatcttcaa ttcgtaacta tgaatatgta tggcacacac atacagatcc aaaattaata 16080aatccaccag gtagtttgaa acagaattcg taatcatggt catagctgtt tcctgtgtga 16140aattgttatc cgctcacaat tccacacaac atacgagccg gaagcataaa gtgtaaagcc 16200tggggtgcct aatgagtgag ctaactcaca ttaattgcgt tgcgctcact gcccgctttc 16260cagtcgggaa acctgtcgtg ccagctgcat taatgaatcg gccaacgcgc ggggagaggc 16320ggtttgcgta ttgggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg actcgctgcg ctcggtcgtt 16380cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa tacggttatc cacagaatca 16440ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa 16500aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat 16560cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc 16620cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc 16680gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct cacgctgtag gtatctcagt 16740tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac 16800cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg 16860ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca 16920gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc 16980gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa 17040accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa 17100ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac 17160ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg 17220agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca 17280atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagtttga ggcacctatc tcagcgatct 17340gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact acgatacggg 17400agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc 17460cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt ggtcctgcaa 17520ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta agtagttcgc 17580cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt 17640cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc 17700ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc agaagtaagt 17760tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt actgtcatgc 17820catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc tgagaatagt 17880gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata 17940gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga 18000tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac tgatcttcag 18060catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa 18120aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt tttcaatatt 18180attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga 18240aaaataaatg tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag 18300tgccacctga cgtctaagaa accattatta tcatgacatt aacctataaa aataggcgta 18360tcacgaggcc ctttcgtctc gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc 18420agctcccgga gacggtcaca gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc 18480agggcgcgtc agcgggtgtt ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc 18540agattgtact gagagtgcac catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa 18600aataccgcat caggcgccat tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg 18660tgcgggcctc ttcgctatta cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa 18720gttgggtaac gccagggttt tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgccaagc 18780ttgcatgcct gcagtgcagc gtgacccggt cgtgcccctc tctagagata atgagcattg 18840catgtctaag ttataaaaaa ttaccacata ttttttttgt cacacttgtt tgaagtgcag 18900tttatctatc tttatacata tatttaaact ttactctacg aataatataa tctatagtac 18960tacaataata tcagtgtttt agagaatcat ataaatgaac agttagacat ggtctaaagg 19020acaattgagt attttgacaa caggactcta cagttttatc tttttagtgt gcatgtgttc 19080tccttttttt ttgcaaatag cttcacctat ataatacttc atccatttta ttagtacatc 19140catttagggt ttagggttaa tggtttttat agactaattt ttttagtaca tctattttat 19200tctattttag cctctaaatt aagaaaacta aaactctatt ttagtttttt tatttaataa 19260tttagatata aaatagaata aaataaagtg actaaaaatt aaacaaatac cctttaagaa 19320attaaaaaaa ctaaggaaac atttttcttg tttcgagtag ataatgccag cctgttaaac 19380gccgtcgacg agtctaacgg acaccaacca gcgaaccagc agcgtcgcgt cgggccaagc 19440gaagcagacg gcacggcatc tctgtcgctg cctctggacc cctctcgaga gttccgctcc 19500accgttggac ttgctccctt tattttattc tattttatat ctaaattatt aaataaaaaa 19560actaaaatag agttttagtt ttcttaattt agaggcta 19598<210> 3<211> 5470<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> pIND4+HB4<400> 3aagcttgcat gcctgcagtg cagcgtgacc cggtcgtgcc cctctctaga gataatgagc 60attgcatgtc taagttataa aaaattacca catatttttt ttgtcacact tgtttgaagt 120gcagtttatc tatctttata catatattta aactttactc tacgaataat ataatctata 180gtactacaat aatatcagtg ttttagagaa tcatataaat gaacagttag acatggtcta 240aaggacaatt gagtattttg acaacaggac tctacagttt tatcttttta gtgtgcatgt 300gttctccttt ttttttgcaa atagcttcac ctatataata cttcatccat tttattagta 360catccattta gggtttaggg ttaatggttt ttatagacta atttttttag tacatctatt 420ttattctatt ttagcctcta aattaagaaa actaaaactc tattttagtt tttttattta 480ataatttaga tataaaatag aataaaataa agtgactaaa aattaaacaa atacccttta 540agaaattaaa aaaactaagg aaacattttt cttgtttcga gtagataatg ccagcctgtt 600aaacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 660aagcgaagca gacggcacgg catctctgtc gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 720ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 780gtgagccggc acggcaggcg gcctcctcct cctctcacgg caccggcagc tacgggggat 840tcctttccca ccgctccttc gctttccctt cctcgcccgc cgtaataaat agacaccccc 900tccacaccct ctttccccaa cctcgtgttg ttcggagcgc acacacacac aaccagatct 960cccccaaatc cacccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg ccgctcgtcc tccccccccc 1020cccctctcta ccttctctag atcggcgttc cggtccatgg ttagggcccg gtagttctac 1080ttctgttcat gtttgtgtta gatccgtgtt tgtgttagat ccgtgctgct agcgttcgta 1140cacggatgcg acctgtacgt cagacacgtt ctgattgcta acttgccagt gtttctcttt 1200ggggaatcct gggatggctc tagccgttcc gcagacggga tcgatttcat gatttttttt 1260gtttcgttgc atagggtttg gtttgccctt ttcctttatt tcaatatatg ccgtgcactt 1320gtttgtcggg tcatcttttc atgctttttt ttgtcttggt tgtgatgatg tggtctggtt 1380gggcggtcgt tctagatcgg agtagaattc tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat 1440tttggatctg tatgtgtgtg ccatacatat tcatagttac gaattgaaga tgatggatgg 1500aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag 1560atgctttttg ttcgcttggt tgtgatgatg tggtgtggtt gggcggtcgt tcattcgttc 1620tagatcggag tagaatactg tttcaaacta cctggtgtat ttattaattt tggaactgta 1680tgtgtgtgtc atacatcttc atagttacga gtttaagatg gatggaaata tcgatctagg 1740ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcagcat 1800ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920tagccctgcc ttcatacgct atttatttgc ttggtactgt ttcttttgtc gatgctcacc 1980ctgttgtttg gtgttacttc tgcaggtcga ctctagagga tccgatccac catgtctctt 2040caacaagtaa caaccaccag gaagaaccga aacgaggggc ggagacgatt taccgacaaa 2100caaataagtt tcctagagta catgtttgag acacagtcga gacccgagtt aaggatgaaa 2160caccagttgg cacataaact cgggcttcat cctcgtcaag tggcgatatg gttccagaac 2220aaacgcgcgc gatcaaagtc gaggcagatt gagcaagagt ataacgcgct aaagcataac 2280tacgagacgc ttgcgtctaa atccgagtct ctaaagaaag agaatcaggc cctactcaat 2340caattggagg tgctgagaaa tgtagccgaa aagcatcaag agaaaactag tagtagtggc 2400agcggtgaag aatcggatga tcggtttacg aactctccgg acgttatgtt tggtcaagaa 2460atgaatgttc cgttttgcga cggttttgcg taccttgaag aaggaaacag tttgttggag 2520attgaagaac aactgccaga ccttcaaaag tggtgggagt tctaagagct cgaatttccc 2580cgatcgttca aacatttggc aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc 2640gatgattatc atataatttc tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg 2700catgacgtta tttatgagat gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata 2760cgcgatagaa aacaaaatat agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc 2820tatgttacta gatcggaatt cgtaatcatg gtcatagctg tttcctgtgt gaaattgtta 2880tccgctcaca attccacaca acatacgagc cggaagcata aagtgtaaag cctggggtgc 2940ctaatgagtg agctaactca cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg 3000aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg 3060tattgggcgc tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg 3120gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa 3180cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc 3240gttgctggcg tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc 3300aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag 3360ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct 3420cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta 3480ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc 3540cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc 3600agcagccact ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt 3660gaagtggtgg cctaactacg gctacactag aaggacagta tttggtatct gcgctctgct 3720gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc 3780tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca 3840agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta 3900agggattttg gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa 3960atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg 4020cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg 4080actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc 4140aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc 4200cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa 4260ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc 4320cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg 4380ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc 4440cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat 4500ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg 4560tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc 4620ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg 4680aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat 4740gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg 4800gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg 4860ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct 4920catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac 4980atttccccga aaagtgccac ctgacgtcta agaaaccatt attatcatga cattaaccta 5040taaaaatagg cgtatcacga ggccctttcg tctcgcgcgt ttcggtgatg acggtgaaaa 5100cctctgacac atgcagctcc cggagacggt cacagcttgt ctgtaagcgg atgccgggag 5160cagacaagcc cgtcagggcg cgtcagcggg tgttggcggg tgtcggggct ggcttaacta 5220tgcggcatca gagcagattg tactgagagt gcaccatatg cggtgtgaaa taccgcacag 5280atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg ccattcgcca ttcaggctgc gcaactgttg 5340ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct attacgccag ctggcgaaag ggggatgtgc 5400tgcaaggcga ttaagttggg taacgccagg gttttcccag tcacgacgtt gtaaaacgac 5460ggccagtgcc 5470<210> 4<211> 5496<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> pIND4+BAR<400> 4aagcttgcat gcctgcagtg cagcgtgacc cggtcgtgcc cctctctaga gataatgagc 60attgcatgtc taagttataa aaaattacca catatttttt ttgtcacact tgtttgaagt 120gcagtttatc tatctttata catatattta aactttactc tacgaataat ataatctata 180gtactacaat aatatcagtg ttttagagaa tcatataaat gaacagttag acatggtcta 240aaggacaatt gagtattttg acaacaggac tctacagttt tatcttttta gtgtgcatgt 300gttctccttt ttttttgcaa atagcttcac ctatataata cttcatccat tttattagta 360catccattta gggtttaggg ttaatggttt ttatagacta atttttttag tacatctatt 420ttattctatt ttagcctcta aattaagaaa actaaaactc tattttagtt tttttattta 480ataatttaga tataaaatag aataaaataa agtgactaaa aattaaacaa atacccttta 540agaaattaaa aaaactaagg aaacattttt cttgtttcga gtagataatg ccagcctgtt 600aaacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 660aagcgaagca gacggcacgg catctctgtc gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 720ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 780gtgagccggc acggcaggcg gcctcctcct cctctcacgg caccggcagc tacgggggat 840tcctttccca ccgctccttc gctttccctt cctcgcccgc cgtaataaat agacaccccc 900tccacaccct ctttccccaa cctcgtgttg ttcggagcgc acacacacac aaccagatct 960cccccaaatc cacccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg ccgctcgtcc tccccccccc 1020cccctctcta ccttctctag atcggcgttc cggtccatgg ttagggcccg gtagttctac 1080ttctgttcat gtttgtgtta gatccgtgtt tgtgttagat ccgtgctgct agcgttcgta 1140cacggatgcg acctgtacgt cagacacgtt ctgattgcta acttgccagt gtttctcttt 1200ggggaatcct gggatggctc tagccgttcc gcagacggga tcgatttcat gatttttttt 1260gtttcgttgc atagggtttg gtttgccctt ttcctttatt tcaatatatg ccgtgcactt 1320gtttgtcggg tcatcttttc atgctttttt ttgtcttggt tgtgatgatg tggtctggtt 1380gggcggtcgt tctagatcgg agtagaattc tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat 1440tttggatctg tatgtgtgtg ccatacatat tcatagttac gaattgaaga tgatggatgg 1500aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag 1560atgctttttg ttcgcttggt tgtgatgatg tggtgtggtt gggcggtcgt tcattcgttc 1620tagatcggag tagaatactg tttcaaacta cctggtgtat ttattaattt tggaactgta 1680tgtgtgtgtc atacatcttc atagttacga gtttaagatg gatggaaata tcgatctagg 1740ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcagcat 1800ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920tagccctgcc ttcatacgct atttatttgc ttggtactgt ttcttttgtc gatgctcacc 1980ctgttgtttg gtgttacttc tgcaggtcga ctctagagga tccatcgatt aggaagtaac 2040catgagccca gaacgacgcc cggccgacat ccgccgtgcc accgaggcgg acatgccggc 2100ggtctgcacc atcgtcaacc actacatcga gacaagcacg gtcaacttcc gtaccgagcc 2160gcaggaaccg caggagtgga cggacgacct cgtccgtctg cgggagcgct atccctggct 2220cgtcgccgag gtggacggcg aggtcgccgg catcgcctac gcgggcccct ggaaggcacg 2280caacgcctac gactggacgg ccgagtcgac cgtgtacgtc tccccccgcc accagcggac 2340gggactgggc tccacgctct acacccacct gctgaagtcc ctggaggcac agggcttcaa 2400gagcgtggtc gctgtcatcg ggctgcccaa cgacccgagc gtgcgcatgc acgaggcgct 2460cggatatgcc ccccgcggca tgctgcgggc ggccggcttc aagcacggga actggcatga 2520cgtgggtttc tggcagctgg acttcagcct gccggtaccg ccccgtccgg tcctgcccgt 2580caccgagatc tgatccgtcg acctgcagat cgttcaaaca tttggcaata aagtttctta 2640agattgaatc ctgttgccgg tcttgcgatg attatcatat aatttctgtt gaattacgtt 2700aagcatgtaa taattaacat gtaatgcatg acgttattta tgagatgggt ttttatgatt 2760agagtcccgc aattatacat ttaatacgcg atagaaaaca aaatatagcg cgcaaactag 2820gataaattat cgcgcgcggt gtcatctatg ttactagatc ggaattcgta atcatggtca 2880tagctgtttc ctgtgtgaaa ttgttatccg ctcacaattc cacacaacat acgagccgga 2940agcataaagt gtaaagcctg gggtgcctaa tgagtgagct aactcacatt aattgcgttg 3000cgctcactgc ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc agctgcatta atgaatcggc 3060caacgcgcgg ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgctctt ccgcttcctc gctcactgac 3120tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa ggcggtaata 3180cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa aggccagcaa 3240aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct ccgcccccct 3300gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac aggactataa 3360agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc gaccctgccg 3420cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc tcatagctca 3480cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg tgtgcacgaa 3540ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga gtccaacccg 3600gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta acaggattag cagagcgagg 3660tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta actacggcta cactagaagg 3720acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag agttggtagc 3780tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg caagcagcag 3840attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac 3900gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca tgagattatc aaaaaggatc 3960ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag tatatatgag 4020taaacttggt ctgacagtta ccaatgctta atcagtgagg cacctatctc agcgatctgt 4080ctatttcgtt catccatagt tgcctgactc cccgtcgtgt agataactac gatacgggag 4140ggcttaccat ctggccccag tgctgcaatg ataccgcgag acccacgctc accggctcca 4200gatttatcag caataaacca gccagccgga agggccgagc gcagaagtgg tcctgcaact 4260ttatccgcct ccatccagtc tattaattgt tgccgggaag ctagagtaag tagttcgcca 4320gttaatagtt tgcgcaacgt tgttgccatt gctacaggca tcgtggtgtc acgctcgtcg 4380tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc caacgatcaa ggcgagttac atgatccccc 4440atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc ggtcctccga tcgttgtcag aagtaagttg 4500gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca gcactgcata attctcttac tgtcatgcca 4560tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag tactcaacca agtcattctg agaatagtgt 4620atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg tcaatacggg ataataccgc gccacatagc 4680agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa cgttcttcgg ggcgaaaact ctcaaggatc 4740ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa cccactcgtg cacccaactg atcttcagca 4800tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga gcaaaaacag gaaggcaaaa tgccgcaaaa 4860aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga atactcatac tcttcctttt tcaatattat 4920tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 4980aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 5040accattatta tcatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 5100gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 5160gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 5220ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 5280catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 5340tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 5400cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 5460tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgcc 5496<210> 5<211> 47611<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Довга вставка з фланкувальними ділянками<400> 5taatggtgag tgtatgcgct tgcgtctgta ttgtgtttaa aaaactcatt ctaagaaact 60cgtcatacag tgtccaccgt caaggagcca tctagtaggg tgtggatggg catgtgacag 120gaaccttgtc gtgtgcacgt tgtatgtcgg tcttgttcaa tatgtcgtct gtttcctcgg 180cttacatgct cttttacgtg tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc 240agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg 300acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag 360ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg 420gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg 480acattaacct ataaaaatag gcgtatcacg aggccctttc gtctcgcgcg tttcggtgat 540gacggtgaaa acctctgaca catgcagctc ccggagacgg tcacagcttg tctgtaagcg 600gatgccggga gcagacaagc ccgtcagggc gcgtcagcgg gtgttggcgg gtgtcggggc 660tggcttaact atgcggcatc agagcagatt gtactgagag tgcaccatat gcggtgtgaa 720ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc gccattcgcc attcaggctg 780cgcaactgtt gggaagggcg atcggtgcgg gcctcttcgc tattacgcca gctggcgaaa 840gggggatgtg ctgcaaggcg attaagttgg gtaacgccag ggttttccca gtcacgacgt 900tgtaaaacga cggccagtgc caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc 960ccctctctag agataatgag cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt 1020tttgtcacac ttgtttgaag tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact 1080ctacgaataa tataatctat agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa 1140tgaacagtta gacatggtct aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt 1200ttatcttttt agtgtgcatg tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat 1260acttcatcca ttttattagt acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact 1320aattttttta gtacatctat tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact 1380ctattttagt ttttttattt aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa 1440aaattaaaca aatacccttt aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg 1500agtagataat gccagcctgt taaacgccgt cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa 1560ccagcagcgt cgcgtcgggc caagcgaagc agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct 1620ggacccctct cgagagttcc gctccaccgt tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa 1680ttgcgtggcg gagcggcaga cgtgagccgg cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg 1740gcaccggcag ctacggggga ttcctttccc accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg 1800ccgtaataaa tagacacccc ctccacaccc tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg 1860cacacacaca caaccagatc tcccccaaat ccacccgtcg gcgtacgccg ctcgtcctcc 1920cccccccccc ctctctacct tctctagatc ggcgttccgg tccatggtta gggcccggta 1980gttctacttc tgttcatgtt tgtgttagat ccgtgtttgt gttagatccg tgctgctagc 2040gttcgtacac ggatgcgacc tgtacgtcag acacgtaacg tccggagagt tcgtaaaccg 2100atcatccgat tcttcaccgc tgccactact actagttttc tcttgatgct tttcggctac 2160atttctcagc acctccaatt gattgagtag ggcctgattc tctttcttta gagactcgga 2220tttagacgca agcgtctcgt agttatgctt tagcgcgtta tactcttgct caatctgcct 2280cgactttgat cgcgcgcgtt tgttctggaa ccatatcgcc acttgacgag gatgaagccc 2340gagtttatgt gccaactggt gtttcatcct taactcgggt ctcgactgtg tctcaaacat 2400gtactctagg aaacttattt gtttgtcggt aaatcgtctc cgcccctcgt ttcggttctt 2460cctggtggtt gttacttgtt gaagagacat ggatccgggt gtgatcctct atagtcgacc 2520tgcagaagta acaccaaaca acagggtgag catcgacaaa agaaacagta ccaagcaaat 2580aaatagcgta tgaaggcagg gctaaaaaaa tccacatata gctgctgcat atgccatcat 2640ccaagtatat caagatcaaa ataattataa aacatacttg tttattataa tagataggta 2700ctcaaggtta gagcatatga atagatgctg catatgccat catgtatatg catcagtaaa 2760acccacatca acatgtatac ctatcctaga tcgatatttc catccatctt aaactcgtaa 2820ctatgaagat gtatgacaca cacatacagt tccaaaatta ataaatacac caggtagttt 2880gaaacagtat tctactccga tctagaacga atgaacgacc gcccaaccac accacatcat 2940cacaaccaag cgaacaaaaa gcatctctgt atatgcatca gtaaaacccg catcaacatg 3000tatacctatc ctagatcgat atttccatcc atcatcttca attcgtaact atgaatatgt 3060atggcacaca catacagatc caaaattaat aaatccacca ggtagtttga aacagaattg 3120gaattcgtaa tcatggtcat agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc 3180acacaacata cgagccggaa gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta 3240actcacatta attgcgttgc gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca 3300gctgcattaa tgaatcggcc aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc 3360cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc 3420tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat 3480gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt 3540ccataggctc cgcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg 3600aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc 3660tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt 3720ggcgctttct catagctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa 3780gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta 3840tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa 3900caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa 3960ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt 4020cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt 4080ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat 4140cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat 4200gagattatca aaaaggatct tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc 4260aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagtttt caaatatgta tccgctcatg 4320agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa 4380catttccgtg tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac 4440ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac 4500atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt 4560ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc 4620gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca 4680ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc 4740ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag 4800gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa 4860ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg 4920gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa 4980ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg 5040gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt 5100gcagcactgg ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt 5160caggcaacta tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag 5220cattggtaaa actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc 5280atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc 5340cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaagatcg ttcaaacatt 5400tggcaataaa gtttcttaag attgaatcct gttgccggtc ttgcgatgat tatcatataa 5460tttctgttga attacgttaa gcatgtaata attaacatgt aatgcatgac gttatttatg 5520agatgggttt ttatgattag agtcccgcaa ttatacattt aatacgcgat agaaaacaaa 5580atatagcgcg caaactagga taaattatcg cgcgcggtgt catctatgtt actagatcgg 5640atccatgagc ccagaacgac gcccggccga catccgccgt gccaccgagg cggacatgcc 5700ggcggtctgc accatcgtca accactacat cgagacaagc acggtcaact tccgtaccga 5760gccgcaggaa ccgcaggagt ggacggacga cctcgtccgt ctgcgggagc gctatccctg 5820gctcgtcgcc gaggtggacg gcgaggtcgc cggcatcgcc tacgcgggcc cctggaaggc 5880acgcaacgcc tacgactgga cggccgagtc gaccgtgtac gtctcccccc gccaccagcg 5940gacgggactg ggctccacgc tctacaccca cctgctgaag tccctggagg cacagggctt 6000caagagcgtg gtcgctgtca tcgggctgcc caacgacccg agcgtgcgca tgcacgaggc 6060gctcggatat gccccccgcg gcatgctgcg ggcggccggc ttcaagcacg ggaactggca 6120tgacgtgggt ttctggcagc tggacttcag cctgccggta ccgccccgtc cggtcctgcc 6180cgtcaccgag atcgatcgtt caaacatttg gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt 6240tgccggtctt gcgatgatta tcatataatt tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat 6300taacatgtaa tgcatgacgt tatttatgag atgggttttt atgattagag tcccgcaatt 6360atacatttaa tacgcgatag aaaacaaaat atagcgcgca aactaggata aattatcgcg 6420cgcggtgtca tctatgttac tagatcggaa ttcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt 6480gtgaaattgt tatccgctca caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa 6540agcctggggt gcctaatgag tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc 6600tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag 6660aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt 6720cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga 6780atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg 6840taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa 6900aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt 6960tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct 7020gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct 7080cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc 7140cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt 7200atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc 7260tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact agaaggacag tatttggtat 7320ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa 7380acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa 7440aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga 7500aaactcacgt taagggattt tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct 7560tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga 7620cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc 7680catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg 7740ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat 7800aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat 7860ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg 7920caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc 7980attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa 8040agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc 8100actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt 8160ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag 8220ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt 8280gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag 8340atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac 8400cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc 8460gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca 8520gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg 8580ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat 8640gacattaacc tataaaaata ggcgtatcac gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga 8700tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc 8760ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg 8820ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga 8880aataccgcac agatgcgtaa ggagaaaata ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct 8940gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa 9000agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg 9060ttgtaaaacg acggccagtg caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc 9120ccctctctag agataatgag cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt 9180tttgtcacac ttgtttgaag tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact 9240ctacgaataa tataatctat agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa 9300tgaacagtta gacatggtct aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt 9360ttatcttttt agtgtgcatg tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat 9420acttcatcca ttttattagt acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact 9480aattttttta gtacatctat tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact 9540ctattttagt ttttttattt aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa 9600aaattaaaca aatacccttt aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg 9660agtagataat gccagcctgt taaacgccgt cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa 9720ccagcagcgt cgcgtcgggc caagcgaagc agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct 9780ggacccctct cgagagttcc gctccaccgt tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa 9840ttgcgtggcg gagcggcaga cgtgagccgg cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg 9900gcaccggcag ctacggggga ttcctttccc accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg 9960ccgtaataaa tagacacccc ctccacaccc tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg 10020cacacacaca caaccagatc tcccccaaat ccacccgtcg gcacctccgc ttcaaggtac 10080gccgctcgtc ctcccccccc ccccctctct accttctcta gatcggcgtt ccggtccatg 10140gttagggccc ggtagttcta cttctgttca tgtttgtgtt agatccgtgt ttgtgttaga 10200tccgtgctgc tagcgttcgt acacggatgc gacctgtacg tcagacacgt tctgattgct 10260aacttgccag tgtttctctt tggggaatcc tgggatggct ctagccgttc cgcagacggg 10320atcgatttca tgattttttt tgtttcgttg catagggttt ggtttgccct tttcctttat 10380ttcaatatat gccgtgcact tgtttgtcgg gtcatctttt catgcttttt tttgtcttgg 10440ttgtgatgat gtggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaatt ctgtttcaaa 10500ctacctggtg gatttattaa ttttggatct gtatgtgtgt gccatacata ttcatagtta 10560cgaattgaag atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt 10620tttactgatg catatacaga gatgcttttt gttcgcttgg ttgtgatgat gtggtgtggt 10680tgggcggtcg ttcattcgtt ctagatcgga gtagaatact gtttcaaact acctggtgta 10740tttattaatt ttggaactgt atgtgtgtgt catacatctt catagttacg agtttaagat 10800ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg tgggttttac tgatgcatat 10860acatgatggc atatgcagca tctattcata tgctctaacc ttgagtacct atctattata 10920ataaacaagt atgttttata attattttga tcttgatata cttggatgat ggcatatgca 10980gcagctatat gtggattttt ttagccctgc cttcatacgc tatttatttg cttggtactg 11040tttcttttgt cgatgctcac cctgttgttt ggtgttactt ctgcagggat ccatgagccc 11100agaacgacgc ccggccgaca tccgccgtgc caccgaggcg gacatgccgg cggtctgcac 11160catcgtcaac cactacatcg agacaagcac ggtcaacttc cgtaccgagc cgcaggaacc 11220gcaggagtgg acggacgacc tcgtccgtct gcgggagcgc tatccctggc tcgtcgccga 11280ggtggacggc gaggtcgccg gcatcgccta cgcgggcccc tggaaggcac gcaacgccta 11340cgactggacg gccgagtcga ccgtgtacgt ctccccccgc caccagcgga cgggactggg 11400ctccacgctc tacacccacc tgctgaagtc cctggaggca cagggcttca agagcgtggt 11460cgctgtcatc gggctgccca acgacccgag cgtgcgcatg cacgaggcgc tcggatatgc 11520cccccgcggc atgctgcggg cggccggctt caagcacggg aactggcatg acgtgggttt 11580ctggcagctg gacttcagcc tgccggtacc gccccgtccg gtcctgcccg tcaccgagat 11640cgatcgttca aacatttggc aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc 11700gatgattatc atataatttc tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg 11760catgacgtta tttatgagat gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata 11820cgcgatagaa aacaaaatat agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc 11880tatgttacta gatctgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca 11940ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa 12000gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca 12060ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt 12120tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt 12180tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg 12240ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga 12300tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc 12360agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg 12420acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag 12480ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg 12540gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg 12600acattaacct ataaaaatag gcgtatcacg aggccctttc gtctcgcgcg tttcggtgat 12660gacggtgaaa acctctgaca catgcagctc ccggagacgg tcacagcttg tctgtaagcg 12720gatgccggga gcagacaagc ccgtcagggc gcgtcagcgg gtgttggcgg gtgtcggggc 12780tggcttaact atgcggcatc agagcagatt gtactgagag tgcaccatat gcggtgtgaa 12840ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc gccattcgcc attcaggctg 12900cgcaactgtt gggaagggcg atcggtgcgg gcctcttcgc tattacgcca gctggcgaaa 12960gggggatgtg ctgcaaggcg attaagttgg gtaacgccag ggttttccca gtcacgacgt 13020tgtaaaacga cggccagtgc caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc 13080ccctctctag agataatgag cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt 13140tttgtcacac ttgtttgaag tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact 13200ctacgaataa tataatctat agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa 13260tgaacagtta gacatggtct aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt 13320ttatcttttt agtgtgcatg tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat 13380acttcatcca ttttattagt acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact 13440aattttttta gtacatctat tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact 13500ctattttagt ttttttattt aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa 13560aaattaaaca aatacccttt aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg 13620agtagataat gccagcctgt taaacgccgt ttgttgaata gaatacaaac cctagaaaaa 13680caaggcacat ctcggcgccg ccaatagaag gcagaaaccc tagccgtcat ttttcttgaa 13740gaatatagag cgacgtcgat aggaagatac ttaaatgttg aatccaagca cctagaataa 13800tgagttagat tagaagaaaa ctatcaactt cgaaatcaag aagaaatgtt ttattctgtt 13860gcataaaact ttcgcgtgga gaagctctgt tcagagcccg ggtagccact gggcacgtct 13920cctagatact ggactcatcg gacgctctcc tcgagccatt aatatggtcc gtcctgtaga 13980aaccccaacc cgtgaaatca aaaaactcga cggcctgtgg gcattcagtc tggatcgcga 14040aaactgtgga attgatcagc gttggtggga aagcgcgtta caagaaagcc gggcaattgc 14100tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc 14160gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc 14220aagctcggca tccggtcagt ggcagtgaag ggcgaacagt tcctgattaa ccacaaaccg 14280ttctacttta ctggctttgg tcgtcatgaa gatgcggact tgcgtggcaa aggattcgat 14340aacgtgctga tggtgcacga ccacgcattg atggactgga ttggggccaa ctcctaccgt 14400acctcgcatt acccttacgc tgaagagatg ctcgactggg cagatgaaca tggcatcgtg 14460gtgattgatg aaactgctgc tgtcggcttt aacctctctt taggcattgg tttcgaagcg 14520ggcaacaagc cgaaagaact gtacagcgaa gaggcagtca acggggaaac tcagcaagcg 14580cacttacagg cgattaaaga gctgatagcg cgtgacaaaa accacccaag cgtggtgatg 14640tggagtattg ccaacgaacc ggatacccgt ccgcaaggtg cacgggaata tttcgcgcca 14700ctggcggaag caacgcgtaa actcgacccg acgcgtccga tcacctgcgt caatgtaatg 14760ttctgcgacg ctcacaccga taccatcagc gatctctttg atgtgctgtg cctgaaccgt 14820tattacggat ggtatgtcca aagcggcgat ttggaaacgg cagagaaggt actggaaaaa 14880gaacttctgg cctggcagga gaaactgcat cagccgatta tcatcaccga atacggcgtg 14940gatacgttag ccgggctgca ctcaatgtac accgacatgt ggagtgaaga gtatcagtgt 15000gcatggctgg atatgtatca ccgcgtcttt gatcgcgtca gcgccgtcgt cggtgaacag 15060gtatggaatt tcgccgattt tgcgacctcg caaggcatat tgcgcgttgg cggtaacaag 15120aaagggatct tcactcgcga ccgcaaaccg aagtcggcgg ctcgctcagt gtgtgtgact 15180ctgctggtgc tggggaatgg agctcggggc accgtatttg tagcgcgcgc gccgctgtac 15240gtggcgccct ggcgcggcta cgtggagggg agctgcgtgc cagaggggag gcgggccgcc 15300acgtcgcacg gccgtgctta tcgggccatc ggcgaggtgc gtgccagctt gggcgtcgcg 15360tgtcgtggag cgctcctgct cgcggcggag ctggttgagt ggattgcgat gcggtgcttg 15420gtacagagct cgatggacaa ctcgaggaga gcgtccgatg agtccagtat ctaggagacg 15480tgcccagtgg ctacccgggc tctgaacaga gcttctccac gcgaaagttt tatgcaacag 15540aataaaacat ttcttcttga tttcgaagtt gatagttttc ttctaatcta actcattatt 15600ctaggtgctt ggattcaaca tttaagtatc ttcctatcga cgtcgctcta tattcttcaa 15660gaaaaatgac ggctagggtt tctgccttct attggtcatt acgcgcagaa aaaaaggatc 15720tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg 15780ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc acctagatcc ttttaaatta 15840aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa acttggtctg acagttttac 15900caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt 15960gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt 16020gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag 16080ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct 16140attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt 16200gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc 16260tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt 16320agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg 16380gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg 16440actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct 16500tgcccggcgt caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc 16560attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt 16620tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt 16680tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg 16740aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat 16800tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg 16860cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgac gtctaagaaa ccattattat catgacatta 16920acctataaaa ataggcgtat cacgaggccc tttcgtctcg cgcgtttcgg tgatgacggt 16980gaaaacctct gacacatgca gctcccggag acggtcacag cttgtctgta agcggatgcc 17040gggagcagac aagcccgtca gggcgcgtca gcgggtgttg gcgggtgtcg gggctggctt 17100aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg tgaaataccg 17160cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgccatt cgccattcag gctgcgcaac 17220tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac gccagctggc gaaaggggga 17280tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg acgttgtaaa 17340acgacggcca gtgccaagct tgcatgcctg cagtgcagcg tgacccggtc gtgcccctct 17400ctagagataa tgagcattgc atgtctaagt tataaaaaat taccacatat tttttttgtc 17460acacttgttt gaagtgcagt ttatctatct ttatacatat atttaaactt tactctacga 17520ataatataat ctatagtact acaatgtacg ccgctcgtcc tccccccccc cccctctcta 17580ccttctctag atcggcgttc cggtccatgg ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat 17640gtttgtgtta gatccgtgtt tgtgttagat ccgtgctgct agcgttcgta cacggatgcg 17700acctgtacgt cagacacgtt ctgattgcta acttgccagt gtttctcttt ggggaatcct 17760gggatggctc tagccgttcc gcagacggga tcgatttcat gatttttttt gtttcgttgc 17820atagggtttg gtttgccctt ttcctttatt tcaatatatg ccgtgcactt gtttgtcggg 17880tcatcttttc atgctttttt ttgtcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 17940tctagatcgg agtagaattc tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttggatctg 18000tatgtgtgtg ccatacatat tcatagttac gaattgaaga tgatggatgg aaatatcgat 18060ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttg 18120ttcgcttggt tgtgatgatg tggtgtggtt gggcggtcgt tcattcgttc tagatcggag 18180tagaatactg tttcaaacta cctggtgtat ttattaattt tggaactgta tgtgtgtgtc 18240atacatcttc atagttacga gtttaagatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac 18300atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcagcat ctattcatat 18360gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa ttattttgat 18420cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt tagccctgcc 18480ttcatacgct atttatttgc ttggtactgt ttcttttgtc gatgctcacc ctgttgtttg 18540gtgttacttc tgcagtcgac tcgtagagga tccatcccga ttaggaaagt agagcatgag 18600cccagaacga cgcccggccg acatccgccg tgccaccgag gcggacatgc cggcggtctg 18660caccatcgtc aaccactaca tcgagacaag cacggtcaac ttccgtaccg agccgcagga 18720accgcaggag tggacggacg acctcgtccg tctgcgggag cgctatccct ggctcgtcgc 18780cgaggtggac ggcgaggtcg ccggcatcgc ctacgcgggc ccctggaagg cacgcaacgc 18840ctacgactgg acggccgagt cgaccgtgta cgtctccccc cgccaccagc ggacgggact 18900gggctccacg ctctacaccc acctgctgaa gtccctggag gcacagggct tcaagagcgt 18960ggtcgctgtc atcgggctgc ccaacgaccc gagcgtgcgc atgcacgagg cgctcggata 19020tgccccccgc ggcatgctgc gggcggccgg cttcaagcac gggaactggc atgacgtggg 19080tttctggcag ctggacttca gcctgccggt accgccccgt ccggtcctgc ccgtcaccga 19140gatcatatga atagatgctg catatgccat catgtatatg catcagtaaa acccacatca 19200acatgtatac ctatcctaga tcgatatttc catccatctt aaactcgtaa ctatgaagat 19260gtatgacaca cacatacagt tccaaaattt ataaatacac caggtagttt gaaacagtat 19320tctactccga tctagaacga atgaacgacc gcccaaccac accacatcat cacaaccaag 19380cgaacaaaaa gcatctctgt atatgcatca gtaaaacccg catcaacatg tatacctatc 19440ctagatcgat atttccatcc atcatcttca attcgtaact atgaatatgt atggcacaca 19500catacagatc caaaattaat aaatccacca ggtagtttga aacagaattc tactccgatc 19560tagaacgacc gcccaaccag accacatcat cacaaccaag acaaaaaaaa gcatgaaaag 19620atgacccgac aaacaagtgc acggcatata ttgaaataaa ggaaaagggc aaaccaaacc 19680ctatgcaacg aaacaaaaaa aatcatgaaa tcgatcccgt ctgcggaacg gctagagcca 19740tcccaggatt ccccaaagag aaacactggc aagttagcaa tcagaacgtg tctgacgtac 19800aggtcgcatc cgtgtacgaa cgctagcagc acggatctaa cacaaacacg gatctaacac 19860aaacatgaac agaagtagaa ctaccgggcc ctaaccatgg accggaacgc cgatctagag 19920aaggtagaga gggggggggg gggaggacga gcggcgtacg ccgacgggtg gatttggggg 19980agatctggtt gtgtgtgtgt gcgctccgaa caacacgagg ttggggaaag agggtgtgga 20040gggggtgtct atttattacg gcgggcgagg aagggaaagc gaaggagcgg tgggaaagga 20100atcccccgta gctgccggtg ccgtgagagg aggaggaggc cgcctgccgt gccggctcac 20160gtctgccgct ccgccacgca atttctggat gccgacagcg gagcaagtcc aacggtggag 20220cggaactctc gagaggggtc cagaggcagc gacagagatg ccgtgccgtc tgcttcgctt 20280ggcccgacgc gacgctgctg gttcgctggt tggtgtccgt tagactcgtc gacggcgttt 20340aacaggctgg cattatctac tcgaaacaag aaaaatgttt ccttagtttt tttaatttct 20400taaagggtat ttgtttaatt tttagtcact ttattttatt ctattttata tctaaattat 20460taaataaaaa aactaaaata gagttttagt tttcttaatt tagaggctaa aatagaataa 20520aatagatgta ctaaaaaaat tagtctataa aaaccattaa ccctaaaccc taaatggatg 20580tactaataaa atggatgaag tattatatag gtgaagctat ttgcaaaaaa aaaggagaac 20640acatgcacac taaaaagata aaactgtaga gtcctgttgt caaaatactc aattgtcctt 20700tagaccatgt ctaactgttc atttatatga ttctctaaaa cactgatatt attgtagtac 20760tatagattat attattcgta gagtaaagtt taaatatatg tataaagata gataaactgc 20820acttcaaaca agtgtgacaa aaaaaatatg tggtaatttt ttataactta gacatgcaat 20880gctcattatc tctagagagg ggcacgaccg ggtcacgctg cactgcaggc atgcaagctt 20940gcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat 21000cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat 21060cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc 21120cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca ctctcagtac aatctgctct 21180gatgccgcat agttaagcca gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg 21240gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg 21300tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc 21360ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt 21420cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat 21480ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg 21540agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt 21600tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga 21660gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa 21720gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt 21780attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc cgcatacact attctcagaa tgacttggtt 21840gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt acggatggca tgacagtaag agaattatgc 21900agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga 21960ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat 22020cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct 22080gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta ttaactggcg aactacttac tctagcttcc 22140cggcaacaat taatagactg gatggaggcg gataaagttg caggaccact tctgcgctcg 22200gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc 22260ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg 22320acggggagtc aggcaactat ggatgaacga aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca 22380ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta 22440aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc 22500aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa 22560ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca 22620ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta 22680actggcttca gcagagcgca gataccaaat actgtccttc tagtgtagcc gtagttaggc 22740caccacttca agaactctgt agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca 22800gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta 22860ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag 22920cgaacgacct acaccgaact gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt 22980cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc 23040acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac 23100ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac 23160gccagcaacg cggccttttt acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc 23220tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat 23280accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag 23340cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcatttatg cagctggcac 23400gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caatttatgt gagttagctc 23460actcattagg caccccaggc tttacacttt atgcttccgg ctcgtatgtt aagcttgcat 23520gcctgcagtg cagcgtgacc cggtcgtgcc cctctctaga gataatgagc attgcatgtc 23580taagttataa aaaattacca catatttttt ttgtcacact tgtttgaagt gcagtttatc 23640tatctttata catatattta aactttactc tacgaataat ataatctata gtactacaat 23700aatatcagtg ttttagagaa tcatataaat gaacagttag acatggtcta aaggacaatt 23760gagtattttg acaacaggac tctacagttt tatcttttta gtgtgcatgt gttctccttt 23820ttttttgcaa atagcttcac ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta 23880gggtttaggg ttaatggttt ttatagacta atttttttag tacatctatt ttattctatt 23940ttagcctcta aattaagaaa actaaaactc tattttagtt tttttattta ataatttaga 24000tataaaatag aataaaataa agtgactaaa aattaaacaa atacccttta agaaattaaa 24060aaaactaagg aaacattttt cttgtttcga gtagataatg ccagcctgtt aaacgccgtc 24120gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc aagcgaagca 24180gacggcacgg catctctgtc gctgcctctg gacccctctc gagagttccg ctccaccgtt 24240ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac gtgagccggc 24300acggcaggcg gcctcctcct cctctcacgg caccggcagc tacgggggat tcctttccca 24360ccgctccttc gctttccctt cctcgcccgc cgtaataaat agacacccga actgtatgtg 24420tgtgtcatac atcttcatag ttacgagttt aagatggatg gaaatatcga tctaggatag 24480gtatacatgt tgatgtgggt tttactgatg catatacatg atggcatatg cagcatctat 24540tcatatgctc taaccttgag tacctatcta ttataataaa caagtatgtt ttataattat 24600tttgatcttg atatacttgg atgatggcat atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc 24660cctgccttca tacgctattt atttgcttgg tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt 24720tgtttggtgt tacttctgca gggatccatg tctcttcaac aagtaacaac caccaggaag 24780aaccgaaacg aggggcggag acgatttacc gacaaacaaa taagtttcct agagtacatg 24840tttgagacac agtcgagacc cgagttaagg atgaaacacc agttggcaca taaactcggg 24900cttcatcctc gtcaagtggc gatatggttc cagaacaaac gcgcgcgatc aaagtcgagg 24960cagattgagc aagagtataa cgcgctaaag cataactacg agacgcttgc gtctaaatcc 25020gagtctctaa agaaagagaa tcaggcccta ctcaatcaat tggaggtgct gagaaatgta 25080gccgaaaagc atcaagagaa aactagtagt agtggcagcg gtgaagaatc ggatgatcgg 25140tttacgaact ctccggacgt tatgtttggt caagaaatga atgttccgtt ttgcgacggt 25200tttgcgtacc ttgaagaagg aaacagtttg ttggagattg aagaacaact gccagacctt 25260caaaagtggt gggagttcga tcgttcaaac atttggcaat aaagtttctt aagattgaat 25320cctgttgccg gtcttgcgat gattatcata taatttctgt tgaattacgt taagcatgta 25380ataattaaca tgtaatgcat gacgttattt atgagatggg tttttatgat tagagtcccg 25440caattataca tttaatacgc gatagaaaac aaaatatagc gcgcaaacta ggataaatta 25500tcgcgcgcgg tgtcatctat gttactagat cggaattcgt aatcatggtc atagctgttt 25560cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag 25620tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg 25680cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg 25740gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc 25800tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc 25860acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg 25920aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat 25980cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag 26040gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga 26100tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg 26160tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt 26220cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac 26280gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc 26340ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt 26400ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc 26460ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc 26520agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg 26580aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag 26640atccttttaa attaaaaatg aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg 26700tctgacagtt gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga 26760caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact 26820tactctagct tcccggcaac aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc 26880acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga 26940gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt 27000agttatctac acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga 27060gatagaactg tcagaccaag tttactcata tatactttag attgatttaa aacttcattt 27120ttaatttaaa aggatctagg tgaagatcct ttttgataat ctcatgacca aaatccctta 27180acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg 27240agatcctttt tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc 27300ggtggtttgt ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag 27360cagagcgcag ataccaaata ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa 27420gaactctgta gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc 27480cagtggcgat aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc 27540gcagcggtcg ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta 27600caccgaactg agatacctac agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag 27660aaaggcggac aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct 27720tccaggggga aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga 27780gcgtcgattt ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc 27840gacgctgggc cgccttttta cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct 27900ttcctgcgtt atcccctgat tctgtggata accgtattac cgcctttgag tgagctgata 27960gtgtcacgca gatcctatga aatttggtcg atgattgtct tttatggatc cgttcagacc 28020aagtcttcgt gtgtctatgt tatcgtgcct ttaaattgaa tcctttcgat ttatgcttct 28080ttttgtcagc ggtggttgat cttctgatgt gctggttaca aagggtctta gcataacaat 28140tttccaattg tctactacaa caagttttgt ctaacttcga tgaagcctag gtgatgacga 28200tttcaacttg cttcggtgct tgtaactgtt attagatggt ctacggatct aaatgtaact 28260tctattattt gttgtgtttt ttgtattatt atgatggatg atgaatagat taaaagatcc 28320cgcaaataaa accttaaatg ataaatgtca cacgtcacgt gcatggcact ccggccctaa 28380tgccttttgt agctattcta gtaacgcaag gatagcaaat ttccgtgaca cgacgcaagt 28440ttttgttaaa aataaattaa agcaagaaaa ttgtcatact tgctaacgaa aattgccatc 28500cttgcctatt catcatccat cataataata caaaaaacac aacaaataat agaagttaca 28560tttagatccg tagaccatct aataacagtt acaagcaccg aagcaagttg gtgccgtctg 28620cttcgcttgg cccgacgcga cgctgctggt tcgctggttg gtgtccgtta gactcgtcga 28680cggcgtttaa caggctggca ttatctactc gaaacaagaa aaatgtttcc ttagtttttt 28740taatttctta aagggtattt gtttaatttt tagtcacttt attttattct attttatatc 28800taaattatta aataaaaaaa ctaaaataga gttttagttt tcttaattta gaggctaaaa 28860tagaataaaa tagatgtact aaaaactcaa ttgtccttta gaccatgtct aactgttcat 28920ttatatgatt ctctaaggca ctggccgtcg ttttacaacg tcgtgactgg gaaaaccctg 28980gcgttaccca acttaatcgc cttgcagcac atcccccttt cgccagctgg cgtaatagcg 29040aagaggcccg caccgatcgc ccttcccaac agttgcgcag cctgaatggc gaatggcgcc 29100tgatgcggta ttttctcctt acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata tggtgcactc 29160tcagtacaat ctgctctgat gccgcatagt taagccagcc ccgacacccg ccaacacccg 29220ctgacgcgcc ctgacgggct tgtctgctcc cggcatccgc ttacagacaa gctgtgaccg 29280tctccgggag ctgcatgtgt cagaggtttt caccgtcatc accgaaacgc gcgagacgaa 29340agggcctcgt gatacgccta tttttatagg ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga 29400cgtcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa 29460tacattacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat 29520ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg 29580gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa 29640taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca 29700tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc 29760gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt 29820cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa 29880aagcggttag ctccttcggt cctccgaata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc 29940tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat 30000ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca 30060gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga 30120cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg 30180gttattgtct catgagcgga tacatatttg aagatctcgg tgacgggcag gaccggacgg 30240ggcggtaccg gcaggctgaa gtccagctgc cagaaaccca cgtcatgcca gttcccgtgc 30300ttgaagccgg ccgcccgcag catgccgcgg ggggcatatc cgagcgcctc gtgcatgcgc 30360acgctcgggt cgttgggcag cccgatgaca gcgaccacgc tcttgaagcc ctgtgcctcc 30420agggacttca gcaggtgggt gtagagcgtg gagcccagtc ccgtccgctg gtggcggggg 30480gagacgtaca cggtcgactc ggccgtccag tcgtaggcgt tgcgtgcctt ccaggggccc 30540gcgtaggcga tgccggcgac ctcgccgtat ggatgaagta ttatataggt gaagctattt 30600gcaaaaaaaa aggagaacac atgcacacta aaaagataaa actgtagagt cctgttgtca 30660aaatactcaa ttgtccttta gaccatgtct aactgttcat ttatatgatt ctctaaaaca 30720ctgatattat tgtagtacta tagattatat tattcgtaga gtaaagttta aatatatgta 30780taaagataga taaactgcac ttcaaacaag tgtgacaaaa aaaatatgtg gtaatttttt 30840ataacttaga catgcaatgc tcattatctc tagagagggg cacgaccggg tcacgctgca 30900ctgcaggcat gcaagcttct gcagaagtaa caccaaacaa cagggtgagc atcgacaaaa 30960gaaacagtac caagcaaata aatagcgtat gaaggcaggg ctaaaaaaat ccacatatag 31020ctgctgcata tgccatcatc caagtatatc aagatcaaaa taattataaa acatacttgt 31080ttattataat agataggtac tcaaggttag agcatatgaa tagatgctgc atatgccatc 31140atgtatatgc atcagtaaaa cccacatcaa catgtatacc tatcctagat cgatatttcc 31200atccatctta aactcgtaac tatgaagatg tatgacacac acatacagtt ccaaaattaa 31260taaatacacc aggtagtttg aaacagtatt ctactccgat ctagaacgaa tgaacgaccg 31320cccaaccaca ccacatcatc acaaccaagc gaacaaaaag catctctgta tatgcatcag 31380taaaacccgc atcaacatgt atacctatcc tagatcgata tttccatcca tcatcttcaa 31440ttcgtaacta tgaatatgta tggcacacac atacagatcc aaaattaata aatccaccag 31500gtagtttgaa acagaattct actccgatct agaacgaccg cccaaccaga ccacatcatc 31560acaaccaaga caaaaaaaag catgaaaaga tgacccgaca aacaagtgca cggcatatat 31620tgaaataaag gaaaagggca aaccaaaccc tatgcaacga aacaaaaaaa atcatgaaat 31680cgatcccgtc tgcggaacgg ctagagccat cccaggattc cccaaagaga aacactggca 31740agttagcaat cagaacgtgt ctgacgtaca ggtcgcatcc gtgtacgaac gctagcagca 31800cggatctaac acaaacacgg atctaacaca aacatgaaca gaagtagaac taccgggccc 31860taaccatgga ccggaacgcc gatctagaga aggtagagag gggggggggg ggaggacgag 31920cggcgtacct tgaagcggag gtgccgacgg gtggatttgg gggagatctg gttgtgtgtg 31980tgtgcgctcc gaacaacacg aggttgggga aagagggtgt ggagggggtg tctatttatt 32040acggcgggcg aggaagggaa agcgaaggag cggtgggaaa ggaatccccc gtagctgccg 32100gtgccgtgag aggaggagga ggccgcctgc cgtgccggct cacgtctgcc gctccgccac 32160gcaatttctg gatgccgaca gcggagcaag tccaacggtg gagcggaact ctcgagaggg 32220gtccagaggc agcgacagag atgccgtgcc gtctgcttcg cttggcccga cgcgacgctg 32280ctggttcgct ggttggtgtc cgttagactc gtcgacggcg tttaacaggc tggcattatc 32340tactcgaaac aagaaaaatg tttccttagt ttttttaatt tcttaaaggg tatttgttta 32400atttttagtc actttatttt attctatttt atatctaaat tattaaataa aaaaactaaa 32460atagagtttt agttttctta atttagaggc taaaatagaa taaaatagat gtactaaaaa 32520aattagtcta taaaaaccat taaccctaaa ccctaaatgg atgtactaat aaaatggatg 32580aagtattata taggtgaagc tatttgcaaa aaaaaaggag aacacatgca cactaaaaag 32640ataaaactgt agagtcctgt tgtcaaaata ctcaattgtc ctttagacca tgtctaactg 32700ttcatttata tgattctcta aaacactgat attattgtag tactatagat tatattattc 32760gtagagtaaa gtttaaatat atgtataaag atagataaac tgcacttcaa acaagtgtga 32820caaaaaaaat atgtggtaat tttttataac ttagacatgc aatgctcatt atctctagag 32880aggggcacga ccgggtcacg ctgcactgca ggcatgcaag cttgcactgg ccgtcgtttt 32940acaacgtcgt gactgggaaa accctggcgt tacccaactt aatcgccttg cagcacatcc 33000ccctttcgcc agctggcgta atagcgaaga ggcccgcacc gatcgccctt cccaacagtt 33060gcgcagcctg aatggcgaat ggcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg 33120tatttcacac cgcatatggt gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag 33180ccagccccga cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga cgggcttgtc tgctcccggc 33240atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc atgtgtcaga ggttttcacc 33300gtcatcaccg aaacgcgcga gacgaaaggg cctcgtgata cgcctatttt tataggttaa 33360tgtcatgata ataatggttt cttagacgtc aggtggcact tttcggggaa atgtgcgcgg 33420aacccctatt tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata 33480accctgataa atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg 33540tgtcgccctt attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac 33600gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt acatcgaact 33660ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt ttccaatgat 33720gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg ccgggcaaga 33780gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact caccagtcac 33840agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg ccataaccat 33900gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga aggagctaac 33960cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg aaccggagct 34020gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac 34080gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga 34140ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg 34200gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact 34260ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac 34320tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta 34380actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt 34440taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga 34500gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc 34560tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt 34620ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc 34680gcagatacca aatactgtcc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc 34740tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg 34800cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg 34860gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga 34920actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc 34980ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg 35040gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg 35100atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt 35160tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacatg ttctttcctg cgttatcccc 35220tgattctgtg gataaccgta ttaccgcctt tgagtgagct gataccgctc gccgcagccg 35280aacgaccgag cgcagcgagt cagtgagcga ggaagcggaa gagcgcccaa tacgcaaacc 35340gcctctcccc gcgcgttggc cgattcatta atgcagctgg cacgacaggt ttcccgactg 35400gaaagcgggc agtgagcgca acgcaattaa tgtgagttag ctcactcatt aggcacccca 35460ggctttacac tttatgcttc cggctcgtat gttgtgtgga attgtgagcg gataacaatt 35520tcacacagga aacagctatg accatgatta cgaattccga tcgttcaaac atttggcaat 35580aaagtttctt aagattgaat cctgttgccg gtcttgcgat gattatcata taatttctgt 35640tgaattacgt taagcatgta ataattaaca tgtaatgcat gacgttattt atgagatggg 35700tttttatgat tagagtcccg caattataca tttaatacgc gatagaaaac aaaatatagc 35760gcgcaaacta ggataaatta tcgcgcgcgg tgtcatctat gttactagat cgatctcggt 35820gacgggcagg accggacggg gcggtaccgg caggctgaag tccagctgcc agaaacccac 35880gtcatgccag ttcccgtgct tgaagccggc cgcccgcagc atgccgcggg gggcatatcc 35940gagcgcctcg tgcatgcgca cgctcgggtc gttgggcagc ccgatgacag cgaccacgct 36000cttgaagccc tgtgcctcca gggacttcag caggtgggtg tagagcgtgg agcccagtcc 36060cgtccgctgg tggcgggggg agacgtacac ggtcgactcg gccgtccagt cgtaggcgtt 36120gcgtgccttc caggggcccg cgtaggcgat gccggcgacc tcgccgtcca cctcggcgac 36180gagccaggga tagcgctccc gcagacggac gaggtcgtcc gtccactcct gcggttcctg 36240cggctcggta cggaagttga ccgtgcttgt ctcgatgtag tggttgacga tggtgcagac 36300cgccggcatg tccgcctcgg tggcacggcg gatgtcggcc gggcgtcgtt ctgggctcat 36360ggatccaagc ttgcatgcct gcagtgcagc gtgacccggt cgtgcccctc tctagagata 36420atgagcattg catgtctaag ttataaaaaa ttaccacata ttttttttgt cacacttgtt 36480tgaagtgcag tttatctatc tttatacata tatttaaact ttactctacg aataatataa 36540tctatagtac tacaataata tcagtgtttt agagaatcat ataaatgaac agttagacat 36600ggtctaaagg acaattgagt attttgacaa caggactcta cagttttatc tttttagtgt 36660gcatgtgttc tccttttttt ttgcaaatag cttcacctat ataatacttc atccatttta 36720ttagtacatc catttagggt ttagggttaa tggtttttat agactaattt ttttagtaca 36780tctattttat tctattttag cctctaaatt aagaaaacta aaactctatt ttagtttttt 36840tatttaataa tttagatata aaatagaata aaataaagtg actaaaaatt aaacaaatac 36900cctttaagaa attaaaaaaa ctaaggaaac atttttcttg tttcgagtag ataatgccag 36960cctgttaaac gccgtcgacg agtctaacgg acaccaacca gcgaaccagc agcgtcgcgt 37020cgggccaagc gaagcagacg gcacggcatc tctgtcgctg cctctggacc cctctcgaga 37080gttccgctcc accgttggac ttgctccgct gtcggcatcc agaaattgcg tggcggagcg 37140gcagacgtga gccggcacgg caggcggcct cctcctcctc tcacggcacc ggcagctacg 37200ggggattcct ttcccaccgc tccttcgctt tcccttcctc gcccgccgta ataaatagac 37260accccctcca caccctcttt ccccaacctc gtgttgttcg gagcgcacac acacacaacc 37320agatctcccc caaatccacc cgtcggcacc tccgcttcaa ggtacgccgc tcgtcctccc 37380cccccccccc tctctacctt ctctagatcg gcgttccggt ccatggttag ggcccggtag 37440ttctacttct gttcatgttt gtgttagatc cgtgtttgtg ttagatccgt gctgctagcg 37500ttcgtacacg gatgcgacct gtacgtcaga cacgttctga ttgctaactt gccagtgttt 37560ctctttgggg aatcctggga tggctctagc cgttccgcag acgggatcga tttcatgatt 37620ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc tttatttcaa tatatgccgt 37680gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgc ttttttttgt cttggttgtg atgatgtggt 37740ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaattctgtt tcaaactacc tggtggattt 37800attaattttg gatctgtatg tgtgtgccat acatattcat agttacgaat tgaagatgat 37860ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 37920acagagatgc tttttgttcg cttggttgtg atgatgtggt gtggttgggc ggtcgttcat 37980tcgttctaga tcggagtaga atactgtttc aaactacctg gtgtatttat taattttgga 38040actgtatgtg tgtgtcatac atcttcatag ttacgagttt aagatggatg gaaatatcga 38100tctaggatag gtatacatgt tgatgtgggt tttactgatg catatacatg atggcatatg 38160cagcatctat tcatatgctc taaccttgag tacctatcta ttataataaa caagtatgtt 38220ttataattat tttgatcttg atatacttgg atgatggcat atgcagcagc tatatgtgga 38280tttttttagc cctgccttca tacgctattt atttgcttgg tactgtttct tttgtcgatg 38340ctcaccctgt tgtttggtgt tacttctgca gggatccatg agcccagaac gacgcccggc 38400cgacatccgc cgtgccaccg aggcggacat gccggcggtc tgcaccatcg tcaaccacta 38460catcgagaca agcacggtca acttccgtac cgagccgcag gaaccgcagg agtggacgga 38520cgacctcgtc cgtctgcggg agcgctatcc ctggctcgtc gccgaggtgg acggcgaggt 38580cgccggcatc gcctacgcgg gcccctggaa ggcacgcaac gcctacgact ggacggccga 38640gtcgaccgtg tacgtctccc cccgccacca gcggacggga ctgggctcca cgctctacac 38700ccacctgctg aagtccctgg aggcacaggg cttcaagagc gtggtcgctg tcatcgggct 38760gcccaacgac ccgagcgtgc gcatgcacga ggcgctcgga tatgcccccc gcggcatgct 38820gcgggcggcc ggcttcaagc acgggaactg gcatgacgtg ggtttctggc agctggactt 38880cagcctgccg gtaccgcccc gtccggtcct gcccgtcacc gagatctgat ccgtcgacct 38940gcagatcgtt caaacatttg gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt tgccggtctt 39000gcgatgatta tcatataatt tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat taacatgtaa 39060tgcatgacgt tatttatgag atgggttttt atgattagag tcccgcaatt atacatttaa 39120tacgcgatag aaaacaaaat atagcgcgca aactaggata aattatcgcg cgcggtgtca 39180tctatgttac tagatcggaa ttcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt 39240tatccgctca caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt 39300gcctaatgag tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg 39360ggaaacctgt cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg 39420cgtattgggc gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg 39480cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat 39540aacgcaggaa agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc 39600gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc 39660tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga 39720agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt 39780ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg 39840taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc 39900gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg 39960gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc 40020ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg 40080ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc 40140gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct 40200caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt 40260taagggattt tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa 40320aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa 40380tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc 40440tgactccccg tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct 40500gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca 40560gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt 40620aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt 40680gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc 40740ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc 40800tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt 40860atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact 40920ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc 40980ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt 41040ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg 41100atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct 41160gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa 41220tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt 41280ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc 41340acatttcccc gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc 41400tataaaaata ggcgtatcac gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa 41460aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg 41520agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac 41580tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac 41640agatgcgtaa ggagaaaata ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt 41700tgggaagggc gatcggtgcg ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt 41760gctgcaaggc gattaagttg ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg 41820acggccagtg caagcttgca tgcctgcagt gcagcgtgac ccggtcgtgc ccctctctag 41880agataatgag cattgcatgt ctaagttata aaaaattacc acatattttt tttgtcacac 41940ttgtttgaag tgcagtttat ctatctttat acatatattt aaactttact ctacgaataa 42000tataatctat agtactacaa taatatcagt gttttagaga atcatataaa tgaacagtta 42060gacatggtct aaaggacaat tgagtatttt gacaacagga ctctacagtt ttatcttttt 42120agtgtgcatg tgttctcctt tttttttgca aatagcttca cctatataat acttcatcca 42180ttttattagt acatccattt agggtttagg gttaatggtt tttatagact aattttttta 42240gtacatctat tttattctat tttagcctct aaattaagaa aactaaaact ctattttagt 42300ttttttattt aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaattaaaca 42360aatacccttt aagaaattaa aaaaactaag gaaacatttt tcttgtttcg agtagataat 42420gccagcctgt taaacgccgt cgacgagtct aacggacacc aaccagcgaa ccagcagcgt 42480cgcgtcgggc caagcgaagc agacggcacg gcatctctgt cgctgcctct ggacccctct 42540cgagagttcc gctccaccgt tggacttgct ccgctgtcgg catccagaaa ttgcgtggcg 42600gagcggcaga cgtgagccgg cacggcaggc ggcctcctcc tcctctcacg gcaccggcag 42660ctacggggga ttcctttccc accgctcctt cgctttccct tcctcgcccg ccgtaataaa 42720tagacacccc ctccacaccc tctttcccca acctcgtgtt gttcggagcg cacacacaca 42780caaccagatc tcccccaaat ccacccgtcg gcacctccgc ttcaaggtac gccgctcgtc 42840ctcccccccc ccccctctct accttctcta gatcggcgtt ccggtccatg gttagggccc 42900ggtagttcta cttctgttca tgtttgtgtt agatccgtgt ttgtgttaga tccgtgctgc 42960tagcgttcgt acacggatgc gacctgtacg tcagacacgt tctgattgct aacttgccag 43020tgtttctctt tggggaatcc tgggatggct ctagccgttc cgcagacggg atcgatttca 43080tgattttttt tgtttcgttg catagggttt ggtttgccct tttcctttat ttcaatatat 43140gccgtgcact tgtttgtcgg gtcatctttt catgcttttt tttgtcttgg ttgtgatgat 43200gtggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaatt ctgtttcaaa ctacctggtg 43260gatttattaa ttttggatct gtatgtgtgt gccatacata ttcatagtta cgaattgaag 43320atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 43380catatacaga gatgcttttt gttcgcttgg ttgtgatgat gtggtgtggt tgggcggtcg 43440ttcattcgtt ctagatcgga gtagaatact gtttcaaact acctggtgta tttattaatt 43500ttggaactgt atgtgtgtgt catacatctt catagttacg agtttaagat ggatggaaat 43560atcgatctag gataggtata catgttgatg tgggttttac tgatgcatat acatgatggc 43620atatgcagca tctattcata tgctctaacc ttgagtacct atctattata ataaacaagt 43680atgttttata attattttga tcttgatata cttggatgat ggcatatgca gcagctatat 43740gtggattttt ttagccctgc cttcatacgc tatttatttg cttggtactg tttcttttgt 43800cgatgctcac cctgttgttt ggtgttactt ctgcaggtcg actctagagg atccatcgat 43860taggaagtaa ccatgagccc agaacgacgc ccggccgaca tccgccgtgc caccgaggcg 43920gacatgccgg cggtctgcac catcgtcaac cactacatcg agacaagcac ggtcaacttc 43980cgtaccgagc cgcaggaacc gcaggagtgg acggacgacc tcgtccgtct gcgggagcgc 44040tatccctggc tcgtcgccga ggtggacggc gaggtcgccg gcatcgccta cgcgggcccc 44100tggaaggcac gcaacgccta cgactggacg gccgagtcga ccgtgtacgt ctccccccgc 44160caccagcgga cgggactggg ctccacgctc tacacccacc tgctgaagtc cctggaggca 44220cagggcttca agagcgtggt cgctgtcatc gggctgccca acgacccgag cgtgcgcatg 44280cacgaggcgc tcggatatgc cccccgcggc atgctgcggg cggccggctt caagcacggg 44340aactggcatg acgtgggttt ctggcagctg gacttcagcc tgccggtacc gccccgtccg 44400gtcctgcccg tcaccgagat ctgatccgtc gacctgcaga tcgttcaaac atttggcaat 44460aaagtttctt aagattgaat cctgttgccg gtcttgcgat gattatcata taatttctgt 44520tgaattacgt taagcatgta ataattaaca tgtaatgcat gacgttattt atgagatggg 44580tttttatgat tagagtcccg caattataca tttaatacgc gatagaaaac aaaatatagc 44640gcgcaaacta ggataaatta tcgcgcgcgg tgtcatctat gttactagat cggaattcgt 44700aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca 44760tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat 44820taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt 44880aatgaatcgg ccaacgcgcg gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct 44940cgctcactga ctcgctgcgc tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa 45000aggcggtaat acggttatcc acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa 45060aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc 45120tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga 45180caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc 45240cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt 45300ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct 45360gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg 45420agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta 45480gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct 45540acactagaag gacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa 45600gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt 45660gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta 45720cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgagattat 45780caaaaaggat cttcacctag atccttttaa attaaaaatg aagttttaaa tcaatctaaa 45840gtatatatga gtaaacttgg tctgacagtt accaatgctt aatcagtgag gcacctatct 45900cagcgatctg tctatttcgt tcatccatag ttgcctgact ccccgtcgtg tagataacta 45960cgatacggga gggcttacca tctggcccca gtgctgcaat gataccgcga gacccacgct 46020caccggctcc agatttatca gcaataaacc agccagccgg aagggccgag cgcagaagtg 46080gtcctgcaac tttatccgcc tccatccagt ctattaattg ttgccgggaa gctagagtaa 46140gtagttcgcc agttaatagt ttgcgcaacg ttgttgccat tgctacaggc atcgtggtgt 46200cacgctcgtc gtttggtatg gcttcattca gctccggttc ccaacgatca aggcgagtta 46260catgatcccc catgttgtgc aaaaaagcgg ttagctcctt cggtcctccg atcgttgtca 46320gaagtaagtt ggccgcagtg ttatcactca tggttatggc agcactgcat aattctctta 46380ctgtcatgcc atccgtaaga tgcttttctg tgactggtga gtactcaacc aagtcattct 46440gagaatagtg tatgcggcga ccgagttgct cttgcccggc gtcaatacgg gataataccg 46500cgccacatag cagaacttta aaagtgctca tcattggaaa acgttcttcg gggcgaaaac 46560tctcaaggat cttaccgctg ttgagatcca gttcgatgta acccactcgt gcacccaact 46620gatcttcagc atcttttact ttcaccagcg tttctgggtg agcaaaaaca ggaaggcaaa 46680atgccgcaaa aaagggaata agggcgacac ggaaatgttg aatactcata ctcttccttt 46740ttcaatatta ttgaagcatt tatcagggtt attgtctcat gagcggatac atatttgaat 46800gtatttagaa aaataaacaa ataggggttc cgcgcacatt tccccgaaaa gtgccacctg 46860acgtctaaga aaccattatt atcatgacat taacctataa aaataggcgt atcacgaggc 46920cctttcgtct cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg 46980agacggtcac agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt 47040cagcgggtgt tggcgggtgt cggggctggc ttaactatgc ggcatcagag cagattgtac 47100tgagagtgca ccatatgcgg tgtgaaatac cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca 47160tcaggcgcca ttcgccattc aggctgcgca actgttggga agggcgatcg gtgcgggcct 47220cttcgctatt acgccagctg gcgaaagggg gatgtgctgc aaggcgatta agttgggtaa 47280cgccagggtt ttcccagtca cgacgttgta aaacgacggc cagtgcgtcg actctagagg 47340tccctcgacc atggctgtaa ggtcgccgaa tacaagggca tgggtggcga ggcctaagag 47400gagtataatt tcttagacat ttgtcaatta taaacttctt ggtaaaagag catgtaagcc 47460gaggaaacag acgacatatt gaacaagacc gacatacaac gtgcacacga caaggttcct 47520gtcacatgcc catccacacc ctactagatg gctccttgac ggtggacact gtatgacgag 47580tttcttagaa tgagtttttt aaacacaata c 47611<210> 6<211> 20418<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Коротка вставка з фланкувальними ділянками<400> 6gagcgcgctt tcctatttag gatccaaatt ggcactgata ctaaactgct tagacgaatc 60gcctggagta aaatcaacaa gctcggtttc agcagccgac ttaaacttca tcgccgggtc 120atgctcggtg gttggcttct ttagagacgt catatccgcc aggtcaacat tattttgata 180aaaattcatc tcctctgccg cacaaacaga ctcagcataa gccgcatcgc cttcttcaca 240ttctagggct acctttcgac tcccattgag ggagtcccgg attagggggt gtttggaaca 300ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta 360ctctagcttc ccggtaacaa ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gtaggaccac 420ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggactct 480aggcttcccg ggcaacaaat taattagact ggatggaggg ataaagtttg cagaccactt 540tctgcgctcg gcccttccgc tgggctgttc tatgcccgct gaaatcacca gtctctctct 600acaaatctat ctctctctat aataatgtgt gagtagttcc cagataaggg aattagggtt 660cttatagggt ttcgctcatg tgttgagcat ataagaaacc cttagtatgt atttgtattt 720gggctggctt aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg 780tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgccatt cgccattcag 840gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac gccagctggc 900gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg 960acgttgtaaa acgacggcca gtgcaagctt gcatgcctgc agtgcagcgt gacccggtcg 1020tgcccctctc tagagataat gagcattgca tgtctaagtt ataaaaaatt accacatatt 1080ttttttgtca cacttgtttg aagtgcagtt tatctatctt tatacatata tttaaacttt 1140actctacgaa taatataatc tatagtacta caataatatc agtgttttag agaatcatat 1200aaatgaacag ttagacatgg tctaaaggac aattgagtat tttgacaaca ggactctaca 1260gttttatctt tttagtgtgc atgtgttctc cttttttttt gcaaatagct tcacctatat 1320aatacttcat ccattttatt agtacatcca tttagggttt agggttaatg gtttttatag 1380actaattttt ttagtacatc tattttattc tattttagcc tctaaattaa gaaaactaaa 1440actctatttt agttttttta tttaataatt tagatataaa atagaataaa ataaagtgac 1500taaaaattaa acaaataccc tttaagaaat taaaaaaact aaggaaacat ttttcttgtt 1560tcgagtagat aatgccagcc tgttaaacgc cgtcgacgag tctaacggac accaaccagc 1620gaaccagcag cgtcgcgtcg ggccaagcga agcagacggc acggcatctc tgtcgctgcc 1680tctggacccc tctcgagagt tccgctccac cgttggactt gctccgctgt cggcatccag 1740aaattgcgtg gcggagcggc agacgtgagc cggcacggca ggcggcctcc tcctcctctc 1800acggcaccgg cagctacggg ggattccttt cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc 1860ccgccgtaat aaatagacac cccctccaca ccctctttcc ccaacctcgt gttgttcgga 1920gcgcacacac acacaaccag atctccccca aatccacccg tcggcgtacg ccgctcgtcc 1980tccccccccc cccctctcta ccttctctag atcggcgttc cggtccatgg ttagggcccg 2040gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gatccgtgtt tgtgttagat ccgtgctgct 2100agcgttcgta cacggatgcg acctgtacgt cagacacgtt ctgattgcta acttgccagt 2160gtttctcttt ggggaatcct gggatggctc tagccgttcc gcagacggga tcgatttcat 2220gatttttttt gtttcgttgc atagggtttg gtttgccctt ttcctttatt tcaatatatg 2280ccgtgcactt gtttgtcggg tcatcttttc atgctttttt ttgtcttcct gtttttgctc 2340acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt 2400acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt 2460ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg 2520ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact 2580caccagtcac agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg 2640ccataaccat gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga 2700aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg 2760aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa 2820tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg ttattgccgg gaaaagtgta cgtatcaccg 2880tttgtgtgaa caacgaactg aactggcaga ctatcccctg cagaagtaac accaaacaac 2940agggtgagca tcgacaaaag aaacagtacc aagcaaataa atagcgtatg aaggcagggc 3000taaaaaaatc cacatatagc tgctgcatat gccatcatcc aagtatatca agatcaaaat 3060aattataaaa catacttgtt tattataata gataggtact caaggttaga gcatatgaat 3120agatgctgca tatgccatca tgtatatgca tcagtaaaac ccacatcaac atgtatacct 3180atcctagatc gatatttcca tccatcttaa actcgtaact atgaagatgt atgacacaca 3240catacagttc caaaattaat aaatacacca ggtagtttga aacagtattc tactccgatc 3300tagaacgaat gaacgaccgc ccaaccacac cacatcatca caaccaagcg aacaaaaagc 3360atctctgtat atgcatcagt aaaacccgca tcaacatgta tacctatcct agaagtacta 3420tagattatat tattcgtaga gtaaagttta aatatatgta taaagataga taaactgcac 3480ttcaaacaag tgtgacaaaa aaaatatgtg gtaatttttt ataacttaga catgcaatgc 3540tcattatctc tagagagggg cacgaccggg tcacgctgca ctgcaggcat gcaagcttgg 3600cactggccgt cgttttacaa cgtcgtgact gggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc 3660gccttgcagc acatccccct ttcgccagct ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc 3720gcccttccca acagttgcgc agcctgaatg gcgaatggcg cctgatgcgg tattttctcc 3780ttacgcatct gtgcggtatt tcacaccgca tatggtgcac tctcagtaca atctgctctg 3840atgccgcata gttaagccag ccccgacacc cgccaacacc cgctgacgcg ccctgacggg 3900cttgtctgct cccggcatcc gcttacagac aagctgtgac cgtctccggg agctgcatgt 3960gtcagaggtt ttcaccgtca tcaccgaaac gcgcgagacg aaagggcctc gtgatacgcc 4020tatttttata ggttaatgtc atgataataa tggtttctta gacgtcaggt ggcacttttc 4080ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt tatttttcta aatacattac caatgcttaa 4140tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc 4200ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga 4260taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa 4320gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt 4380gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg 4440ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc 4500aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg 4560gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag 4620cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt 4680actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt 4740caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac 4800gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac 4860ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag 4920caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa 4980tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga 5040gcggatacat atttgaaaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt 5100aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac 5160caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa 5220aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaagccaa tagaaggcag aaaccctagc 5280cgtcattttt cttgaagaat atagagcgac gtcgatagga agatacttaa atgttgaatc 5340caagcaccta gaataatgag ttagattaga agaaaactat caacttcgaa atcaagaaga 5400aatgttttat tctgttgcat aaaactttcg cgtggagaag ctctgttcag agcccgggta 5460gccactgggc acgtctccta gatactggac tcatcggacg ctctcctcga gttgtccatc 5520gagctctgta ccaagcaccg catcgcaatc cactcaacca gctccgccgc gagcaggagc 5580gctccacgac acgcgacgcc caagctggca cgcacctcgc cgatggcccg ataagcacgg 5640ccgtgcgacg tggcggcccg cctcccctct ggcacgcagc tcccctccac gtagccgcgc 5700cagggcgcca cgtacagcgg cgcgcgcgct acaaatacgg tgccccgagc tccattcccc 5760agcaccagca gagtcacaca cactgagcga gctaaaccat caggaagtga tggagcatca 5820gggcggctat acgccatttg aagccgatgt cacgccgtat gttattgccg ggaaaagtgt 5880acgtatcacc gtttgtgccg gaatccatcg cagcgtaatg ctctacacca cgccgaacac 5940ctgggtggac gatatcaccg tggtgacgca tgtcgcgcaa gactgtaacc acgcgtctgt 6000tgactggcag gtggtggcca atggtgatgt cagcgttgaa ctgcgtgatg cggatcaaca 6060ggtggttgca actggacaag gcactagcgg gactttgcaa gtggtgaatc cgcacctctg 6120gcaaccgggt gaaggttatc tctatgaact gtgcgtcaca gccaaaagcc agacagagtg 6180tgatatctac ccgcttcgcg tcggcatccg gtcagtggca gtgaagggcg aacagttcct 6240gattaaccac aaaccgttct actttactgg ctttggtcgt catgaagatg cggacttgcg 6300tggcaaagga ttcgataacg tgctgttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag 6360cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga 6420tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac 6480cggctccaga tttatcagca ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc 6540ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta 6600gttcgccagt taatagtttg cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac 6660gctcgtcgtt tggtatggct tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat 6720gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa 6780gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg 6840tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag 6900aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc 6960cacatagcag aactttaaaa gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct 7020caaggatctt accgctgttg agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat 7080cttcagcatc ttttactttc accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg 7140ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc 7200aatattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta 7260tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg 7320tctaagaaac cattattatc atgacattaa cctataaaaa taggcgtatc acgaggccct 7380ttcgtctcgc gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga 7440cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag 7500cgggtgttgg cgggtgtcgg ggctggctta actatgcggc atcagagcag attgtactga 7560gagtgcacca tatgcggtgt gaaataccgc acagatgcgt aaggagaaaa taccgcatca 7620ggcgccattc gccattcagg ctgcgcaact gttgggaagg gcgatcggtg cgggcctctt 7680cgctattacg ccagctggcg aaagggggat gtgctgcaag gcgattaagt tgggtaacgc 7740cagggttttc ccagtcacga cgttgtaaaa cgacggccag tgcaagcttg catgcctgca 7800gtgcagcgtg acccggtcgt gcccctctct agagataatg agcattgcat gtctaagtta 7860taaaaaatta ccacatattt tttttgtcac acttgtttga agtgcagttt atctatcttt 7920atacatatat ttaaacttta ctctacgaat aatataatct atagtactac aataatatca 7980gtgttttaga gaatcatata aatgaacagt tagacatggt ctaaaggaca attgagtatt 8040ttgacaacag gactctacag ttttatcttt ttagtgtgca tgtgttctcc tttttttttg 8100caaatagctt cacctatata atacttcatc cattttatta gtacatccat ttagggttta 8160gggttaatgg tttttataga ctaatttttt tagtacatct attttattct attttagcct 8220ctaaattaag aaaactaaaa ctctatttta gtttttttat ttaataattt agatataaaa 8280tagaataaaa taaagtgact aaaaattaaa caaataccct ttaagaaatt aaaaaaacta 8340aggaaacatt tttcttgttt cgagtagata atgccagcct gttaaacgcc gtcgacgagt 8400ctaacggaca ccaaccagcg aaccagcagc gtcgcgtcgg gccaagcgaa gcagacggca 8460cggcatctct gtctgaatag aatacaaacc ctagaaaaac aaggcacatc tcggcgccgc 8520caatagaagg cagaaaccct agccgtcatt tttcttgaag aatatagagc gacgtcgata 8580ggaagatact taaatgttga atccaagcac ctagaataat gagttagatt agaagaaaac 8640tatcaacttc gaaatcaaga agaaatgttt tattctgttg cataaaactt tcgcgtggag 8700aagctctgtt cagagcccgg gtagccactg ggcacgtctc ctagatactg gactcatcgg 8760acgctctcct cgagttgtcc atcgagctct gtaccaagca ccgcatcgca atccactcaa 8820ccagctccgc cgcgagcagg agcgctccac gacacgcgac gcccaagctg gcacgcacct 8880cgccgatggc ccgataagca cggccgtgcg acgtggcggc ccgcctcccc tctggcacgc 8940agctcccctc cacgtagccg cgccagggcg ccacgtacag cggcgcgcgc gctacaaata 9000cggtgccccg agctccattc cccagcacca gcagagtcac acacactgag cgagctaaac 9060catggtatag ccgccctgat gctccatcac ttcctgatta ttgacccaca ctttgccgta 9120atgagtgacc gcatcgaaac gcagcacgat acgctggcct gcccaacctt tcggtataaa 9180gacttcgcgc tgataccaga cgttgcccgc ataattacga atatctgcat cggcgaactg 9240atcgttaaaa ctgcctggca cagcaattgc ccggctttct tgtaacgcgc tttcccacca 9300acgctgatca attccacagt tttcgcgatc cagactgaat gcccacaggc cgtcgagttt 9360tttgatttca cgggttgggg tttctacagg acgctattaa ttgttgccgg gaagctagag 9420taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg 9480tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag 9540ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg 9600tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttca ctgtcagacc aagtttactc 9660atatatactt tagattgatt taaaacttca tttttaattt aaaaggatct aggtgaagat 9720cctttttgat aatctcatga ccaaaatccc ttaacgtgag ttttcgttcc actgagcgtc 9780agaccccgta gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct ttttttctgc gcgtaatctg 9840ctgcttgcaa acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt tgtttgccgg atcaagagct 9900accaactctt tttccgaagg taactggctt cagcagagcg cagataccaa atactgtcct 9960tctagtgtag ccgtagttag gccaccactt caagaactct gtagcaccgc ctacatacct 10020cgctctgcta atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc gataagtcgt gtcttaccgg 10080gttggactca agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg tcgggctgaa cggggggttc 10140gtgcacacag cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa ctgagatacc tacagcgtga 10200gctatgagaa agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg gacaggtatc cggtaagcgg 10260cagggtcgga acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg ggaaacgcct ggtatcttta 10320tagtcctgtc gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga tttttgtgat gctcgtcagg 10380ggggcggagc ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt ttacggttcc tggccttttg 10440ctggcctttt gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct gattctgtgg ataaccgtat 10500taccgccttt gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga acgaccgagc gcagcgagtc 10560agtgagcgag gaagcggaag agcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc 10620gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa 10680cgcaattaat gtgagttagc tcactcatta ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc 10740ggctcgtatg ttgtgtggaa ttgtgagcgg ataacaattt cacacaggaa acagctatga 10800ccatgattac gaattccgat ctagtaacat agatgacacc gcgcgcgata atttatccta 10860gtttgcgcgc tatattttgt tttctatcgc gtattaaatg tataattgcg ggactctaat 10920cataaaaacc catctcataa ataacgtcat gcattacatg ttaattatta catgcttaac 10980gtaattcaac agaaattata tgataatcat cgcaagaccg gcaacaggat tcaatcttaa 11040gaaactttat tgccaaatgt ttgaacgatc tgcaggtcga cggatcagat ctcggtgacg 11100ggcaggaccg gacggggcgg taccggcagg ctgaagtcca gctgccagaa acccacgtca 11160tgccagttcc cgtgcttgaa gccggccgcc cgcagcatgc cgcggggggc atatccgagc 11220gcctcgtgca tgcgcacgct cgggtcgttg ggcagcccga tgacagcgac cacgctcttg 11280aagccctgtg cctccaggga cttcagcagg tgggtgtaga gcgtggagcc cagtcccgtc 11340cgctggtggc ggggggagac gtacacggtc gactcggccg tccagtcgta ggcgttgcgt 11400gccttccagg ggcccgcgta ggcgatgccg gcgacctcgc cgtccacctc ggcgacgagc 11460cagggatagc gctcccgcag acggacgagg tcgtccgtcc actcctgcgg ttcctgcggc 11520tcggtacgga agttgaccgt gcttgtctcg atgtagtggt tgacgatggt gcagaccgcc 11580ggcatgtccg cctcggtggc acggcggatg tcggccgggc gtcgttctgg gctcatggat 11640ccagctccgc cgcgagcagg agcgctccac gacacgcgac gcccaagctg gcacgcacct 11700cgccgatggc ccgataaggc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt 11760ggtggcctaa ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc 11820cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta 11880gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag 11940atcctttgat cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga 12000ttttggtcat gagattatca aaaaggatct tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa 12060gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa 12120tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc 12180ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga 12240taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa 12300gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt 12360gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg 12420ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc 12480aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg 12540gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag 12600cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt 12660actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt 12720caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac 12780gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac 12840ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag 12900caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa 12960tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga 13020gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc 13080cccgaaaagt gccacctgac gtctaagaaa ccattattat catgacatta acctataaaa 13140ataggcgtat cacgaggccc tttcgtctcg cgcgtttcgg tgatgacggt gaaaacctct 13200gacacatgca gctcccggag acggtcacag cttgtctgta agcggatgcc gggagcagac 13260aagcccgtca gggcgcgtca gcgggtgttg gcgggtgtcg gggctggctt aactatgcgg 13320catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg 13380taaggagaaa ataccgcatc aggcgccatt cgccattcag gctgcgcaac tgttgggaag 13440ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac gccagctggc gaaaggggga tgtgctgcaa 13500ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg acgttgtaaa acgacggcca 13560gtgcaagctt gcatgcctgc agtgcagcgt gacccggtcg tgcccctctc tagagataat 13620gagcattgca tgtctaagtt ataaaaaatt accacatatt ttttttgtca cacttgtttg 13680aagtgcagtt tatctatctt tatacatata tttaaacttt actctacgaa taatataatc 13740tatagtacta caataatatc agtgttttag agaatcatat aaatgaacag ttagacatgg 13800tctaaaggac aattgagtat tttgacaaca ggactctaca gttttatctt tttagtgtgc 13860atgtgttctc cttttttttt gcaaatagct tcacctatat aatacttcat ccattttatt 13920agtacatcca tttagggttt agggttaatg gtttttatag actaattttt ttagtacatc 13980tattttattc tattttagcc tctaaattaa gaaaactaaa actctatttt agttttttta 14040tttaataatt tagatataaa atagaataaa ataaagtgac taaaaattaa acaaataccc 14100tttaagaaat taaaaaaact aaggaaacat ttttcttgtt tcgagtagat aatgccagcc 14160tgttaaacgc cgtcgacgag tctaacggac accaaccagc gaaccagcag cgtcgcgtcg 14220ggccaagcga agcagacggc acggcatctc tgtcgctgcc tctggacccc tctcgagagt 14280tccgctccac cgttggactt gctccgctgt cggcatccag aaattgcgtg gcggagcggc 14340agacgtgagc cggcacggca ggcggcctcc tcctcctctc acggcaccgg cagctacggg 14400ggattccttt cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc ccgccgtaat aaatagacac 14460cccctccaca ccctctttcc ccaacctcgt gttgttcgga gcgcacacac acacaaccag 14520atctccccca aatccacccg tcggcgtacg ccgctcgtcc tccccccccc cccctctcta 14580ccttctctag atcggcgttc cggtccatgg ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat 14640gtttgtgtta gatccgtgtt tgtgttagat ccgtgctgct agcgttcgta cacggatgcg 14700acctgtacgt cagacacgtt ctgattgcta acttgccagt gtttctcttt ggggaatcct 14760gggatggctc tagccgttcc gcagacggga tcgatttcat gatttttttt gtttcgttgc 14820atagggtttg gtttgccctt ttcctttatt tcaatatatg ccgtgcactt gtttgtcggg 14880tcatcttttc atgctttttt ttgtcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 14940tctagatcgg agtagaattc cccgatctag taacatagat gacaccgcgc gcgataattt 15000atcctagttt gcgcgctata ttttgttttc tatcgcgtat taaatgtata attgcgggac 15060tctaatcata aaaacccatc tcataaataa cgtcatgcat tacatgttaa ttattacatg 15120cttaacgtaa ttcaacagaa attatatgat aatcatcgca agaccggcaa caggattcaa 15180tcttaagaaa ctttattgcc aaatgtttga acgatcgggg aaattcgagc tcttagaact 15240cccaccactt ttggaactcc caccactttt gaaggtctgg cagttgttct tcaatctcca 15300acaaactgtt tccttcttca aggtacgcaa aaccgtcgca aaacggaaca ttcatttctt 15360gaccaaacat aacgtccgga gagttcgtaa accgatcatc cgattcttca ccgctgccac 15420tactactagt tttctcttga tgcttttcgg ctacatttct cagcacctcc aattgattga 15480gtagggcctg attctctttc tttagagact cggatttaga cgcaagcgtc tcgtagttat 15540gctttagcgc gttatactct tgctcaatct gcctcgactt tgatcgcgcg cgtttgttct 15600ggaaccatat cgccacttga cgaggatgaa gcccgagttt atgtgccaac tggtgtttca 15660tccttaactc gggtctcgac tgtgtctcaa acatgtactc taggaaactt atttgtttgt 15720cggtaaatcg tctccgcccc tcgtttcggt tcttcctggt ggttgttact tgttgaagag 15780acatggatcc gagtcgacct gcagaagtaa caccaaacaa cagggtgaca ctcgacaaaa 15840gaaacagtac caagcaaata aatagcgtat gaaggcaggg ctaaaaaaat ccacatatag 15900ctgctgcata tgccatcatc caagtatatc aagatcaaaa taattataaa acatacttgt 15960ttattataat agataggtac tcaaggttag agcatatgaa tagatgctgc atatgccatc 16020atgtatatgc atcagtaaaa cccacatcaa catgtatacc tatcctagat cgatatttcc 16080atccatctta aactcgtaac tatgaacgct gtcttgacac acacatacag ttccaaaatt 16140aataaataca ccaggtagtt tgaaacagta ttctactccg atctagaacg aatgaacgac 16200cgcccaacca caccacatca tcacaaccaa gcgaacaaaa agcatctctg tatatgcatc 16260agtaaaaccc gcatcaacat gtatacctat cctagatcga tatttccatc catcatcttc 16320aattcgtaac tatgaatatg tatggcacac acatacagat ccaaaattaa taaatccacc 16380aggtagtttg aaacagaatt cgtaatcatg gtcatagctg tttcctgtgt gaaattgtta 16440tccgctcaca attccacaca acatacgagc cggaagcata aagtgtaaag cctggggtgc 16500ctaatgagtg agctaactca cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg 16560aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg 16620tattgggcgc tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg 16680gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa 16740cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc 16800gttgctggcg tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc 16860aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag 16920ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct 16980cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta 17040ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc 17100cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc 17160agcagccact ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt 17220gaagtggtgg cctaactacg gctacactag aaggacagta tttggtatct gcgctctgct 17280gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc 17340tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca 17400agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa acttttctac 17460ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca tgagattatc 17520aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag 17580tatatatgag taaacttggt ctgacagttt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt 17640cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta 17700ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta 17760tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc 17820gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat 17880agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt 17940atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg 18000tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca 18060gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta 18120agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg 18180cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact 18240ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg 18300ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt 18360actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga 18420ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc 18480atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa 18540tgtatttaga aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct 18600gacgtctaag aaaccattat tatcatgaca ttaacctata aaaataggcg tatcacgagg 18660ccctttcgtc tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg 18720gagacggtca cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg 18780tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta 18840ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc 18900atcaggcgcc attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc 18960tcttcgctat tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta 19020acgccagggt tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttgcatgc 19080ctgcagtgca gcgtgacccg gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta 19140agttataaaa aattaccaca tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta 19200tctttataca tatatttaaa ctttactcta cgaataatat aatctatagt actacaataa 19260tatcagtgtt ttagagaatc atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga 19320gtattttgac aacaggactc tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt 19380ttttgcaaat agcttcacct atataatact tcatccattt tattagtaca tccatttagg 19440gtttagggtt aatggttttt atagactaat ttttttagta catctatttt attctatttt 19500agcctctaaa ttaagaaaac taaaactcta ttttagtttt tttatttaat aatttagata 19560taaaatagaa taaaataaag tgactaaaaa ttaaacaaat accctttaag aaattaaaaa 19620aactaaggaa acatttttct tgtttcgagt agataatgcc agcctgttaa acgccgtcga 19680cgagtctaac ggacaccaac cagcgaacca gcagcgtcgc gtcgggccaa gcgaagcaga 19740cggcacggca tctctgtcgc tgcctctgga cccctctcga gagttccgct ccaccgttgg 19800acttgctccc tttattttat tctattttat atctaaatta ttaaataaaa aaactaaaat 19860agagttttag ttttcttaat ttagaggcta gtcccgaaca gtgtcctgga ggccgcacac 19920gcttcggccc cgaccctcga ttcggagccc gctgcgttcg ttgaggaaga acgattggac 19980gtcacctcag aggctgcgac attaaaggcg gtcgagtcga acgccgaccc cgcactccgc 20040gctgcccatt actccgagga gccggattct tctccggcct ccgggccttc catgcccctg 20100ccgaccgaat ccgattgggc acctgtaatg gagttcaccg ccgcggacat ctttcagtgt 20160tcacctttca gtgacatcct gaattatctc aagtctctct ctttatcagg agagcccagg 20220ccggattatg gtctgcgagg ttgggattcg gacgatgaag aaattcaaag cccacccacc 20280acccacttaa tagccactgt cgacgattta accgacatgc tcgacttcgg ctccgaagac 20340ttcgacggta tggacgacga aggaggagac gaaccggaac cagcacccac agggcactgg 20400atatccacca cacacaat 20418<210> 7<211> 300<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> 5´-фланкувальна ділянка (довга вставка)<400> 7taatggtgag tgtatgcgct tgcgtctgta ttgtgtttaa aaaactcatt ctaagaaact 60cgtcatacag tgtccaccgt caaggagcca tctagtaggg tgtggatggg catgtgacag 120gaaccttgtc gtgtgcacgt tgtatgtcgg tcttgttcaa tatgtcgtct gtttcctcgg 180cttacatgct cttttacgtg tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc 240agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg 300<210> 8<211> 385<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> 3´-фланкувальна ділянка (довга вставка)<400> 8tattacgcca gctggcgaaa gggggatgtg ctgcaaggcg attaagttgg gtaacgccag 60ggttttccca gtcacgacgt tgtaaaacga cggccagtgc gtcgactcta gaggtccctc 120gaccatggct gtaaggtcgc cgaatacaag ggcatgggtg gcgaggccta agaggagtat 180aatttcttag acatttgtca attataaact tcttggtaaa agagcatgta agccgaggaa 240acagacgaca tattgaacaa gaccgacata caacgtgcac acgacaaggt tcctgtcaca 300tgcccatcca caccctacta gatggctcct tgacggtgga cactgtatga cgagtttctt 360agaatgagtt ttttaaacac aatac 385<210> 9<211> 392<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> 5´-фланкувальна ділянка (коротка вставка)<400> 9gagcgcgctt tcctatttag gatccaaatt ggcactgata ctaaactgct tagacgaatc 60gcctggagta aaatcaacaa gctcggtttc agcagccgac ttaaacttca tcgccgggtc 120atgctcggtg gttggcttct ttagagacgt catatccgcc aggtcaacat tattttgata 180aaaattcatc tcctctgccg cacaaacaga ctcagcataa gccgcatcgc cttcttcaca 240ttctagggct acctttcgac tcccattgag ggagtcccgg attagggggt gtttggaaca 300ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta 360ctctagcttc ccggtaacaa ttaatagact gg 392<210> 10<211> 628<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> 3´-фланкувальна ділянка (коротка вставка)<400> 10ccaccgttgg acttgctccc tttattttat tctattttat atctaaatta ttaaataaaa 60aaactaaaat agagttttag ttttcttaat ttagaggcta gtcccgaaca gtgtcctgga 120ggccgcacac gcttcggccc cgaccctcga ttcggagccc gctgcgttcg ttgaggaaga 180acgattggac gtcacctcag aggctgcgac attaaaggcg gtcgagtcga acgccgaccc 240cgcactccgc gctgcccatt actccgagga gccggattct tctccggcct ccgggccttc 300catgcccctg ccgaccgaat ccgattgggc acctgtaatg gagttcaccg ccgcggacat 360ctttcagtgt tcacctttca gtgacatcct gaattatctc aagtctctct ctttatcagg 420agagcccagg ccggattatg gtctgcgagg ttgggattcg gacgatgaag aaattcaaag 480cccacccacc acccacttaa tagccactgt cgacgattta accgacatgc tcgacttcgg 540ctccgaagac ttcgacggta tggacgacga aggaggagac gaaccggaac cagcacccac 600agggcactgg atatccacca cacacaat 628<210> 11<211> 23<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> HB4, прямий праймер<400> 11gggcttcatc ctggtcaagt ggc 23<210> 12<211> 30<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> HB4, зворотний праймер<400> 12tcttgatgct tttctgctac atttctcagc 30<210> 13<211> 26<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Bar, прямий праймер<400> 13cacgcaacgc ctacgactgg acggcc 26<210> 14<211> 24<212> ДНК<213> Штучна послідовність<220><223> Bar, зворотний праймер<400> 14gtaccggcag gctgaagtcc agct 24
РИСУНКИ З ОФІЦІЙНОГО ОПИСУ
Технічні рисунки
ОФІЦІЙНІ ФАЙЛИ
Документи реєстрового запису
офіційний документ УКРНОІВІВідкрити ↗
офіційний документ УКРНОІВІВідкрити ↗
офіційний документ УКРНОІВІВідкрити ↗
офіційний документ УКРНОІВІВідкрити ↗
офіційний документ УКРНОІВІВідкрити ↗
УЧАСНИКИ
Власники, заявники та автори
Власники прав
БЕ
БАЙОСІРІЗ ЕЛЕЛСІСполучені Штати Америки
БЭ
БАЙОСИРИЗ ЭЛЭЛСИСполучені Штати Америки
BL
BIOCERES LLCСполучені Штати Америки
Заявники
БЕ
БАЙОСІРІЗ ЕЛЕЛСІСполучені Штати Америки
БЭ
БАЙОСИРИЗ ЭЛЭЛСИСполучені Штати Америки
BL
BIOCERES LLCСполучені Штати Америки
Винахідники
МП
Міранда ПатрісіяAR
МП
Миранда ПатрисияAR
MP
Miranda, PatriciaAR
ВМ
Васкес МартінAR
ВМ
Васкес МартинAR
VM
Vázquez, MartinAR
ДК
Десар КарлосAR
DC
Dezar, CarlosAR
АФ
Айала ФрансіскоAR
АФ
Айала ФрансискоAR
AF
Ayala, FranciscoAR
УД
Уотсон ДжеронімоAR
УД
Уотсон ДжеронимоAR
WG
Watson, GerónimoAR
Адреси учасників показані лише до рівня країни, області та населеного пункту — без вулиці й номера будинку.
ДІЛОВОДСТВО ТА БІБЛІОГРАФІЯ
Повна історія реєстрового запису
- ✓Патент зареєстровано
- ✓Підготовка до державної реєстрації та публікації
- ✓Очікування документа про сплату державного мита
- ✓Кваліфікаційна експертиза
- ✓Очікування клопотання про проведення кваліфікаційної експертизи
- ✓Формальна експертиза
- ✓Встановлення дати подання
- ✓Реєстрація первинних документів, попередня експертиза та введення відомостей до бази даних
- Вид документаI_12
- Патент України (на 20 р.)
- Код виду документаI_13
- C2
- Установа публікаціїI_19
- UA
- Дата початку дії правI_24
- 2026-05-21
- Публікація заявкиI_43.D
- 2022-10-26
- Бюлетень заявкиI_43_bul_str
- 43/2022
- Офіційний бюлетеньI_45_bul_str
- 20/2026
- Попередній рівень технікиI_56
- 3 · Field-grown transgenic wheat expressing the sunflower gene HaHB4 significantly outyelds the wild type / F. GONZALEZ et al. // Journal of Experimental Botany. 2019. Vol. 70(5). P. 1669-1681 · 2 · US 2013/0263327 A1, 10.03.2013 · US 2016/0130594 A1, 12.05.2016 · US 6121521 A, 19.09.2000 · DATABASE NCBI [online] 10. October 2019 (2019-10-10), “SubName: Hordeum vulgare genome assembly, chromosome 4H”, retrieved from the Internet URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/LR722619.1/ Database accession no. LR722619.1 · DATABASE NCBI [online] 07. June 2018 (2018-06-07), “SubName: Triticum aestivum genome assembly, chromosome II”, retrieved from the Internet URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/LS480641 Database accession no. LS480641.1 · Compositional equivalence of event IND-ØØ412-7 to non-transgenic wheat / F. AYALA et al. // Transgenic Research. 17.01.2019. Vol. 28(2). P. 165-176 · CN 1936016 A, 28.03.2007
- Перехід до національної фази PCTI_85
- 2022-09-20
- Міжнародна заявка PCTI_86
- 2020-02-05
- Додаткові бібліографічні відомостіI_98
- м. Київ
ПЕРШОДЖЕРЕЛО
Офіційний запис
Інформація має довідковий характер. Для юридично значущої перевірки використовуйте офіційний реєстр.